Studio dei linfociti T citotossici specifici per LMP1 e LMP2 (CTL) (DELLA)

Mentre i pazienti con carcinoma nasofaringeo (NPC) possono essere curati con la chemioterapia e la radioterapia, le prospettive per i pazienti che sono resistenti a questo trattamento o che hanno una ricaduta sono scarse. Quasi tutti i pazienti con carcinoma rinofaringeo indifferenziato hanno il virus EBV nei loro tumori che possono essere un bersaglio per approcci immunoterapici. Abbiamo utilizzato con successo cellule specializzate del sistema immunitario coltivate in laboratorio e addestrate a riconoscere e uccidere le cellule infette da EBV (linfociti T citotossici specifici per EBV [EBV-CTL]) per prevenire e curare un altro tipo di cancro chiamato linfoma post-trapianto che si verifica dopo trapianto di midollo osseo. Nel linfoma post-trapianto, le cellule tumorali hanno 9 proteine ​​prodotte dall'EBV sulla loro superficie. Tuttavia, nel carcinoma nasofaringeo che si sviluppa in pazienti con un sistema immunitario normale, le cellule tumorali esprimono solo 2 proteine ​​EBV che sono molto più difficili da riconoscere per il sistema immunitario. In uno studio precedente abbiamo realizzato EBV-CTL che riconosceva tutte e 9 le proteine ​​e le dava a pazienti con NPC. Per i pazienti senza evidenza di malattia attiva al momento della terapia, la malattia rimane in remissione. Per quei pazienti con malattia attiva al momento in cui hanno ricevuto CTL, alcuni pazienti hanno avuto una risposta parziale a questa terapia e solo tre pazienti hanno avuto una risposta completa. Pensiamo che la ragione principale di ciò sia che molte delle cellule T hanno reagito con le proteine ​​EBV che non erano sulle cellule tumorali, e l'altra è che le cellule T infuse non hanno abbastanza spazio per crescere.

Le due proteine ​​EBV presenti sulle cellule tumorali NPC che sono buoni bersagli per le terapie con cellule T sono chiamate LMP1 e LMP2. Stiamo quindi progettando di generare cellule T specifiche per LMP1 e LMP2 e infondere queste cellule in pazienti NPC. Per produrre LMP1- e LMP2-CTL, abbiamo ottenuto sangue dai pazienti e coltivato un tipo speciale di cellula chiamata cellula dendritica (DC) e cellule linfoblastoidi infette da EBV (LCL). Abbiamo quindi trasferito un vettore di adenovirus che trasporta il gene LMP1 e LMP2 nella DC e nella LCL. Questi DC e LCL vengono quindi trattati con radiazioni in modo che non possano crescere e vengono utilizzati per stimolare ed espandere LMP1 e LMP2-CTL. Questa stimolazione addestra le cellule T a uccidere le cellule tumorali con LMP1 e LMP2 sulla loro superficie.

Per "creare spazio" per la crescita di EBV-CTL dopo l'infusione nei pazienti NPC abbiamo già utilizzato una proteina speciale chiamata anticorpo CD45, che rimuove per un breve periodo di tempo la maggior parte delle cellule T del paziente. I risultati preliminari di questo studio sono incoraggianti: l'uso dell'anticorpo CD45 è sicuro e abbiamo osservato un aumento della crescita di EBV-CTL dopo l'infusione. Inoltre, tutti i pazienti con crescita EBV-CTL hanno avuto risposte cliniche.

Noi e altri abbiamo dimostrato la fattibilità della terapia CTL per NPC EBV-positivo in pazienti immunocompetenti, fornendo prove preliminari dell'attività antitumorale di EBV-CTL in questa popolazione di pazienti. Tuttavia, non tutti i pazienti hanno risposto, suggerendo la necessità di un ulteriore miglioramento. Proponiamo che il fallimento CTL possa essere superato aumentando la specificità del prodotto CTL infuso. Cioè, l'infusione di CTL specifico per LMP1 e LMP2 produrrà un beneficio clinico maggiore rispetto a CTL specifico per EBV. La logica di questo approccio è semplice: le linee CTL specifiche per EBV generate con metodi standard sono dominate da cloni di cellule T non reattive alle proteine ​​​​EBV sottodominanti LMP1 e LMP2 espresse in NPC. Proponiamo inoltre che l'incapacità del CTL trasferito in modo adottivo di espandersi in modo misurabile nel sangue periferico dei pazienti NPC sia una conseguenza sia dell'omeostasi linfoide in questi pazienti linfo-pieni sia dell'infiltrato di cellule T inibitorio nei siti della malattia. Useremo quindi anticorpi monoclonali mirati all'antigene CD45 (CD45 MAbs), per linfodepleti pazienti NPC prima dell'infusione di CTL specifici per EBV. I risultati preliminari indicano che la deplezione di CD45 MAb può aumentare l'espansione dei CTL e che tale espansione è associata a un più alto tasso di risposta alla malattia. Confermeremo ed estenderemo questi nuovi promettenti dati in questo studio clinico di Fase I.