Новая мутация гена спектрина

Мутации спектрина (Sp), затрагивающие сайт самоассоциации гетеродимера Sp (I домен Sp), представляют собой наиболее распространенную группу дефектов мембранного скелета при наследственном эллиптоцитозе (HE) и близкородственном заболевании, наследственном пиропойкилоцитозе (HPP). HPP характеризуется выраженным анизоцитарным микроцитозом, выраженным дефектом самоассоциации димера спектрина и дефицитом спектрина. Обычное объяснение различных фенотипов заключается в том, что субъекты HPP являются сложными гетерозиготами по дефекту sp, который препятствует сборке тетрамера sp, и второму дефекту, который приводит к снижению синтеза функционального sp. Напротив, субъекты с HE имеют нормальное содержание спектрина и менее выраженный дефект самоассоциации sp. На клиническое проявление HE/HPP влияет наследование модифицирующих факторов, таких как гипоморфная мутация Sp, LELY. LELY представляет собой низкоэкспрессионный аллель гена Sp, характеризующийся мутацией C>G в кодоне 1857 экзона 40 и мутацией C>T-12 в интроне 45, который отвечает за частичный пропуск экзона 46, необходимый для функциональной сборка димеров /b sp.

ИСТОРИЯ БОЛЕЗНИ:

Здесь мы описываем четырех членов из семьи североевропейского происхождения, члены которой имели различную морфологию эритроцитов, варьирующую от атипичной HPP до HE до нормальной и новой мутации Sp. Количественное определение мембранных белков эритроцитов пропозитуса с атипичным немикроцитарным HPP выявило 48% димеров спектрина (контроль 10%) из-за заметного увеличения количества пептида 74kD I Sp. Отмечалось лишь небольшое снижение отношения спектрин/полоса 3, что коррелировало с нормоцитарной морфологией. Также был обнаружен аномальный пептид Sp с молекулярной массой 41 кД, что свидетельствует о наличии LELY. Секвенирование его гена Sp выявило гетерозиготность по новой мутации в экзоне 2, кодоне 34: CGG->CCG (Arg>Pro) и гетерозиготность по LELY. Эти мутации также присутствовали у его брата и дочери с HE, в то время как у другого сына, у которого был Arg34Pro, но не LELY, неоднократно подтверждалась нормальная морфология.

Мы планируем провести скрининг 11 других членов семьи, у которых есть подозрение на HPP или HE. Будут получены образцы крови, и будет выполнено следующее:

1. Количественное определение мембранных белков эритроцитов (RBC)
2. Извлечение ДНК из лейкоцитов и скрининг на мутацию спектрина с помощью ферментов рестрикции (при необходимости мы секвенируем ген спектрина)
3. Количественное ПЦР в реальном времени будет проводиться на РНК для оценки экспрессии гена спектрина.
4. Анамнез, клинический осмотр, общий анализ крови, биохимический анализ и мазок периферической крови

Количественное определение мембранных белков эритроцитов будет проводиться путем поиска аномального увеличения количества димеров спектрина у пациентов с HPP (контроль 10%). Мы также рассмотрим ДНК на предмет любых известных или еще не зарегистрированных мутаций в гене спектрина и сопоставим экспрессию гена спектрина с уровнем белка спектрина в РНК.

Никакого статистического анализа не будет. Это наблюдательное исследование, предназначенное для сопоставления клинических признаков с результатами вышеупомянутых тестов.