Diagnostic de méningite tuberculeuse par ESAT-6 dans le LCR

La tuberculose est une maladie qui porte un fardeau sanitaire mondial, et la méningite tuberculeuse (TBM) est l'une des manifestations cliniques les plus graves de la tuberculose extrapulmonaire. L'incapacité à reconnaître et à traiter rapidement les patients atteints de TBM permet à la maladie de faire des ravages dans le monde entier malgré la disponibilité d'une chimiothérapie efficace. Par conséquent, l'identification précise et opportune des personnes infectées et l'initiation rapide d'une chimiothérapie antituberculeuse efficace sont essentielles pour réduire la mortalité de la MTB.1 Cependant, la maladie est souvent difficile à diagnostiquer avec certitude, en particulier aux stades précoces,2 car le les caractéristiques cliniques et du liquide céphalo-rachidien (LCR) de la MTB ne sont pas spécifiques et doivent être différenciées d'une pléthore d'autres méningites infectieuses telles que la méningite virale, bactérienne ou cryptococcique, qui entraînent fréquemment une confusion diagnostique. Par conséquent, la MTB est souvent diagnostiquée alors que des dommages neurologiques irréversibles ont déjà eu lieu et un traitement antituberculeux immédiat est donc recommandé quels que soient les résultats des tests individuels si la MTB est sérieusement envisagée.

La confirmation de TBM dépend de la mise en évidence de Mycobacterium tuberculosis dans le LCR par des méthodes bactériologiques. L'examen microscopique des bacilles acido-résistants des frottis est rapide et peu coûteux, mais sa sensibilité est très faible (10 à 20 %)3 et la culture manque également de sensibilité et prend du temps. Un certain nombre de stratégies ont été tentées pour améliorer le diagnostic de laboratoire de TBM. Les tests d'amplification des acides nucléiques (NAAT) montrent des rôles potentiels dans la confirmation du diagnostic de TBM, mais ils souffrent également du problème de la faible sensibilité globale (0,46-0,66), en partie en raison d'une faible charge bacillaire dans le LCR.4-5 Des méthodes d'immunodiagnostic ont également été évaluées, mais l'hétérogénéité des réponses immunitaires chez les patients TBM aux différents stades de l'infection constitue un obstacle majeur à la détection des anticorps mycobactériens dans les échantillons de LCR.6-7 En général, les patients aux stades chroniques de TBM ont une myriade de réponses anticorps à tous les principaux antigènes de Mycobacterium tuberculosis, tandis que les patients aux stades précoces n'ont pratiquement aucune réponse anticorps détectable. De plus, l'interprétation des anticorps mycobactériens dans le LCR doit tenir compte de la contribution des anticorps du plasma, compromettant ainsi l'utilisation de ces méthodes d'immunodiagnostic basées sur les anticorps là où elles sont le plus nécessaires.7 Une approche pour fournir une preuve directe d'une infection existante est la détection de la présence d'antigènes spécifiques dans le LCR en circulation. La première génération de ces tests utilisait des antigènes non spécifiques, comme le bacille Calmette-Guérin (BCG) ou un dérivé protéique purifié (PPD).8-10 L'analyse génomique et l'extraction d'antigènes de Mycobacterium tuberculosis ont produit de nouveaux antigènes plus spécifiques, tels que la cible antigénique sécrétoire précoce 6 (ESAT-6), l'antigène 38-kD et le complexe Ag85.11 Néanmoins, l'efficacité diagnostique de cette approche basée sur les antigènes est encore insatisfaisante.5-6 Mycobacterium tuberculosis appartient au groupe des bactéries intracellulaires, qui se répliquent dans les macrophages au repos. Au cours des premiers stades de l'infection du système nerveux central (SNC), les bacilles tuberculeux du LCR sont immédiatement phagocytés par les macrophages,12-13 entraînant la rareté des marqueurs mycobactériens dans le LCR circulant. Ainsi, aucun test de ce type n'est encore disponible pour le diagnostic précoce de TBM actif avec la sensibilité et la spécificité requises.

Les enquêteurs ont émis l'hypothèse que, contrairement à la rareté des marqueurs mycobactériens dans le LCR circulant, les macrophages dans le LCR infecté peuvent transporter une charge élevée d'antigènes mycobactériens, ce qui pourrait se prêter au développement d'une approche de diagnostic cellulaire pour le TBM. Ici, les enquêteurs ont cherché à développer une méthode immunocytochimique de frottis pour améliorer la précision du diagnostic précoce de TBM en examinant la cible antigénique sécrétoire précoce 6 (ESAT-6), un antigène spécifique de mycobactérie, dans les macrophages dans des échantillons de LCR de patients atteints de TBM et patients atteints de méningite infectieuse autre que TBM. Les enquêteurs ont également comparé l'efficacité de cette approche cellulaire pour détecter les antigènes mycobactériens avec la méthode microbiologique et NAAT dans le diagnostic en laboratoire du TBM. En outre, sur la base des présentations cliniques, du LCR et des résultats étiologiques de cette étude, les chercheurs ont proposé de nouveaux critères de diagnostic pour la MTB.