Undersøgelse af LMP1- og LMP2-specifikke cytotoksiske T-lymfocytter (CTL) (DELLA)

Mens patienter med nasopharyngeal carcinom (NPC) kan helbredes ved kemoterapi og strålebehandling, er udsigterne for patienter, der er resistente over for denne behandling, eller som får tilbagefald, dårlige. Næsten alle patienter med udifferentieret nasopharyngeal carcinom har EBV-virus i deres tumorer, som kan være et mål for immunterapi-tilgange. Vi har med succes brugt specialiserede immunsystemceller dyrket i laboratoriet og trænet til at genkende og dræbe EBV-inficerede celler (EBV-specifikke cytotoksiske T-lymfocytter [EBV-CTL]) til at forebygge og behandle en anden type cancer kaldet post-transplantation lymfom, der opstår efter knoglemarvstransplantation. Ved post-transplantation lymfom har tumorcellerne 9 proteiner lavet af EBV på deres overflade. Men i nasopharyngeal carcinom, der udvikler sig hos patienter med et normalt immunsystem, udtrykker tumorcellerne kun 2 EBV-proteiner, som er meget sværere for immunsystemet at genkende. I en tidligere undersøgelse lavede vi EBV-CTL, der genkendte alle 9 proteiner og gav dem til patienter med NPC. For patienter uden tegn på aktiv sygdom på behandlingstidspunktet forbliver sygdommen i remission. For de patienter med aktiv sygdom på det tidspunkt, de modtog CTL, havde nogle patienter et delvist respons på denne terapi, og kun tre patienter havde et fuldstændigt respons. Vi tror, ​​at hovedårsagen til dette er, at mange af T-cellerne reagerede med EBV-proteiner, der ikke var på tumorcellerne, og den anden er, at de infunderede T-celler ikke har plads nok til at vokse.

De to EBV-proteiner, der findes på NPC-tumorceller, og som er gode mål for T-celleterapier, kaldes LMP1 og LMP2. Vi planlægger derfor at generere T-celler, der er specifikke for LMP1 og LMP2 og infundere disse celler i NPC-patienter. For at lave LMP1- og LMP2-CTL har vi fået blod fra patienterne og dyrket en speciel celletype kaldet en dendritisk celle (DC) og EBV-inficerede lymfoblastoide celler (LCL). Vi har derefter overført en adenovirusvektor, der bærer LMP1- og LMP2-genet til DC og LCL. Disse DC og LCL bliver derefter behandlet med stråling, så de ikke kan vokse og bruges til at stimulere og udvide LMP1- og LMP2-CTL. Denne stimulering træner T-cellerne til at dræbe kræftceller med LMP1 og LMP2 på deres overflade.

For at 'skabe plads' til EBV-CTL-vækst efter infusion hos NPC-patienter har vi allerede brugt et særligt protein kaldet et CD45-antistof, som i en kort periode fjerner de fleste af patientens T-celler. De foreløbige resultater af denne undersøgelse er opmuntrende: brugen af ​​CD45-antistoffet er sikkert, og vi observerede øget EBV-CTL-vækst efter infusion. Derudover havde alle patienter, som har EBV-CTL-vækst, klinisk respons.

Vi og andre har demonstreret gennemførligheden af ​​CTL-terapi for EBV-positiv NPC i immunkompetente patienter, hvilket giver foreløbige beviser for antitumoraktivitet af EBV-CTL i denne patientpopulation. Ikke alle patienter reagerede dog, hvilket tyder på behovet for yderligere forbedringer. Vi foreslår, at CTL-fejl kan overvindes ved at øge specificiteten af ​​det infunderede CTL-produkt. Det vil sige, at infusion af CTL, der er specifik for LMP1 og LMP2, vil give større klinisk fordel end EBV-specifik CTL. Begrundelsen for denne tilgang er ligetil: EBV-specifikke CTL-linjer genereret ved standardmetoder er domineret af T-cellekloner, der ikke er reaktive over for de subdominante EBV-proteiner LMP1 og LMP2 udtrykt i NPC. Vi foreslår også, at manglende målbar udvidelse af adoptivt overført CTL i det perifere blod hos NPC-patienter er en konsekvens af både lymfoid homeostase hos disse lymfo-fyldte patienter og af det inhiberende T-celle-infiltrat på sygdomsstederne. Vi vil derfor bruge monoklonale antistoffer rettet mod CD45-antigenet (CD45 MAbs) til at lymfodeplete NPC-patienter før infusion af EBV-specifik CTL. Foreløbige resultater indikerer, at CD45 MAb-udtømning kan øge CTL-udvidelsen, og at en sådan udvidelse er forbundet med en højere sygdomsresponsrate. Vi vil bekræfte og udvide disse lovende nye data i dette fase I kliniske forsøg.