Etude des Lymphocytes T Cytotoxiques Spécifiques LMP1 et LMP2 (CTL) (DELLA)

Alors que les patients atteints d'un carcinome du nasopharynx (NPC) peuvent être guéris par la chimiothérapie et la radiothérapie, les perspectives pour les patients qui résistent à ce traitement ou qui rechutent sont mauvaises. Presque tous les patients atteints d'un carcinome nasopharyngé indifférencié ont le virus EBV dans leurs tumeurs, ce qui peut être une cible pour les approches d'immunothérapie. Nous avons utilisé avec succès des cellules spécialisées du système immunitaire cultivées en laboratoire et formées pour reconnaître et tuer les cellules infectées par l'EBV (lymphocytes T cytotoxiques spécifiques à l'EBV [EBV-CTL]) pour prévenir et traiter un autre type de cancer appelé lymphome post-greffe qui survient après greffe de moelle osseuse. Dans le lymphome post-transplantation, les cellules tumorales possèdent à leur surface 9 protéines fabriquées par l'EBV. Cependant, dans le carcinome du nasopharynx qui se développe chez des patients ayant un système immunitaire normal, les cellules tumorales n'expriment que 2 protéines EBV qui sont beaucoup plus difficiles à reconnaître pour le système immunitaire. Dans une étude précédente, nous avons créé un EBV-CTL qui reconnaissait les 9 protéines et les a données aux patients atteints de NPC. Pour les patients sans signe de maladie active au moment du traitement, la maladie reste en rémission. Pour les patients présentant une maladie active au moment où ils ont reçu le CTL, certains patients ont eu une réponse partielle à cette thérapie, et seuls trois patients ont eu une réponse complète. Nous pensons que la principale raison en est que de nombreuses cellules T ont réagi avec des protéines EBV qui ne se trouvaient pas sur les cellules tumorales, et l'autre est que les cellules T infusées n'ont pas assez d'espace pour se développer.

Les deux protéines EBV présentes sur les cellules tumorales NPC qui sont de bonnes cibles pour les thérapies par lymphocytes T sont appelées LMP1 et LMP2. Nous prévoyons donc de générer des cellules T spécifiques pour LMP1 et LMP2 et d'infuser ces cellules chez des patients NPC. Pour fabriquer LMP1- et LMP2-CTL, nous avons obtenu du sang des patients et développé un type spécial de cellule appelée cellule dendritique (DC) et des cellules lymphoblastoïdes infectées par l'EBV (LCL). Nous avons ensuite transféré un vecteur adénoviral qui porte les gènes LMP1 et LMP2 dans les DC et les LCL. Ces DC et LCL sont ensuite traités par rayonnement afin qu'ils ne puissent pas se développer et sont utilisés pour stimuler et développer LMP1- et LMP2-CTL. Cette stimulation entraîne les cellules T à tuer les cellules cancéreuses avec LMP1 et LMP2 à leur surface.

Pour «créer de l'espace» pour la croissance d'EBV-CTL après perfusion chez des patients NPC, nous avons déjà utilisé une protéine spéciale appelée anticorps CD45, qui élimine pendant une courte période la plupart des cellules T du patient. Les résultats préliminaires de cette étude sont encourageants : l'utilisation de l'anticorps CD45 est sûre et nous avons observé une croissance accrue de l'EBV-CTL après la perfusion. De plus, tous les patients qui ont une croissance EBV-CTL ont eu des réponses cliniques.

Nous et d'autres avons démontré la faisabilité de la thérapie CTL pour les NPC EBV-positifs chez les patients immunocompétents, fournissant des preuves préliminaires de l'activité anti-tumorale de l'EBV-CTL dans cette population de patients. Cependant, tous les patients n'ont pas répondu, ce qui suggère la nécessité d'une amélioration supplémentaire. Nous proposons que l'échec CTL peut être surmonté en augmentant la spécificité du produit CTL infusé. C'est-à-dire que la perfusion de CTL spécifiques pour LMP1 et LMP2 produira un plus grand bénéfice clinique que les CTL spécifiques à l'EBV. La justification de cette approche est simple : les lignées CTL spécifiques à l'EBV générées par des méthodes standard sont dominées par des clones de lymphocytes T non réactifs aux protéines sous-dominantes de l'EBV LMP1 et LMP2 exprimées dans NPC. Nous proposons également que l'incapacité des CTL transférés de manière adoptive à se développer de manière mesurable dans le sang périphérique des patients NPC est une conséquence à la fois de l'homéostasie lymphoïde chez ces patients lympho-remplis et de l'infiltrat de lymphocytes T inhibiteurs aux sites de la maladie. Nous utiliserons donc des anticorps monoclonaux ciblant l'antigène CD45 (AcM CD45) pour lymphodépléter les patients NPC avant la perfusion de CTL spécifiques à l'EBV. Les résultats préliminaires indiquent que la déplétion de CD45 MAb peut augmenter l'expansion des CTL, et qu'une telle expansion est associée à un taux de réponse à la maladie plus élevé. Nous allons confirmer et étendre ces nouvelles données prometteuses dans cet essai clinique de Phase I.