Диагностика туберкулезного менингита с помощью ESAT-6 в спинномозговой жидкости

Туберкулез является заболеванием, которое несет глобальное бремя для здоровья, а туберкулезный менингит (ТБМ) является одним из наиболее серьезных клинических проявлений внелегочного туберкулеза. Неспособность своевременно распознать и лечить пациентов с ТБМ приводит к тому, что болезнь наносит разрушительный урон по всему миру, несмотря на доступность эффективной химиотерапии. Таким образом, точная и своевременная идентификация инфицированных людей и последующее быстрое начало эффективной противотуберкулезной химиотерапии имеют важное значение для снижения смертности от ТБМ. клинические и ликворные признаки ТБМ неспецифичны и должны быть дифференцированы от множества других инфекционных менингитов, таких как вирусный, бактериальный или криптококковый менингит, которые часто приводят к диагностической путанице. Следовательно, ТБМ часто диагностируется, когда уже произошли необратимые неврологические повреждения, и поэтому рекомендуется немедленная противотуберкулезная терапия независимо от результатов отдельных тестов, если ТБМ серьезно предполагается.

Подтверждение ТБМ зависит от выявления микобактерий туберкулеза в спинномозговой жидкости бактериологическими методами. Микроскопия кислотоустойчивых бацилл в мазках является быстрой и недорогой, но имеет очень низкую чувствительность (10-20%)3, а посев также недостаточно чувствителен и занимает много времени. Был предпринят ряд стратегий для улучшения лабораторной диагностики ТБМ. Тесты амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) показывают потенциальную роль в подтверждении диагноза ТБМ, но они также страдают от проблемы общей низкой чувствительности (0,46-0,66), отчасти из-за низкой бациллярной нагрузки в ЦСЖ.4-5 Иммунодиагностические методы также были оценены, но гетерогенность иммунных ответов у больных ТБМ на разных стадиях инфекции представляет собой серьезное препятствие для обнаружения микобактериальных антител в образцах ЦСЖ.6-7 В целом, у пациентов с хроническими стадиями ТБМ наблюдается множество гуморальных ответов на все основные антигены Mycobacterium tuberculosis, в то время как у пациентов на ранних стадиях практически не обнаруживается гуморальный ответ. Кроме того, интерпретация микобактериальных антител в спинномозговой жидкости должна учитывать вклад антител из плазмы, что ставит под угрозу использование этих иммунодиагностических методов на основе антител там, где они наиболее необходимы.7 Одним из подходов к получению прямых доказательств существующей инфекции является обнаружение присутствия специфических антигенов в циркулирующей спинномозговой жидкости. В первом поколении этих тестов использовались неспецифические антигены, например, бацилла Кальметта-Герена (BCG) или очищенное производное белка (PPD).8-10 Геномный анализ и добыча антигенов Mycobacterium tuberculosis позволили получить новые, более специфичные антигены, такие как ранняя секреторная антигенная мишень 6 (ESAT-6), антиген массой 38 кДа и комплекс Ag85.11 Тем не менее, диагностическая эффективность этого антигенного подхода все еще неудовлетворительна.5-6 Mycobacterium tuberculosis относится к группе внутриклеточных бактерий, которые размножаются внутри покоящихся макрофагов. На ранних стадиях инфекции центральной нервной системы (ЦНС) туберкулезные бациллы в ЦСЖ немедленно фагоцитируются макрофагами,12-13 что приводит к дефициту микобактериальных маркеров в циркулирующей ЦСЖ. Таким образом, пока нет таких тестов для ранней диагностики активного ТБМ с необходимой чувствительностью и специфичностью.

Исследователи предположили, что, в отличие от дефицита микобактериальных маркеров в циркулирующей ЦСЖ, макрофаги в инфицированной ЦСЖ могут нести высокую нагрузку микобактериальных антигенов, что может способствовать развитию клеточного диагностического подхода к ТБМ. Здесь исследователи стремились разработать иммуноцитохимический метод мазка для повышения точности ранней диагностики ТБМ путем изучения ранней секреторной антигенной мишени 6 (ESAT-6), специфичных для микобактерий антигенов, в макрофагах в образцах спинномозговой жидкости от пациентов с ТБМ и пациентов с инфекционным менингитом, отличным от ТБМ. Исследователи также сравнили эффективность этого клеточного подхода для выявления антигенов микобактерий с микробиологическим методом и методом МАНК в лабораторной диагностике ТБМ. Кроме того, на основании клинических проявлений, ЦСЖ и этиологических данных в этом исследовании исследователи предложили новые диагностические критерии ТБМ.