Une nouvelle mutation du gène Spectrin

Les mutations de la spectrine (Sp) impliquant le site d'auto-association de l'hétérodimère Sp (le domaine I de Sp) représentent le groupe le plus courant de défauts squelettiques membranaires dans l'elliptocytose héréditaire (HE) et un trouble étroitement lié, la pyropoïkilocytose héréditaire (HPP). L'HPP est caractérisée par une microcytose anisocytaire extrême, un grave défaut d'auto-association des dimères de spectrine et un déficit en spectrine. L'explication conventionnelle des différents phénotypes est que les sujets HPP sont des hétérozygotes composés pour un défaut sp qui interfère avec l'assemblage tétramère sp et un second défaut qui entraîne une diminution de la synthèse de sp fonctionnel. En revanche, les sujets HE ont un contenu normal en spectrine et un défaut d'auto-association sp moins sévère. L'expression clinique de HE/HPP est influencée par l'hérédité de facteurs modificateurs tels que la mutation hypomorphique Sp, LELY. LELY est un allèle de faible expression du gène Sp caractérisé par une mutation C>G dans le codon 1857 de l'exon 40 et une mutation C>T -12 dans l'intron 45 responsable du saut partiel de l'exon 46, essentiel à la fonction assemblage de dimères /b sp.

RAPPORT DE CAS:

Nous décrivons ici quatre membres d'une famille d'origine nord-européenne dans laquelle les membres avaient une morphologie érythrocytaire différente allant de l'HPP atypique à l'HE à la normale et une nouvelle mutation Sp. La quantification des protéines membranaires érythrocytaires du propositus avec HPP non microcytaire atypique a révélé 48 % de dimères de spectrine (témoin 10 %) en raison d'une augmentation marquée du peptide I Sp de 74 kD. Il n'y avait qu'une légère diminution du rapport spectrine/bande 3, qui était en corrélation avec la morphologie normocytaire. Il y avait aussi un peptide Sp anormal à 41kD suggérant la présence de LELY. Le séquençage de son gène Sp a révélé une hétérozygotie pour une nouvelle mutation dans l'exon 2, codon 34 : CGG->CCG (Arg>Pro) et une hétérozygotie pour LELY. Ces mutations étaient également présentes chez son frère et sa fille qui ont HE, tandis qu'un autre fils, qui avait Arg34Pro, mais pas LELY, a confirmé à plusieurs reprises une morphologie normale.

Nous prévoyons de dépister 11 autres membres de la famille qui sont soupçonnés d'avoir HPP ou HE. Des échantillons de sang seront prélevés et les opérations suivantes seront effectuées :

1. Quantification des protéines membranaires des érythrocytes (RBC)
2. Extraction d'ADN du WBC et dépistage de la mutation de la spectrine avec des enzymes de restriction (si nécessaire, nous séquencerons le gène de la spectrine)
3. Des tests PCR quantitatifs en temps réel seront effectués sur l'ARN pour évaluer l'expression du gène de la spectrine
4. Antécédents, Examen clinique, NFS, chimie et frottis sanguin périphérique

La quantification des protéines membranaires des érythrocytes se fera en recherchant l'augmentation anormale de la quantité de dimères de spectrine chez les patients atteints d'HPP (témoin 10%). Nous examinerons également l'ADN pour toute mutation connue ou non encore signalée dans le gène de la spectrine et nous corrélerons l'expression du gène de la spectrine avec le niveau de protéine de la spectrine dans l'ARN.

Aucune analyse statistique ne sera effectuée. Il s'agit d'une étude d'observation conçue pour corréler les caractéristiques cliniques avec les résultats des tests mentionnés ci-dessus.