Diagnóstico de Meningitis Tuberculosa por ESAT-6 en LCR

La tuberculosis es una enfermedad que conlleva una carga sanitaria mundial, y la meningitis tuberculosa (TBM) es una de las manifestaciones clínicas más graves de la tuberculosis extrapulmonar. El hecho de no reconocer y tratar rápidamente a los pacientes con TBM permite que la enfermedad cobre un precio devastador en todo el mundo a pesar de la disponibilidad de quimioterapia eficaz. Por lo tanto, la identificación precisa y oportuna de las personas infectadas y el posterior inicio inmediato de una quimioterapia antituberculosa eficaz son esenciales para reducir la mortalidad de la TBM.1 Sin embargo, la enfermedad suele ser difícil de diagnosticar con certeza, especialmente en las primeras etapas,2 ya que Las características clínicas y del líquido cefalorraquídeo (LCR) de la TBM no son específicas y deben diferenciarse de una plétora de otras meningitis infecciosas, como la meningitis viral, bacteriana o criptocócica, que con frecuencia resultan en una confusión diagnóstica. En consecuencia, la TBM a menudo se diagnostica cuando ya se han producido daños neurológicos irreversibles y, por lo tanto, se recomienda la terapia antituberculosa inmediata independientemente de los resultados de las pruebas individuales si se contempla seriamente la TBM.

La confirmación de TBM depende de la demostración de Mycobacterium tuberculosis en el LCR por métodos bacteriológicos. La microscopía de bacilos acidorresistentes de frotis es rápida y económica, pero tiene una sensibilidad muy baja (10-20%),3 y el cultivo también carece de sensibilidad y requiere mucho tiempo. Se han intentado varias estrategias para mejorar el diagnóstico de laboratorio de TBM. Las pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT, por sus siglas en inglés) muestran funciones potenciales para confirmar el diagnóstico de TBM, pero también sufren el problema de la baja sensibilidad general (0,46-0,66), en parte debido a una baja carga bacilar en el LCR.4-5 También se han evaluado métodos de inmunodiagnóstico, pero la heterogeneidad de las respuestas inmunitarias en pacientes con TBM en las diferentes etapas de la infección plantea un obstáculo importante para la detección de anticuerpos micobacterianos en muestras de LCR.6-7 En general, los pacientes en las etapas crónicas de TBM tienen una miríada de respuestas de anticuerpos a todos los antígenos principales de Mycobacterium tuberculosis, mientras que los pacientes en las primeras etapas apenas tienen una respuesta de anticuerpos detectable. Además, la interpretación de los anticuerpos micobacterianos en el LCR debe tener en cuenta el aporte de anticuerpos del plasma, por lo tanto, comprometiendo el uso de estos métodos de inmunodiagnóstico basados ​​en anticuerpos en el lugar donde más se necesitan7. Un enfoque para proporcionar evidencia directa de infección existente es la detección de la presencia de antígenos específicos en el LCR circulante. La primera generación de estas pruebas empleó antígenos no específicos como el bacilo Calmette-Guerin (BCG) o el derivado de proteína purificada (PPD).8-10 El análisis genómico y la extracción de antígenos de Mycobacterium tuberculosis han producido antígenos novedosos y más específicos, como la diana antigénica secretora temprana 6 (ESAT-6), el antígeno de 38 kD y el complejo Ag85.11 Sin embargo, la eficacia diagnóstica de este enfoque basado en antígenos sigue siendo insatisfactoria5-6. Mycobacterium tuberculosis pertenece al grupo de bacterias intracelulares, que se replican dentro de los macrófagos en reposo. Durante las primeras etapas de la infección del sistema nervioso central (SNC), los bacilos tuberculosos en el LCR son inmediatamente fagocitados por los macrófagos,12-13 lo que lleva a la escasez de marcadores micobacterianos en el LCR circulante. Por lo tanto, tales pruebas aún no están disponibles para el diagnóstico temprano de TBM activa con la sensibilidad y especificidad requeridas.

Los investigadores plantearon la hipótesis de que, en contraste con la escasez de marcadores de micobacterias en el LCR circulante, los macrófagos en el LCR infectado pueden tener una alta carga de antígenos de micobacterias, lo que podría prestarse al desarrollo de un enfoque de diagnóstico basado en células para la TBM. Aquí, los investigadores buscaron desarrollar un método inmunocitoquímico de frotis para mejorar la precisión del diagnóstico temprano de TBM al examinar el objetivo 6 antigénico secretor temprano (ESAT-6), un antígeno específico de micobacterias, en los macrófagos en muestras de LCR de pacientes con TBM y pacientes con meningitis infecciosa distinta de TBM. Los investigadores también compararon la eficiencia de este enfoque basado en células para detectar antígenos micobacterianos con métodos microbiológicos y NAAT en el diagnóstico de laboratorio de TBM. Además, sobre la base de las presentaciones clínicas, el LCR y los hallazgos etiológicos de este estudio, los investigadores propusieron nuevos criterios de diagnóstico para la TBM.