En ny mutation af spektringenet

Mutationer af spektrin (Sp), der involverer Sp heterodimer-selvassocieringsstedet (I-domænet af Sp) repræsenterer den mest almindelige gruppe af membranskeletdefekter i arvelig elliptocytose (HE) og en nært beslægtet lidelse, arvelig pyropoikilocytose (HPP). HPP er karakteriseret ved ekstrem anisocytisk mikrocytose, en alvorlig spektrin-dimer selvassocieringsdefekt og spektrinmangel. Den konventionelle forklaring på de forskellige fænotyper er, at HPP-individer er sammensatte heterozygoter for en sp-defekt, der interfererer med sp tetramer-samlingen, og en anden defekt, som resulterer i nedsat syntese af funktionel sp. I modsætning hertil har HE-personer normalt spektrinindhold og en mindre alvorlig sp-selvassocieringsdefekt. Den kliniske ekspression af HE/HPP er påvirket af nedarvningen af ​​modificerende faktorer såsom Sp hypomorfe mutation, LELY. LELY er en lavekspressionsallel af Sp-genet karakteriseret ved en C>G-mutation i codon 1857 af exon 40 og en C>T-12-mutation i intron 45, der er ansvarlig for delvis overspringning af exon 46, hvilket er essentielt for den funktionelle samling af /b sp dimerer.

CASE RAPPORT:

Her beskriver vi fire medlemmer fra en familie af nordeuropæisk afstamning, hvor medlemmerne havde forskellig erytrocytmorfologi lige fra atypisk HPP til HE til normal og en ny Sp-mutation. Kvantificering af RBC-membranproteiner af propositus med atypisk ikke-mikrocytisk HPP afslørede 48% spektrin-dimerer (kontrol 10%) på grund af en markant stigning i 74kD I Sp-peptidet. Der var kun et lille fald i spektrin/bånd 3-forholdet, som korrelerede med den normocytiske morfologi. Der var også et unormalt Sp-peptid ved 41 kD, hvilket tyder på tilstedeværelse af LELY. Sekventering af hans Sp-gen afslørede heterozygositet for en ny mutation i exon 2, codon 34: CGG->CCG (Arg>Pro) og heterozygositet for LELY. Disse mutationer var også til stede i hans bror og datter, som har HE, mens en anden søn, som havde Arg34Pro, men ikke LELY, gentagne gange har bekræftet normal morfologi.

Vi planlægger at screene 11 andre familiemedlemmer, der er mistænkt for at have HPP eller HE. Der vil blive taget blodprøver, og følgende vil blive udført:

1. Kvantificering af erytrocytmembranproteiner (RBC).
2. DNA-ekstraktion fra WBC og screening for spektrinmutation med restriktionsenzymer (om nødvendigt vil vi sekventere spektringen)
3. Kvantitativ realtids-PCR-testning vil blive udført på RNA for at vurdere spektringen-ekspressionen
4. Anamnese, klinisk undersøgelse, CBC, kemi og udstrygning af perifert blod

Kvantificering af RBC membranproteiner vil blive udført ved at se efter den unormale stigning i mængden af ​​spektrin dimerer hos patienter med HPP (kontrol 10%). Vi vil også se på DNA'et for kendte eller endnu ikke-rapporterede mutationer i spektringenet, og vi vil korrelere ekspressionen af ​​spektringenet mht. niveauet af spektrinproteinet i RNA'et.

Der foretages ingen statistisk analyse. Dette er et observationsstudie designet til at korrelere kliniske træk med de ovennævnte testresultater.