Studie av LMP1- och LMP2-specifika cytotoxiska T-lymfocyter (CTL) (DELLA)

Medan patienter med nasofaryngealt karcinom (NPC) kan botas med kemoterapi och strålbehandling, är utsikterna för patienter som är resistenta mot denna behandling eller som återfaller dåliga. Nästan alla patienter med odifferentierat nasofaryngealt karcinom har EBV-viruset i sina tumörer, vilket kan vara ett mål för immunterapi. Vi har framgångsrikt använt specialiserade immunsystemceller som odlats i laboratoriet och tränats för att känna igen och döda EBV-infekterade celler (EBV-specifika cytotoxiska T-lymfocyter [EBV-CTL]) för att förebygga och behandla en annan typ av cancer som kallas posttransplantationslymfom som uppstår efter benmärgstransplantation. Vid posttransplantationslymfom har tumörcellerna 9 proteiner gjorda av EBV på ytan. Men i nasofaryngealt karcinom som utvecklas hos patienter med ett normalt immunsystem, uttrycker tumörcellerna endast 2 EBV-proteiner som är mycket svårare för immunsystemet att känna igen. I en tidigare studie gjorde vi EBV-CTL som kände igen alla 9 proteiner och gav dem till patienter med NPC. För patienter utan tecken på aktiv sjukdom vid tidpunkten för terapin förblir sjukdomen i remission. För de patienter med aktiv sjukdom vid den tidpunkt då de fick CTL, hade vissa patienter ett partiellt svar på denna terapi, och endast tre patienter hade ett fullständigt svar. Vi tror att huvudorsaken till detta är att många av T-cellerna reagerade med EBV-proteiner som inte fanns på tumörcellerna, och den andra är att de infunderade T-cellerna inte har tillräckligt med utrymme att växa.

De två EBV-proteiner som finns på NPC-tumörceller som är bra mål för T-cellsterapier kallas LMP1 och LMP2. Vi planerar därför att generera T-celler specifika för LMP1 och LMP2 och infundera dessa celler i NPC-patienter. För att göra LMP1- och LMP2-CTL har vi fått blod från patienterna och odlat en speciell celltyp som kallas en dendritisk cell (DC) och EBV-infekterade lymfoblastoidceller (LCL). Vi har sedan överfört en adenovirusvektor som bär LMP1- och LMP2-genen till DC och LCL. Dessa DC och LCL behandlas sedan med strålning så att de inte kan växa och används för att stimulera och expandera LMP1- och LMP2-CTL. Denna stimulering tränar T-cellerna att döda cancerceller med LMP1 och LMP2 på ytan.

För att "skapa utrymme" för EBV-CTL-tillväxt efter infusion hos NPC-patienter har vi redan använt ett speciellt protein som kallas CD45-antikropp, som under en kort tidsperiod tar bort de flesta av patientens T-celler. De preliminära resultaten av denna studie är uppmuntrande: användningen av CD45-antikroppen är säker och vi observerade ökad EBV-CTL-tillväxt efter infusion. Dessutom hade alla patienter som har EBV-CTL-tillväxt kliniska svar.

Vi och andra har visat genomförbarheten av CTL-terapi för EBV-positiv NPC hos immunkompetenta patienter, vilket ger preliminära bevis på antitumöraktivitet av EBV-CTL i denna patientpopulation. Inte alla patienter svarade dock, vilket tyder på behovet av ytterligare förbättringar. Vi föreslår att CTL-fel kan övervinnas genom att öka specificiteten hos den infunderade CTL-produkten. Det vill säga, infusion av CTL specifik för LMP1 och LMP2 kommer att ge större klinisk nytta än EBV-specifik CTL. Skälet för detta tillvägagångssätt är okomplicerat: EBV-specifika CTL-linjer genererade med standardmetoder domineras av T-cellkloner som inte är reaktiva mot de subdominanta EBV-proteinerna LMP1 och LMP2 uttryckta i NPC. Vi föreslår också att misslyckandet hos adoptivt överförda CTL att mätbart expandera i det perifera blodet hos NPC-patienter är en konsekvens både av lymfoid homeostas hos dessa lymforepleta patienter och av det hämmande T-cellsinfiltratet vid sjukdomsställena. Vi kommer därför att använda monoklonala antikroppar som riktar sig mot CD45-antigenet (CD45 MAbs), för att lymfodpleta NPC-patienter före infusion av EBV-specifik CTL. Preliminära resultat indikerar att utarmning av CD45 MAb kan förstärka CTL-expansion, och att sådan expansion är associerad med en högre sjukdomsresponsfrekvens. Vi kommer att bekräfta och utöka dessa lovande nya data i denna kliniska fas I-studie.