LMP1- ja LMP2-spesifisten sytotoksisten T-lymfosyyttien (CTL) tutkimus (DELLA)

Vaikka nenänielun karsinoomaa (NPC) sairastavat potilaat voidaan parantaa kemoterapialla ja sädehoidolla, tälle hoidolle vastustuskykyisten tai uusiutuvien potilaiden näkymät ovat huonot. Lähes kaikilla potilailla, joilla on erilaistumaton nenänielun syöpä, kasvaimissa on EBV-virus, joka voi olla immunoterapian kohde. Olemme menestyksekkäästi käyttäneet erikoistuneita immuunijärjestelmän soluja, jotka on kasvatettu laboratoriossa ja jotka on koulutettu tunnistamaan ja tappamaan EBV-infektoituneet solut (EBV-spesifiset sytotoksiset T-lymfosyytit [EBV-CTL]) toisen tyyppisen syövän, jota kutsutaan elinsiirron jälkeiseksi lymfoomaksi, ehkäisemiseksi ja hoitamiseksi. luuytimensiirto. Siirron jälkeisessä lymfoomassa kasvainsolujen pinnalla on 9 EBV:n valmistamaa proteiinia. Kuitenkin nenänielun karsinoomassa, joka kehittyy potilailla, joilla on normaali immuunijärjestelmä, kasvainsolut ilmentävät vain kahta EBV-proteiinia, jotka immuunijärjestelmän on paljon vaikeampi tunnistaa. Aiemmassa tutkimuksessa teimme EBV-CTL:n, joka tunnisti kaikki 9 proteiinia ja antoi niitä potilaille, joilla oli NPC. Potilailla, joilla ei ole merkkejä aktiivisesta sairaudesta hoidon aikana, sairaus on edelleen remissiossa. Niillä potilailla, joilla oli aktiivinen sairaus CTL:n saamisen aikaan, joillakin potilailla oli osittainen vaste tähän hoitoon, ja vain kolmella potilaalla oli täydellinen vaste. Mielestämme suurin syy tähän on se, että monet T-soluista reagoivat EBV-proteiinien kanssa, jotka eivät olleet kasvainsoluissa, ja toinen on se, että infusoiduilla T-soluilla ei ole tarpeeksi tilaa kasvaa.

Näitä kahta EBV-proteiinia, joita esiintyy NPC-kasvainsoluissa ja jotka ovat hyviä kohteita T-soluhoitoille, kutsutaan nimellä LMP1 ja LMP2. Suunnittelemme siksi LMP1- ja LMP2-spesifisten T-solujen luomista ja näiden solujen infusoimista NPC-potilaisiin. LMP1- ja LMP2-CTL:n valmistamiseksi olemme hankkineet potilailta verta ja kasvattaneet erityistä solutyyppiä nimeltä dendriittisolu (DC) ja EBV-infektoituneet lymfoblastoidisolut (LCL). Olemme sitten siirtäneet adenovirusvektorin, joka kuljettaa LMP1- ja LMP2-geeniä DC:hen ja LCL:ään. Näitä DC ja LCL käsitellään sitten säteilyllä, jotta ne eivät voi kasvaa, ja niitä käytetään stimuloimaan ja laajentamaan LMP1- ja LMP2-CTL. Tämä stimulaatio kouluttaa T-solut tappamaan syöpäsoluja LMP1:llä ja LMP2:lla niiden pinnalla.

Olemme jo käyttäneet erityistä proteiinia nimeltä CD45-vasta-aine EBV-CTL-kasvun "luomiseksi" infuusion jälkeen NPC-potilailla, joka poistaa lyhyen aikaa suurimman osan potilaan T-soluista. Tämän tutkimuksen alustavat tulokset ovat rohkaisevia: CD45-vasta-aineen käyttö on turvallista ja havaitsimme tehostuneen EBV-CTL-kasvun infuusion jälkeen. Lisäksi kaikilla potilailla, joilla oli EBV-CTL-kasvua, oli kliinisiä vasteita.

Me ja muut olemme osoittaneet CTL-hoidon toteutettavuuden EBV-positiiviselle NPC:lle immunokompetenteilla potilailla, tarjoten alustavan todisteen EBV-CTL:n kasvaimia estävästä vaikutuksesta tässä potilaspopulaatiossa. Kaikki potilaat eivät kuitenkaan vastanneet, mikä viittaa siihen, että lisäparannuksia tarvitaan. Ehdotamme, että CTL-vika voidaan voittaa lisäämällä infusoidun CTL-tuotteen spesifisyyttä. Toisin sanoen LMP1:lle ja LMP2:lle spesifisten CTL:ien infuusio tuottaa suuremman kliinisen hyödyn kuin EBV-spesifiset CTL:t. Tämän lähestymistavan perusteet ovat suoraviivaisia: EBV-spesifisiä CTL-linjoja, jotka on luotu standardimenetelmillä, hallitsevat T-solukloonit, jotka eivät ole reaktiivisia NPC:ssä ilmennettyjen subdominanttien EBV-proteiinien LMP1 ja LMP2 kanssa. Ehdotamme myös, että adoptiivisesti siirretyn CTL:n epäonnistuminen laajenemassa mitattavissa olevasti NPC-potilaiden perifeerisessä veressä on seurausta sekä lymfoidista homeostaasista näissä lymforeplete-potilaissa että estävästä T-soluinfiltraatista sairauskohdissa. Siksi käytämme monoklonaalisia vasta-aineita, jotka kohdistuvat CD45-antigeeniin (CD45 MAb:t), lymfodepletoituneiden NPC-potilaiden ennen EBV-spesifisten CTL-infuusiota. Alustavat tulokset osoittavat, että CD45 MAb:n ehtyminen voi lisätä CTL:n laajenemista ja että tällainen laajentuminen liittyy korkeampaan sairauden vasteen määrään. Vahvistamme ja laajennamme nämä lupaavat uudet tiedot tässä vaiheen I kliinisessä tutkimuksessa.