Badanie cytotoksycznych limfocytów T (CTL) swoistych dla LMP1 i LMP2 (DELLA)

Chociaż pacjentów z rakiem nosowo-gardłowym (NPC) można wyleczyć chemioterapią i radioterapią, perspektywy dla pacjentów opornych na to leczenie lub z nawrotem są złe. Prawie wszyscy pacjenci z niezróżnicowanym rakiem nosogardzieli mają wirusa EBV w guzach, które mogą być celem immunoterapii. Z powodzeniem wykorzystaliśmy wyspecjalizowane komórki układu odpornościowego wyhodowane w laboratorium i przeszkolone w rozpoznawaniu i zabijaniu komórek zakażonych EBV (cytotoksyczne limfocyty T swoiste dla EBV [EBV-CTL]) w celu zapobiegania i leczenia innego rodzaju raka, zwanego chłoniakiem po przeszczepie, który występuje po Przeszczep szpiku kostnego. W przypadku chłoniaka po przeszczepie komórki nowotworowe mają na swojej powierzchni 9 białek wytwarzanych przez EBV. Jednak w raku nosowo-gardłowym, który rozwija się u pacjentów z prawidłowym układem odpornościowym, komórki nowotworowe wyrażają tylko 2 białka EBV, które są znacznie trudniejsze do rozpoznania przez układ odpornościowy. W poprzednim badaniu stworzyliśmy EBV-CTL, który rozpoznał wszystkie 9 białek i podaliśmy je pacjentom z NPC. U pacjentów bez oznak aktywnej choroby w czasie terapii choroba pozostaje w remisji. W przypadku pacjentów z aktywną chorobą w czasie, gdy otrzymywali CTL, niektórzy pacjenci mieli częściową odpowiedź na tę terapię, a tylko trzech pacjentów miało całkowitą odpowiedź. Uważamy, że głównym tego powodem jest to, że wiele komórek T reagowało z białkami EBV, których nie było na komórkach nowotworowych, a drugim jest to, że limfocyty T poddane infuzji nie mają wystarczającej przestrzeni do wzrostu.

Dwa białka EBV obecne na komórkach nowotworowych NPC, które są dobrymi celami dla terapii komórkami T, nazywane są LMP1 i LMP2. Dlatego planujemy wygenerować limfocyty T swoiste dla LMP1 i LMP2 i podać te komórki pacjentom z NPC. Aby wytworzyć LMP1- i LMP2-CTL, uzyskaliśmy krew od pacjentów i wyhodowaliśmy specjalny typ komórek zwany komórkami dendrytycznymi (DC) oraz komórki limfoblastoidalne (LCL) zakażone EBV. Następnie przenieśliśmy wektor adenowirusowy, który przenosi geny LMP1 i LMP2 do DC i LCL. Te DC i LCL są następnie traktowane promieniowaniem, aby nie mogły rosnąć i są wykorzystywane do stymulacji i ekspansji LMP1- i LMP2-CTL. Ta stymulacja uczy komórki T zabijania komórek nowotworowych za pomocą LMP1 i LMP2 na ich powierzchni.

Aby „stworzyć przestrzeń” dla wzrostu EBV-CTL po infuzji u pacjentów z NPC, użyliśmy już specjalnego białka zwanego przeciwciałem CD45, które usuwa na krótki czas większość limfocytów T pacjenta. Wstępne wyniki tego badania są zachęcające: stosowanie przeciwciała CD45 jest bezpieczne i zaobserwowaliśmy zwiększony wzrost EBV-CTL po infuzji. Ponadto wszyscy pacjenci ze wzrostem EBV-CTL mieli odpowiedzi kliniczne.

My i inni wykazaliśmy wykonalność terapii CTL dla EBV-dodatnich NPC u pacjentów z prawidłową odpornością, dostarczając wstępnych dowodów na działanie przeciwnowotworowe EBV-CTL w tej populacji pacjentów. Nie wszyscy pacjenci odpowiedzieli jednak, co sugeruje potrzebę dalszej poprawy. Proponujemy, aby niepowodzenie CTL można było przezwyciężyć poprzez zwiększenie specyficzności podawanego produktu CTL. Oznacza to, że infuzja CTL specyficznych dla LMP1 i LMP2 przyniesie większe korzyści kliniczne niż CTL specyficzne dla EBV. Uzasadnienie tego podejścia jest proste: linie CTL specyficzne dla EBV generowane standardowymi metodami są zdominowane przez klony komórek T, które nie reagują na subdominujące białka EBV LMP1 i LMP2 wyrażane w NPC. Proponujemy również, że niezdolność adopcyjnie przeniesionego CTL do mierzalnej ekspansji we krwi obwodowej pacjentów z NPC jest konsekwencją zarówno homeostazy limfoidalnej u tych pacjentów z limfocytami, jak i hamującego nacieku komórek T w miejscach choroby. Dlatego użyjemy przeciwciał monoklonalnych ukierunkowanych na antygen CD45 (MAb CD45) do pacjentów z limfodeplecją NPC przed infuzją CTL specyficznych dla EBV. Wstępne wyniki wskazują, że niedobór MAb CD45 może zwiększać ekspansję CTL i że taka ekspansja wiąże się z wyższym odsetkiem odpowiedzi na chorobę. Potwierdzimy i rozszerzymy te obiecujące nowe dane w tym badaniu klinicznym I fazy.