Una nueva mutación del gen de la espectrina

Las mutaciones de la espectrina (Sp) que involucran el sitio de autoasociación del heterodímero Sp (el dominio I de Sp) representan el grupo más común de defectos de la membrana esquelética en la eliptocitosis hereditaria (HE) y un trastorno estrechamente relacionado, la piropoiquilocitosis hereditaria (HPP). HPP se caracteriza por microcitosis anisocítica extrema, un defecto grave de autoasociación de dímero de espectrina y deficiencia de espectrina. La explicación convencional para los diferentes fenotipos es que los sujetos HPP son heterocigotos compuestos por un defecto sp que interfiere con el ensamblaje del tetrámero sp y un segundo defecto que resulta en una síntesis disminuida de sp funcional. Por el contrario, los sujetos HE tienen un contenido de espectrina normal y un defecto de autoasociación sp menos grave. La expresión clínica de HE/HPP está influenciada por la herencia de factores modificadores como la mutación hipomórfica Sp, LELY. LELY es un alelo de baja expresión del gen Sp caracterizado por una mutación C>G en el codón 1857 del exón 40 y una mutación C>T -12 en el intrón 45 que es responsable de la omisión parcial del exón 46, que es esencial para el funcionamiento funcional. ensamblaje de dímeros de /b sp.

REPORTE DE UN CASO:

Aquí describimos a cuatro miembros de una familia de ascendencia del norte de Europa en la que los miembros tenían diferentes morfologías de eritrocitos que iban desde HPP atípico a HE a normal y una nueva mutación Sp. La cuantificación de proteínas de membrana de RBC del propositus con HPP no microcítico atípico reveló un 48 % de dímeros de espectrina (10 % de control) debido a un marcado aumento en el péptido I Sp de 74 kD. Solo hubo una ligera disminución en la relación espectrina/banda 3, que se correlacionó con la morfología normocítica. También hubo un péptido Sp anormal a 41 kD que sugería la presencia de LELY. La secuenciación de su gen Sp reveló heterocigosidad para una nueva mutación en el exón 2, codón 34: CGG->CCG (Arg>Pro) y heterocigosidad para LELY. Estas mutaciones también estaban presentes en su hermano y su hija que tenían HE, mientras que otro hijo, que tenía Arg34Pro, pero no LELY, ha confirmado repetidamente una morfología normal.

Planeamos evaluar a otros 11 miembros de la familia que se sospecha que tienen HPP o HE. Se obtendrán muestras de sangre y se realizará lo siguiente:

1. Cuantificación de proteínas de membrana de eritrocitos (RBC)
2. Extracción de ADN del WBC y detección de mutación de espectrina con enzimas de restricción (si es necesario, secuenciaremos el gen de la espectrina)
3. Se realizarán pruebas cuantitativas de PCR en tiempo real en el ARN para evaluar la expresión del gen de la espectrina.
4. Historia, examen clínico, hemograma completo, química y frotis de sangre periférica

La cuantificación de las proteínas de membrana de los glóbulos rojos se hará buscando el aumento anormal en la cantidad de dímeros de espectrina en pacientes con HPP (control 10%). También buscaremos en el ADN cualquier mutación conocida o aún no informada en el gen de la espectrina y correlacionaremos la expresión del gen de la espectrina con el nivel de proteína espectrina en el ARN.

No se realizará ningún análisis estadístico. Este es un estudio de observación diseñado para correlacionar las características clínicas con los resultados de las pruebas mencionadas anteriormente.