Eine neuartige Mutation des Spectrin-Gens

Mutationen von Spectrin (Sp), an denen die Sp-Heterodimer-Selbstassoziationsstelle (die I-Domäne von Sp) beteiligt ist, stellen die häufigste Gruppe von Membranskelettdefekten bei der hereditären Elliptozytose (HE) und einer eng verwandten Erkrankung, der hereditären Pyropoikilozytose (HPP), dar. HPP ist gekennzeichnet durch extreme anisozytische Mikrozytose, einen schweren Spektrin-Dimer-Selbstassoziationsdefekt und Spektrin-Mangel. Die herkömmliche Erklärung für die unterschiedlichen Phänotypen ist, dass HPP-Subjekte Compound-Heterozygote für einen sp-Defekt sind, der den Zusammenbau des sp-Tetramers stört, und einen zweiten Defekt, der zu einer verringerten Synthese von funktionellem sp führt. Im Gegensatz dazu haben HE-Subjekte einen normalen Spektringehalt und einen weniger schweren sp-Selbstassoziationsdefekt. Die klinische Ausprägung von HE/HPP wird durch die Vererbung von modifizierenden Faktoren wie der hypomorphen Sp-Mutation LELY beeinflusst. LELY ist ein niedrig exprimiertes Allel des Sp-Gens, das durch eine C>G-Mutation in Codon 1857 von Exon 40 und eine C>T-12-Mutation in Intron 45 gekennzeichnet ist, die für das teilweise Überspringen von Exon 46 verantwortlich ist, das für die Funktion essentiell ist Zusammenbau von /b sp Dimeren.

FALLBERICHT:

Hier beschreiben wir vier Mitglieder aus einer Familie nordeuropäischer Abstammung, in der Mitglieder unterschiedliche Erythrozytenmorphologien hatten, die von atypischer HPP über HE bis hin zu normaler und einer neuartigen Sp-Mutation reichten. Die Quantifizierung von RBC-Membranproteinen des Propositus mit atypischem nicht-mikrozytärem HPP ergab 48 % Spektrin-Dimere (Kontrolle 10 %) aufgrund einer deutlichen Zunahme des 74 kD I Sp-Peptids. Es gab nur eine leichte Abnahme des Spektrin/Band 3-Verhältnisses, was mit der normozytären Morphologie korrelierte. Es gab auch ein anormales Sp-Peptid bei 41 kD, was auf das Vorhandensein von LELY hinweist. Die Sequenzierung seines Sp-Gens ergab Heterozygotie für eine neue Mutation in Exon 2, Codon 34: CGG->CCG (Arg>Pro) und Heterozygotie für LELY. Diese Mutationen waren auch bei seinem Bruder und seiner Tochter vorhanden, die HE haben, während ein anderer Sohn, der Arg34Pro, aber nicht LELY hatte, wiederholt eine normale Morphologie bestätigte.

Wir planen, 11 weitere Familienmitglieder zu untersuchen, bei denen der Verdacht besteht, dass sie HPP oder HE haben. Blutproben werden entnommen und Folgendes wird durchgeführt:

1. Quantifizierung von Erythrozyten (RBC)-Membranproteinen
2. DNA-Extraktion aus den WBC und Screening auf Spectrin-Mutation mit Restriktionsenzymen (bei Bedarf sequenzieren wir das Spectrin-Gen)
3. An der RNA werden quantitative Echtzeit-PCR-Tests durchgeführt, um die Spektrin-Genexpression zu bewerten
4. Anamnese, klinische Untersuchung, CBC, Chemie und peripherer Blutausstrich

Die Quantifizierung von RBC-Membranproteinen wird durchgeführt, indem bei Patienten mit HPP (Kontrolle 10 %) nach dem abnormalen Anstieg der Menge an Spectrin-Dimeren gesucht wird. Wir werden auch die DNA auf bekannte oder noch nicht gemeldete Mutationen im Spektrin-Gen untersuchen und die Expression des Spektrin-Gens mit der Menge des Spektrin-Proteins in der RNA korrelieren.

Es erfolgt keine statistische Auswertung. Dies ist eine Beobachtungsstudie, die entwickelt wurde, um klinische Merkmale mit den oben genannten Testergebnissen zu korrelieren.