En ny mutasjon av spektringenet

Mutasjoner av spektrin (Sp) som involverer Sp heterodimer-selvassosiasjonsstedet (I-domenet til Sp) representerer den vanligste gruppen av membranskjelettdefekter i arvelig elliptocytose (HE) og en nært beslektet lidelse, arvelig pyropoikilocytose (HPP). HPP er preget av ekstrem anisocytisk mikrocytose, en alvorlig spektrindimer selvassosiasjonsdefekt og spektrinmangel. Den konvensjonelle forklaringen på de forskjellige fenotypene er at HPP-individer er sammensatte heterozygoter for en sp-defekt som forstyrrer sp tetramer-sammenstillingen og en andre defekt som resulterer i redusert syntese av funksjonell sp. I motsetning til dette har HE-personer normalt spektrininnhold og en mindre alvorlig sp-selvassosiasjonsdefekt. Det kliniske uttrykket av HE/HPP påvirkes av nedarvingen av modifiserende faktorer som Sp hypomorfe mutasjon, LELY. LELY er et lavekspresjonsallel av Sp-genet karakterisert ved en C>G-mutasjon i kodon 1857 av ekson 40 og en C>T-12-mutasjon i intron 45 som er ansvarlig for delvis hopping av ekson 46, noe som er essensielt for det funksjonelle sammenstilling av /b sp dimerer.

SAKSRAPPORT:

Her beskriver vi fire medlemmer fra en familie av nordeuropeisk avstamning der medlemmene hadde ulik erytrocyttmorfologi som spenner fra atypisk HPP til HE til normal og en ny Sp-mutasjon. Kvantifisering av RBC-membranproteiner av propositus med atypisk ikke-mikrocytisk HPP avslørte 48% spektrin-dimerer (kontroll 10%) på grunn av en markant økning i 74kD I Sp-peptidet. Det var bare en liten reduksjon i spektrin/bånd 3-forholdet, som korrelerte med den normocytiske morfologien. Det var også et unormalt Sp-peptid ved 41 kD som tyder på tilstedeværelse av LELY. Sekvensering av Sp-genet hans avslørte heterozygositet for en ny mutasjon i ekson 2, kodon 34: CGG->CCG (Arg>Pro) og heterozygositet for LELY. Disse mutasjonene var også tilstede hos hans bror og datter som har HE, mens en annen sønn, som hadde Arg34Pro, men ikke LELY, gjentatte ganger har bekreftet normal morfologi.

Vi planlegger å screene 11 andre familiemedlemmer som mistenkes å ha HPP eller HE. Blodprøver vil bli tatt og følgende vil bli utført:

1. Kvantifisering av erytrocytt (RBC) membranproteiner
2. DNA-ekstraksjon fra WBC og screening for spektrinmutasjon med restriksjonsenzymer (om nødvendig vil vi sekvensere spektringen)
3. Kvantitativ sanntids PCR-testing vil bli utført på RNA for å vurdere spektringen-uttrykket
4. Anamnese, klinisk undersøkelse, CBC, kjemi og utstryk av perifert blod

Kvantifisering av RBC-membranproteiner vil bli gjort ved å se etter den unormale økningen i mengden spektrin-dimerer hos pasienter med HPP (kontroll 10%). Vi vil også se på DNA for eventuelle kjente eller ennå ikke rapporterte mutasjoner i spektringenet, og vi vil korrelere uttrykket av spektringenet med nivået av spektrinproteinet i RNA.

Det vil ikke bli gjort noen statistisk analyse. Dette er en observasjonsstudie designet for å korrelere kliniske egenskaper med de ovennevnte testresultatene.