LMP1 和 LMP2 特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 的研究 (DELLA)

虽然鼻咽癌 (NPC) 患者可以通过化疗和放疗治愈，但对这种治疗有抵抗力或复发的患者前景不佳。 几乎所有未分化鼻咽癌患者的肿瘤中都有 EBV 病毒，这可能是免疫治疗方法的目标。 我们已经成功地使用在实验室培养并经过训练以识别和杀死 EBV 感染细胞（EBV 特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 [EBV-CTL]）的专门免疫系统细胞来预防和治疗另一种称为移植后淋巴瘤的癌症，这种癌症发生在移植后骨髓移植。 在移植后淋巴瘤中，肿瘤细胞表面有 9 种由 EB 病毒制造的蛋白质。 然而，在免疫系统正常的患者身上发展的鼻咽癌中，肿瘤细胞仅表达 2 种 EBV 蛋白，免疫系统更难识别这些蛋白。 在之前的一项研究中，我们制作了能够识别所有 9 种蛋白质的 EBV-CTL，并将它们提供给 NPC 患者。 对于在治疗时没有活动性疾病证据的患者，疾病仍处于缓解期。 对于那些在接受 CTL 治疗时患有活动性疾病的患者，一些患者对该疗法有部分反应，只有三名患者有完全反应。 我们认为造成这种情况的主要原因是许多 T 细胞与不在肿瘤细胞上的 EBV 蛋白发生反应，另一个是输注的 T 细胞没有足够的生长空间。

NPC 肿瘤细胞上存在的两种 EBV 蛋白是 T 细胞疗法的良好靶标，称为 LMP1 和 LMP2。 因此，我们计划生成 LMP1 和 LMP2 特异性 T 细胞，并将这些细胞注入 NPC 患者体内。 为了制造 LMP1-和 LMP2-CTL，我们从患者身上获取了血液，并培养了一种特殊类型的细胞，称为树突状细胞 (DC) 和 EBV 感染的淋巴母细胞 (LCL)。 然后我们将携带 LMP1 和 LMP2 基因的腺病毒载体转移到 DC 和 LCL 中。 然后对这些 DC 和 LCL 进行辐射处理，使其无法生长，并用于刺激和扩展 LMP1-和 LMP2-CTL。 这种刺激训练 T 细胞杀死表面带有 LMP1 和 LMP2 的癌细胞。

为了在 NPC 患者输注后为 EBV-CTL 生长“创造空间”，我们已经使用了一种称为 CD45 抗体的特殊蛋白质，它可以在短时间内去除患者的大部分 T 细胞。 这项研究的初步结果令人鼓舞：使用 CD45 抗体是安全的，我们观察到输注后 EBV-CTL 生长增强。 此外，所有具有 EBV-CTL 生长的患者都有临床反应。

我们和其他人已经证明了在免疫功能正常的患者中使用 CTL 治疗 EBV 阳性 NPC 的可行性，提供了 EBV-CTL 在该患者群体中的抗肿瘤活性的初步证据。 然而，并非所有患者都有反应，这表明需要进一步改进。 我们建议可以通过增加输注 CTL 产品的特异性来克服 CTL 失败。 也就是说，输注 LMP1 和 LMP2 特异性 CTL 将产生比 EBV 特异性 CTL 更大的临床益处。 这种方法的基本原理很简单：通过标准方法生成的 EBV 特异性 CTL 系主要是 T 细胞克隆，这些克隆对 NPC 中表达的亚优势 EBV 蛋白 LMP1 和 LMP2 没有反应。 我们还提出，过继转移的 CTL 未能在 NPC 患者的外周血中显着扩增是这些淋巴细胞充足患者的淋巴稳态和疾病部位抑制性 T 细胞浸润的结果。 因此，我们将使用靶向 CD45 抗原的单克隆抗体 (CD45 MAb)，在输注 EBV 特异性 CTL 之前对 NPC 患者进行淋巴细胞清除。 初步结果表明，CD45 MAb 耗竭可以增加 CTL 扩增，并且这种扩增与更高的疾病反应率相关。 我们将在本次 I 期临床试验中确认并扩展这些有希望的新数据。