Studie van LMP1- en LMP2-specifieke cytotoxische T-lymfocyten (CTL) (DELLA)

Hoewel patiënten met nasofarynxcarcinoom (NPC) kunnen worden genezen door chemotherapie en radiotherapie, zijn de vooruitzichten voor patiënten die resistent zijn tegen deze behandeling of die terugvallen slecht. Bijna alle patiënten met ongedifferentieerd nasofarynxcarcinoom hebben het EBV-virus in hun tumoren, wat een doelwit kan zijn voor immunotherapiebenaderingen. We hebben met succes gespecialiseerde cellen van het immuunsysteem gebruikt die in het laboratorium zijn gekweekt en getraind om met EBV geïnfecteerde cellen (EBV-specifieke cytotoxische T-lymfocyten [EBV-CTL]) te herkennen en te doden om een ​​ander type kanker, posttransplantatielymfoom genaamd, te voorkomen en te behandelen. beenmerg transplantatie. Bij lymfoom na transplantatie hebben de tumorcellen 9 eiwitten gemaakt door EBV op hun oppervlak. Bij nasofarynxcarcinoom dat zich ontwikkelt bij patiënten met een normaal immuunsysteem, brengen de tumorcellen echter slechts 2 EBV-eiwitten tot expressie die voor het immuunsysteem veel moeilijker te herkennen zijn. In een eerdere studie hebben we EBV-CTL gemaakt die alle 9 eiwitten herkende en aan patiënten met NPC gaf. Voor patiënten zonder bewijs van actieve ziekte op het moment van therapie, blijft hun ziekte in remissie. Voor die patiënten met actieve ziekte op het moment dat ze CTL kregen, hadden sommige patiënten een gedeeltelijke respons op deze therapie en slechts drie patiënten hadden een volledige respons. We denken dat de belangrijkste reden hiervoor is dat veel van de T-cellen reageerden met EBV-eiwitten die niet op de tumorcellen zaten, en de andere reden is dat de geïnfundeerde T-cellen niet genoeg ruimte hebben om te groeien.

De twee EBV-eiwitten die aanwezig zijn op NPC-tumorcellen en die goede doelen zijn voor T-celtherapieën, worden LMP1 en LMP2 genoemd. We zijn daarom van plan T-cellen te genereren die specifiek zijn voor LMP1 en LMP2 en deze cellen toe te dienen aan NPC-patiënten. Om LMP1- en LMP2-CTL te maken, hebben we bloed van de patiënten verkregen en een speciaal type cel gekweekt, een dendritische cel (DC) en EBV-geïnfecteerde lymfoblastoïde cellen (LCL) genoemd. Vervolgens hebben we een adenovirusvector overgebracht die het LMP1- en LMP2-gen in de DC en de LCL draagt. Deze DC en LCL worden vervolgens bestraald zodat ze niet kunnen groeien en worden gebruikt om LMP1- en LMP2-CTL te stimuleren en uit te breiden. Deze stimulatie traint de T-cellen om kankercellen met LMP1 en LMP2 op hun oppervlak te doden.

Om 'ruimte te creëren' voor EBV-CTL-groei na infusie bij NPC-patiënten hebben we al een speciaal eiwit gebruikt, een CD45-antilichaam genaamd, dat gedurende een korte periode de meeste T-cellen van de patiënt verwijdert. De voorlopige resultaten van deze studie zijn bemoedigend: het gebruik van het CD45-antilichaam is veilig en we hebben na infusie een verbeterde EBV-CTL-groei waargenomen. Bovendien vertoonden alle patiënten met EBV-CTL-groei klinische reacties.

Wij en anderen hebben de haalbaarheid van CTL-therapie voor EBV-positieve NPC bij immunocompetente patiënten aangetoond, waarbij voorlopig bewijs is geleverd van antitumoractiviteit van EBV-CTL in deze patiëntenpopulatie. Niet alle patiënten reageerden echter, wat de noodzaak van verdere verbetering suggereert. We stellen voor dat CTL-falen kan worden overwonnen door de specificiteit van het geïnfundeerde CTL-product te vergroten. Dat wil zeggen, infusie van CTL specifiek voor LMP1 en LMP2 zal een groter klinisch voordeel opleveren dan EBV-specifieke CTL. De grondgedachte voor deze benadering is ongecompliceerd: EBV-specifieke CTL-lijnen gegenereerd door standaardmethoden worden gedomineerd door T-celklonen die niet reageren op de subdominante EBV-eiwitten LMP1 en LMP2 die tot expressie worden gebracht in NPC. We stellen ook voor dat het falen van adoptief overgedragen CTL om meetbaar uit te breiden in het perifere bloed van NPC-patiënten een gevolg is van zowel lymfoïde homeostase bij deze lymfo-repletie patiënten als van het remmende T-celinfiltraat op de plaatsen van de ziekte. We zullen daarom monoklonale antilichamen gebruiken die gericht zijn op het CD45-antigeen (CD45 MAbs), om NPC-patiënten te lymfodepleteren voorafgaand aan de infusie van EBV-specifieke CTL. Voorlopige resultaten geven aan dat CD45 MAb-uitputting CTL-expansie kan vergroten, en dat een dergelijke expansie geassocieerd is met een hoger ziekteresponspercentage. We zullen deze veelbelovende nieuwe gegevens bevestigen en uitbreiden in deze Fase I klinische studie.