En ny mutation av spektringenen

Mutationer av spektrin (Sp) som involverar Sp heterodimer självassocieringsställe (I-domänen av Sp) representerar den vanligaste gruppen av membranskelettdefekter vid ärftlig elliptocytos (HE) och en närbesläktad störning, hereditär pyropoikilocytos (HPP). HPP kännetecknas av extrem anisocytisk mikrocytos, en allvarlig spektrindimer-självassociationsdefekt och spektrinbrist. Den konventionella förklaringen till de olika fenotyperna är att HPP-patienter är sammansatta heterozygoter för en sp-defekt som stör sp-tetramersammansättningen och en andra defekt som resulterar i minskad syntes av funktionell sp. Däremot har HE-personer normalt spektrininnehåll och en mindre allvarlig sp-självassociationsdefekt. Det kliniska uttrycket av HE/HPP påverkas av nedärvningen av modifierande faktorer såsom Sp hypomorfa mutation, LELY. LELY är en lågexpressionsallel av Sp-genen som kännetecknas av en C>G-mutation i kodon 1857 av exon 40 och en C>T-12-mutation i intron 45 som är ansvarig för partiell överhoppning av exon 46, vilket är väsentligt för den funktionella sammansättning av /b sp-dimerer.

ÄRENDERAPPORT:

Här beskriver vi fyra medlemmar från en familj av nordeuropeisk härkomst där medlemmarna hade olika erytrocytmorfologi från atypisk HPP till HE till normal och en ny Sp-mutation. Kvantifiering av RBC-membranproteiner av propositus med atypiskt icke-mikrocytiskt HPP avslöjade 48% spektrindimerer (kontroll 10%) på grund av en markant ökning av 74kD I Sp-peptiden. Det fanns endast en liten minskning i förhållandet spektrin/band 3, vilket korrelerade med den normocytiska morfologin. Det fanns också en onormal Sp-peptid vid 41 kD vilket tyder på närvaro av LELY. Sekvensering av hans Sp-gen avslöjade heterozygositet för en ny mutation i exon 2, kodon 34: CGG->CCG (Arg>Pro) och heterozygositet för LELY. Dessa mutationer fanns också hos hans bror och dotter som har HE, medan en annan son, som hade Arg34Pro, men inte LELY, upprepade gånger har bekräftat normal morfologi.

Vi planerar att screena 11 andra familjemedlemmar som misstänks ha HPP eller HE. Blodprover kommer att tas och följande kommer att utföras:

1. Kvantifiering av erytrocytmembranproteiner (RBC).
2. DNA-extraktion från WBC och screening för spektrinmutation med restriktionsenzymer (om det behövs sekvenserar vi spektringen)
3. Kvantitativ realtids-PCR-testning kommer att göras på RNA för att bedöma spektringens uttryck
4. Anamnes, klinisk undersökning, CBC, kemi och perifert blodutstryk

Kvantifiering av RBC-membranproteiner kommer att göras genom att leta efter den onormala ökningen av mängden spektrindimerer hos patienter med HPP (kontroll 10%). Vi kommer också att titta på DNA:t för eventuella kända eller ännu orapporterade mutationer i spektringenen och vi kommer att korrelera uttrycket av spektringen med nivån av spektrinprotein i RNA:t.

Ingen statistisk analys kommer att göras. Detta är en observationsstudie utformad för att korrelera kliniska egenskaper med ovan nämnda testresultat.