Изучение LMP1- и LMP2-специфических цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) (DELLA)

В то время как пациенты с карциномой носоглотки (РНГ) могут быть вылечены с помощью химиотерапии и лучевой терапии, перспективы для пациентов, которые устойчивы к этому лечению или у которых рецидив, плохи. Почти все пациенты с недифференцированным раком носоглотки имеют вирус EBV в своих опухолях, что может быть мишенью для иммунотерапевтических подходов. Мы успешно использовали специализированные клетки иммунной системы, выращенные в лаборатории и обученные распознавать и уничтожать клетки, инфицированные EBV (EBV-специфические цитотоксические Т-лимфоциты [EBV-CTL]), для профилактики и лечения другого типа рака, называемого посттрансплантационной лимфомой, который возникает после трансплантации. пересадка костного мозга. При посттрансплантационной лимфоме опухолевые клетки имеют на своей поверхности 9 белков, вырабатываемых ВЭБ. Однако при карциноме носоглотки, которая развивается у пациентов с нормальной иммунной системой, опухолевые клетки экспрессируют только 2 белка ВЭБ, которые иммунной системе гораздо труднее распознать. В предыдущем исследовании мы создали EBV-CTL, которые распознавали все 9 белков, и давали их пациентам с NPC. У пациентов без признаков активного заболевания на момент терапии заболевание остается в стадии ремиссии. У тех пациентов с активным заболеванием на момент получения ЦТЛ у некоторых пациентов был частичный ответ на эту терапию, и только у трех пациентов был полный ответ. Мы считаем, что основная причина этого заключается в том, что многие Т-клетки реагировали с белками EBV, которых не было на опухолевых клетках, а другая причина в том, что введенным Т-клеткам не хватает места для роста.

Два белка EBV, присутствующие в опухолевых клетках NPC, которые являются хорошими мишенями для Т-клеточной терапии, называются LMP1 и LMP2. Поэтому мы планируем генерировать Т-клетки, специфичные для LMP1 и LMP2, и вводить эти клетки пациентам с NPC. Чтобы получить LMP1- и LMP2-CTL, мы получили кровь пациентов и вырастили особый тип клеток, называемый дендритной клеткой (DC), и лимфобластоидные клетки, инфицированные EBV (LCL). Затем мы перенесли аденовирусный вектор, несущий гены LMP1 и LMP2, в DC и LCL. Эти DC и LCL затем обрабатывают радиацией, чтобы они не могли расти, и используются для стимуляции и расширения LMP1- и LMP2-CTL. Эта стимуляция обучает Т-клетки убивать раковые клетки с LMP1 и LMP2 на их поверхности.

Чтобы «создать пространство» для роста EBV-CTL после инфузии у пациентов с NPC, мы уже использовали специальный белок, называемый антителом к ​​CD45, который на короткое время удаляет большую часть Т-клеток пациента. Предварительные результаты этого исследования обнадеживают: использование антитела к CD45 безопасно, и мы наблюдали усиленный рост EBV-CTL после инфузии. Кроме того, у всех пациентов с ростом EBV-CTL наблюдался клинический ответ.

Мы и другие продемонстрировали осуществимость терапии ЦТЛ для EBV-позитивных NPC у иммунокомпетентных пациентов, предоставив предварительные доказательства противоопухолевой активности EBV-CTL в этой популяции пациентов. Однако не все пациенты ответили, что свидетельствует о необходимости дальнейшего улучшения. Мы предполагаем, что недостаточность ЦТЛ может быть преодолена за счет повышения специфичности инфузированного продукта ЦТЛ. То есть инфузия ЦТЛ, специфичных для LMP1 и LMP2, даст больший клинический эффект, чем ЦТЛ, специфичные для EBV. Обоснование этого подхода прямолинейно: в линиях EBV-специфических ЦТЛ, полученных стандартными методами, преобладают клоны Т-клеток, не реагирующие на субдоминантные белки EBV LMP1 и LMP2, экспрессируемые в NPC. Мы также предполагаем, что неспособность адоптивно перенесенных ЦТЛ значительно размножаться в периферической крови пациентов с РНГ является следствием как лимфоидного гомеостаза у этих лимфообильных пациентов, так и ингибирующего Т-клеточного инфильтрата в очагах заболевания. Поэтому мы будем использовать моноклональные антитела, нацеленные на антиген CD45 (MAb CD45), для лимфодеплеции пациентов с NPC перед инфузией EBV-специфических ЦТЛ. Предварительные результаты показывают, что истощение CD45 MAb может увеличить размножение ЦТЛ, и что такое размножение связано с более высокой частотой ответа на заболевание. Мы подтвердим и расширим эти многообещающие новые данные в этой фазе I клинического испытания.