CSF中のESAT-6による結核性髄膜炎の診断

結核は世界的な健康被害をもたらす疾患であり、結核性髄膜炎 (TBM) は肺外結核の最も深刻な臨床症状の 1 つです。 効果的な化学療法が利用できるにもかかわらず、TBM 患者を迅速に認識して治療することができないため、この疾患は世界中で壊滅的な被害をもたらしています。 したがって、感染した個人を正確かつタイムリーに特定し、それに続いて効果的な抗結核化学療法を迅速に開始することが、TBM の死亡率を下げるために不可欠です。 TBM の臨床的および脳脊髄液 (CSF) の特徴は非特異的であり、ウイルス性、細菌性またはクリプトコッカス性髄膜炎などの他の感染性髄膜炎の過多と区別する必要があり、診断の混乱を招くことがよくあります。 その結果、TBM は、不可逆的な神経学的損傷がすでに発生している場合に診断されることが多く、したがって、TBM が真剣に検討されている場合は、個々の検査の結果に関係なく、即時の抗結核療法が推奨されます。

TBM の確認は、細菌学的方法による CSF 中の結核菌の証明に依存します。 塗抹抗酸菌顕微鏡法は迅速で安価ですが、感度が非常に低く (10 ～ 20%) 3、培養も感度が低く、時間がかかります。 TBM の検査診断を改善するために、多くの戦略が試みられてきました。 核酸増幅検査 (NAAT) は、TBM の診断を確認する上で潜在的な役割を示していますが、CSF の細菌負荷が低いこともあり、感度が全体的に低い (0.46-0.66) という問題があります.4-5 免疫診断法も評価されていますが、感染のさまざまな段階におけるTBM患者の免疫応答の不均一性は、CSFサンプル中のマイコバクテリア抗体の検出に大きな障害をもたらします.6-7 一般に、TBM の慢性期の患者は、結核菌のすべての主要な抗原に対して無数の抗体反応を示しますが、初期段階の患者では検出可能な抗体反応はほとんどありません。 さらに、CSF 中のマイコバクテリア抗体の解釈は、血漿からの抗体の寄与を考慮に入れなければならないため、これらの抗体ベースの免疫診断法を最も必要とされる場所で使用することを危うくします.7 既存の感染の直接的な証拠を提供する 1 つのアプローチは、循環 CSF 中の特定の抗原の存在の検出です。 これらの検査の第一世代では、カルメット-ゲラン菌 (BCG) や精製タンパク質誘導体 (PPD) などの非特異的抗原が使用されていました.8-10 結核菌のゲノム解析と抗原マイニングにより、早期分泌型抗原標的 6 (ESAT-6)、38 kD 抗原、Ag85 複合体など、より特異的な新規抗原が得られました.11 それにもかかわらず、この抗原ベースのアプローチの診断効率はまだ満足のいくものではありません.5-6 結核菌は細胞内細菌のグループに属し、休止中のマクロファージ内で複製します。 中枢神経系 (CNS) 感染の初期段階では、CSF 中の結核菌はマクロファージによって直ちに貪食され 12-13 、循環 CSF 中のマイコバクテリア マーカーが不足します。 したがって、必要な感度と特異性を備えた活動性TBMの早期診断に利用できるそのような検査はまだありません。

研究者らは、循環 CSF 中のマイコバクテリア マーカーの不足とは対照的に、感染した CSF 中のマクロファージはマイコバクテリア抗原を大量に保有している可能性があり、TBM の細胞ベースの診断アプローチの開発に役立つ可能性があるという仮説を立てました。 ここで、研究者は、TBM 患者の CSF 検体中のマクロファージで、マイコバクテリウム特異的抗原である早期分泌抗原性標的 6 (ESAT-6) を調べることにより、TBM の早期診断の精度を向上させる塗抹免疫細胞化学的方法を開発しようとしました。 TBM以外の感染性髄膜炎患者。 研究者らはまた、マイコバクテリア抗原を検出するためのこの細胞ベースのアプローチの効率を、TBM の検査室診断における微生物学的および NAAT 法と比較しました。 さらに、この研究における臨床症状、CSF、および病因学的所見に基づいて、研究者はTBMの新しい診断基準を提案しました。