Estudo de Linfócitos T Citotóxicos (CTL) Específicos LMP1 e LMP2 (DELLA)

Embora os pacientes com carcinoma nasofaríngeo (NPC) possam ser curados por quimioterapia e radioterapia, as perspectivas para pacientes resistentes a esse tratamento ou com recaída são ruins. Quase todos os pacientes com carcinoma nasofaríngeo indiferenciado têm o vírus EBV em seus tumores, o que pode ser um alvo para abordagens de imunoterapia. Usamos com sucesso células especializadas do sistema imunológico cultivadas em laboratório e treinadas para reconhecer e matar células infectadas por EBV (linfócitos T citotóxicos específicos de EBV [EBV-CTL]) para prevenir e tratar outro tipo de câncer chamado linfoma pós-transplante que ocorre após transplante de medula óssea. No linfoma pós-transplante, as células tumorais possuem 9 proteínas produzidas pelo EBV em sua superfície. No entanto, no carcinoma nasofaríngeo que se desenvolve em pacientes com sistema imunológico normal, as células tumorais expressam apenas 2 proteínas EBV que são muito mais difíceis de serem reconhecidas pelo sistema imunológico. Em um estudo anterior, fizemos EBV-CTL que reconheceu todas as 9 proteínas e as forneceu a pacientes com NPC. Para pacientes sem evidência de doença ativa no momento da terapia, a doença permanece em remissão. Para aqueles pacientes com doença ativa no momento em que receberam CTL, alguns pacientes tiveram uma resposta parcial a esta terapia e apenas três pacientes tiveram uma resposta completa. Acreditamos que a principal razão para isso é que muitas das células T reagiram com proteínas do EBV que não estavam nas células tumorais, e a outra é que as células T infundidas não têm espaço suficiente para crescer.

As duas proteínas EBV presentes nas células tumorais NPC que são bons alvos para terapias com células T são chamadas LMP1 e LMP2. Estamos, portanto, planejando gerar células T específicas para LMP1 e LMP2 e infundir essas células em pacientes NPC. Para produzir LMP1- e LMP2-CTL, obtivemos sangue dos pacientes e cultivamos um tipo especial de célula chamada célula dendrítica (DC) e células linfoblastóides infectadas por EBV (LCL). Em seguida, transferimos um vetor de adenovírus que carrega o gene LMP1 e LMP2 para o DC e o LCL. Essas DC e LCL são então tratadas com radiação para que não possam crescer e são usadas para estimular e expandir LMP1- e LMP2-CTL. Esta estimulação treina as células T para matar células cancerígenas com LMP1 e LMP2 em sua superfície.

Para 'criar espaço' para o crescimento de EBV-CTL após a infusão em pacientes com NPC, já usamos uma proteína especial chamada anticorpo CD45, que remove por um curto período de tempo a maioria das células T do paciente. Os resultados preliminares deste estudo são encorajadores: o uso do anticorpo CD45 é seguro e observamos crescimento aumentado de EBV-CTL após a infusão. Além disso, todos os pacientes com crescimento de EBV-CTL apresentaram respostas clínicas.

Nós e outros demonstramos a viabilidade da terapia com CTL para NPC positivo para EBV em pacientes imunocompetentes, fornecendo evidências preliminares da atividade antitumoral de EBV-CTL nessa população de pacientes. Nem todos os pacientes responderam, no entanto, sugerindo a necessidade de melhorias adicionais. Propomos que a falha CTL pode ser superada aumentando a especificidade do produto CTL infundido. Ou seja, a infusão de CTL específico para LMP1 e LMP2 produzirá maior benefício clínico do que CTL específico para EBV. A justificativa para esta abordagem é direta: as linhas CTL específicas de EBV geradas por métodos padrão são dominadas por clones de células T não reativas às proteínas subdominantes de EBV LMP1 e LMP2 expressas em NPC. Também propomos que a falha de CTL transferidos adotivamente para expandir de forma mensurável no sangue periférico de pacientes NPC é uma consequência tanto da homeostase linfoide nesses pacientes linfo-repletos quanto do infiltrado de células T inibitórias nos locais da doença. Portanto, usaremos anticorpos monoclonais direcionados ao antígeno CD45 (CD45 MAbs) para linfodepletar pacientes com NPC antes da infusão de CTL específico para EBV. Os resultados preliminares indicam que a depleção de CD45 MAb pode aumentar a expansão de CTL e que tal expansão está associada a uma maior taxa de resposta à doença. Vamos confirmar e estender esses novos dados promissores neste ensaio clínico de Fase I.