LMP1- és LMP2-specifikus citotoxikus T-limfociták (CTL) vizsgálata (DELLA)

Míg a nasopharyngealis karcinómában (NPC) szenvedő betegek kemoterápiával és sugárterápiával gyógyíthatók, a kezeléssel szemben rezisztens vagy visszaeső betegek kilátásai rosszak. Szinte minden differenciálatlan nasopharyngealis karcinómában szenvedő beteg daganatában megtalálható az EBV vírus, amely az immunterápiás megközelítések célpontja lehet. Sikeresen alkalmaztunk speciális immunrendszer sejteket, amelyeket laboratóriumban növesztettek, és arra képeztek ki, hogy felismerjék és elpusztítsák az EBV-vel fertőzött sejteket (EBV-specifikus citotoxikus T-limfociták [EBV-CTL]), hogy megelőzzük és kezeljük a rák egy másik típusát, az úgynevezett poszttranszplantációs limfómát. csontvelő átültetés. Transzplantáció utáni limfómában a daganatsejtek felszínén 9 EBV által termelt fehérje található. Normális immunrendszerű betegekben kialakuló nasopharyngealis karcinómában azonban a daganatsejtek csak 2 EBV fehérjét expresszálnak, amelyeket az immunrendszer sokkal nehezebben ismer fel. Egy korábbi vizsgálatban EBV-CTL-t készítettünk, amely felismerte mind a 9 fehérjét, és beadtuk NPC-s betegeknek. Azoknál a betegeknél, akiknél a terápia idején nem mutatkozott aktív betegség, a betegség remisszióban marad. A CTL-kezelés idején aktív betegségben szenvedő betegeknél néhány beteg részlegesen reagált erre a terápiára, és csak három betegnél volt teljes válasz. Ennek fő oka szerintünk az, hogy a T-sejtek közül sok olyan EBV-fehérjékkel reagált, amelyek nem voltak a tumorsejteken, a másik pedig az, hogy a bejuttatott T-sejteknek nincs elég helyük a növekedéshez.

Az NPC tumorsejteken jelenlévő két EBV fehérjét, amelyek jó célpontjai a T-sejtes terápiáknak, LMP1-nek és LMP2-nek nevezik. Ezért azt tervezzük, hogy LMP1-re és LMP2-re specifikus T-sejteket állítunk elő, és ezeket a sejteket NPC-betegekbe juttatjuk. Az LMP1- és LMP2-CTL előállításához vért vettünk a betegektől, és speciális sejttípust, úgynevezett dendritikus sejtet (DC) és EBV-vel fertőzött limfoblasztoid sejteket (LCL) növesztettünk. Ezután egy adenovírus vektort vittünk át, amely az LMP1 és LMP2 gént hordozza a DC-be és az LCL-be. Ezeket a DC-t és LCL-t ezután sugárzással kezelik, így nem tudnak növekedni, és az LMP1- és LMP2-CTL stimulálására és kiterjesztésére használják. Ez a stimuláció arra tanítja a T-sejteket, hogy elpusztítsák a rákos sejteket a felszínükön lévő LMP1 és LMP2 segítségével.

Az EBV-CTL növekedésének „teret teremteni” NPC-betegeknél az infúziót követően, már használtunk egy speciális fehérjét, az úgynevezett CD45 antitestet, amely rövid időre eltávolítja a páciens T-sejtjeinek nagy részét. A vizsgálat előzetes eredményei biztatóak: a CD45 antitest használata biztonságos, és fokozott EBV-CTL növekedést figyeltünk meg infúzió után. Ezenkívül minden olyan betegnél, akinek EBV-CTL növekedése tapasztalható, klinikai válaszreakciók voltak.

Mi és mások bebizonyítottuk a CTL-terápia megvalósíthatóságát EBV-pozitív NPC-vel immunkompetens betegekben, előzetes bizonyítékot szolgáltatva az EBV-CTL tumorellenes aktivitására ebben a betegpopulációban. Nem minden beteg reagált azonban, ami további javítás szükségességét sugallja. Javasoljuk, hogy a CTL kudarca leküzdhető az infundált CTL termék specifitásának növelésével. Vagyis az LMP1-re és LMP2-re specifikus CTL-ek infúziója nagyobb klinikai előnyökkel jár, mint az EBV-specifikus CTL. Ennek a megközelítésnek az indoklása egyértelmű: a standard módszerekkel előállított EBV-specifikus CTL-vonalakat olyan T-sejt-klónok uralják, amelyek nem reagálnak az NPC-ben expresszált szubdomináns LMP1 és LMP2 EBV fehérjékre. Azt is javasoljuk, hogy az adoptívan átvitt CTL-nek az NPC-betegek perifériás vérében mérhető növekedésének kudarca mind a limfoid homeosztázis következménye ezekben a limfo-replete betegekben, mind a gátló T-sejt beszűrődés a betegség helyén. Ezért a CD45 antigént célzó monoklonális antitesteket (CD45 MAb) fogunk alkalmazni az NPC betegek lymphodeplete kezelésére az EBV-specifikus CTL infúzió beadása előtt. Az előzetes eredmények azt mutatják, hogy a CD45 MAb kimerülése fokozhatja a CTL expanziót, és hogy az ilyen expanzió magasabb betegségválaszaránnyal jár. Megerősítjük és kiterjesztjük ezeket az ígéretes új adatokat ebben az I. fázisú klinikai vizsgálatban.