Nová mutace spektrinového genu

Mutace spektrinu (Sp) zahrnující samo-asociační místo heterodimeru Sp (I doména Sp) představují nejběžnější skupinu membránových skeletálních defektů u hereditární elliptocytózy (HE) a úzce související poruchy, hereditární pyropoikilocytózy (HPP). HPP je charakterizována extrémní anizocytární mikrocytózou, závažným defektem autoasociace spektrinového dimeru a deficitem spektrinu. Konvenční vysvětlení pro různé fenotypy je, že HPP subjekty jsou složenými heterozygoty pro defekt sp, který interferuje se sestavením sp tetrameru, a druhý defekt, který vede ke snížené syntéze funkčního sp. Naproti tomu subjekty s HE mají normální obsah spektrinu a méně závažný defekt samoasociace sp. Klinická exprese HE/HPP je ovlivněna dědičností modifikujících faktorů, jako je hypomorfní mutace Sp, LELY. LELY je alela s nízkou expresí genu Sp charakterizovaná mutací C>G v kodonu 1857 exonu 40 a mutací C>T -12 v intronu 45, která je zodpovědná za částečné přeskočení exonu 46, což je nezbytné pro funkční montáž /b sp dimerů.

PŘÍPADOVÁ ZPRÁVA:

Zde popisujeme čtyři členy z rodiny severoevropského původu, jejíž členové měli odlišnou morfologii erytrocytů od atypického HPP přes HE až po normální, a novou mutaci Sp. Kvantifikace RBC membránových proteinů propositu s atypickým nemikrocytárním HPP odhalila 48 % spektrinových dimerů (kontrola 10 %) v důsledku výrazného zvýšení 74kD I Sp peptidu. Došlo pouze k mírnému poklesu poměru spektrin/pás 3, který koreloval s normocytární morfologií. Byl zde také abnormální Sp peptid při 41 kD, což naznačuje přítomnost LELY. Sekvenování jeho genu Sp odhalilo heterozygotnost pro novou mutaci v exonu 2, kodon 34: CGG->CCG (Arg>Pro) a heterozygotnost pro LELY. Tyto mutace byly přítomny také u jeho bratra a dcery, kteří mají HE, zatímco další syn, který měl Arg34Pro, ale ne LELY, opakovaně potvrdil normální morfologii.

Plánujeme provést screening 11 dalších členů rodiny, u kterých je podezření na HPP nebo HE. Odeberou se vzorky krve a provedou se následující:

1. Kvantifikace membránových proteinů erytrocytů (RBC).
2. Extrakce DNA z WBC a screening na mutaci spektrinu restrikčními enzymy (v případě potřeby sekvenujeme gen pro spektrin)
3. Na RNA bude provedeno kvantitativní testování PCR v reálném čase pro posouzení exprese genu spektrinu
4. Anamnéza, Klinické vyšetření, CBC, chemie a nátěr z periferní krve

Kvantifikace RBC membránových proteinů bude provedena hledáním abnormálního zvýšení množství spektrinových dimerů u pacientů s HPP (kontrola 10 %). Podíváme se také na DNA na jakékoli známé nebo dosud nehlášené mutace ve spektrinovém genu a budeme korelovat expresi spektrinového genu s hladinou spektrinového proteinu v RNA.

Nebude provedena žádná statistická analýza. Toto je pozorovací studie navržená tak, aby korelovala klinické rysy s výsledky výše uvedených testů.