Estudio de linfocitos T citotóxicos (CTL) específicos de LMP1 y LMP2 (DELLA)

Si bien los pacientes con carcinoma nasofaríngeo (NPC) pueden curarse con quimioterapia y radioterapia, las perspectivas para los pacientes resistentes a este tratamiento o que recaen son malas. Casi todos los pacientes con carcinoma nasofaríngeo indiferenciado tienen el virus EBV en sus tumores, lo que puede ser un objetivo para los enfoques de inmunoterapia. Hemos utilizado con éxito células especializadas del sistema inmunitario cultivadas en el laboratorio y entrenadas para reconocer y matar células infectadas por EBV (linfocitos T citotóxicos específicos de EBV [EBV-CTL]) para prevenir y tratar otro tipo de cáncer llamado linfoma postrasplante que ocurre después de transplante de médula osea. En el linfoma postrasplante, las células tumorales tienen 9 proteínas producidas por EBV en su superficie. Sin embargo, en el carcinoma nasofaríngeo que se desarrolla en pacientes con un sistema inmunitario normal, las células tumorales solo expresan 2 proteínas EBV que son mucho más difíciles de reconocer para el sistema inmunitario. En un estudio anterior, creamos EBV-CTL que reconocía las 9 proteínas y las administraba a pacientes con NPC. Para los pacientes sin evidencia de enfermedad activa en el momento de la terapia, la enfermedad permanece en remisión. Para aquellos pacientes con enfermedad activa en el momento en que recibieron CTL, algunos pacientes tuvieron una respuesta parcial a esta terapia y solo tres pacientes tuvieron una respuesta completa. Creemos que la razón principal de esto es que muchas de las células T reaccionaron con proteínas del EBV que no estaban en las células tumorales, y la otra es que las células T infundidas no tienen suficiente espacio para crecer.

Las dos proteínas EBV presentes en las células tumorales NPC que son buenos objetivos para las terapias con células T se denominan LMP1 y LMP2. Por lo tanto, estamos planeando generar células T específicas para LMP1 y LMP2 e infundir estas células en pacientes con NPC. Para hacer LMP1- y LMP2-CTL, hemos obtenido sangre de los pacientes y cultivado un tipo especial de célula llamada célula dendrítica (DC) y células linfoblastoides (LCL) infectadas con EBV. Luego hemos transferido un vector de adenovirus que lleva el gen LMP1 y LMP2 a la DC y la LCL. Estos DC y LCL luego se tratan con radiación para que no puedan crecer y se usan para estimular y expandir LMP1- y LMP2-CTL. Esta estimulación entrena a las células T para que eliminen las células cancerosas con LMP1 y LMP2 en su superficie.

Para "crear espacio" para el crecimiento de EBV-CTL después de la infusión en pacientes con NPC, ya hemos utilizado una proteína especial llamada anticuerpo CD45, que elimina durante un breve período de tiempo la mayoría de las células T del paciente. Los resultados preliminares de este estudio son alentadores: el uso del anticuerpo CD45 es seguro y observamos un mayor crecimiento de EBV-CTL después de la infusión. Además, todos los pacientes con crecimiento de EBV-CTL tuvieron respuestas clínicas.

Nosotros y otros hemos demostrado la viabilidad de la terapia CTL para NPC EBV-positivo en pacientes inmunocompetentes, proporcionando evidencia preliminar de la actividad antitumoral de EBV-CTL en esta población de pacientes. Sin embargo, no todos los pacientes respondieron, lo que sugiere la necesidad de una mayor mejora. Proponemos que la falla de CTL se puede superar aumentando la especificidad del producto CTL infundido. Es decir, la infusión de CTL específicos para LMP1 y LMP2 producirá un mayor beneficio clínico que los CTL específicos para EBV. El fundamento de este enfoque es sencillo: las líneas CTL específicas de EBV generadas por métodos estándar están dominadas por clones de células T que no reaccionan a las proteínas subdominantes LMP1 y LMP2 de EBV expresadas en NPC. También proponemos que el hecho de que los CTL transferidos adoptivamente no se expandan de manera medible en la sangre periférica de los pacientes con NPC es una consecuencia tanto de la homeostasis linfoide en estos pacientes linforrepletos como del infiltrado de células T inhibitorias en los sitios de la enfermedad. Por lo tanto, utilizaremos anticuerpos monoclonales dirigidos al antígeno CD45 (CD45 MAbs) para linfodepletar a los pacientes con NPC antes de la infusión de CTL específicos de EBV. Los resultados preliminares indican que el agotamiento de CD45 MAb puede aumentar la expansión de CTL y que dicha expansión está asociada con una mayor tasa de respuesta a la enfermedad. Confirmaremos y ampliaremos estos nuevos datos prometedores en este ensayo clínico de Fase I.