Diagnose af tuberkuløs meningitis ved ESAT-6 i CSF

Tuberkulose er en sygdom, der bærer en global sundhedsbyrde, og tuberkuløs meningitis (TBM) er en af ​​de mest alvorlige kliniske manifestationer af ekstrapulmonal tuberkulose. Manglen på omgående at genkende og behandle patienter med TBM gør det muligt for sygdommen at kræve en ødelæggende vejafgift over hele kloden på trods af tilgængeligheden af ​​effektiv kemoterapi. Derfor er nøjagtig og rettidig identifikation af inficerede individer og efterfølgende hurtig påbegyndelse af effektiv anti-tuberkulose kemoterapi afgørende for at reducere dødeligheden af ​​TBM.1 Sygdommen er imidlertid ofte vanskelig at diagnosticere med sikkerhed, især i tidlige stadier,2 som den præsenterende kliniske og cerebrospinalvæske (CSF) træk ved TBM er uspecifikke og skal differentieres fra en overflod af andre infektiøse meningitider såsom viral, bakteriel eller kryptokok meningitis, som ofte resulterer i diagnostisk forvirring. Som følge heraf diagnosticeres TBM ofte, når irreversible neurologiske skader allerede har fundet sted, og øjeblikkelig anti-tuberkulosebehandling anbefales derfor uanset resultaterne af individuelle tests, hvis TBM er alvorligt overvejet.

Bekræftelsen af ​​TBM afhænger af påvisningen af ​​Mycobacterium tuberculosis i CSF ved bakteriologiske metoder. Smøre syrefast bacillemikroskopi er hurtig og billig, men har en meget lav følsomhed (10-20%),3 og dyrkning mangler også følsomhed og er tidskrævende. En række strategier er blevet forsøgt for at forbedre laboratoriediagnosen af ​​TBM. Nukleinsyreamplifikationstest (NAAT) viser potentielle roller i at bekræfte diagnosen TBM, men de lider også af problemet med generel lav følsomhed (0,46-0,66), delvist på grund af en lav bacillær belastning i CSF.4-5 Immundiagnostiske metoder er også blevet evalueret, men heterogeniteten af ​​immunresponser hos TBM-patienter på de forskellige stadier af infektionen udgør en stor hindring for påvisning af mykobakterielle antistoffer i CSF-prøver.6-7 Generelt har patienter i de kroniske stadier af TBM et utal af antistofreaktioner på alle større antigener af Mycobacterium tuberculosis, mens patienter i de tidlige stadier næsten ikke har nogen påviselig antistofreaktion. Derudover skal fortolkning af mykobakterielle antistoffer i CSF tage højde for bidraget fra antistoffer fra plasmaet, hvilket bringer brugen af ​​disse antistofbaserede immundiagnostiske metoder i fare på det sted, hvor der er størst behov for dem.7 En tilgang til at tilvejebringe direkte beviser for eksisterende infektion er påvisningen af ​​tilstedeværelsen af ​​specifikke antigener i den cirkulerende CSF. Den første generation af disse tests anvendte ikke-specifikke antigener som eksemplificeret ved bacille Calmette-Guerin (BCG) eller oprenset proteinderivat (PPD).8-10 Genomisk analyse og antigenudvinding af Mycobacterium tuberculosis har givet nye, mere specifikke antigener, såsom tidligt sekretorisk antigent target 6 (ESAT-6), 38-kD antigen og Ag85-kompleks.11 Ikke desto mindre er den diagnostiske effektivitet af denne antigen-baserede tilgang stadig utilfredsstillende.5-6 Mycobacterium tuberculosis tilhører gruppen af ​​intracellulære bakterier, som replikerer i hvilende makrofager. I de tidlige stadier af infektionen i centralnervesystemet (CNS) fagocyteres tuberkelbacillerne i CSF øjeblikkeligt af makrofagerne12-13, hvilket fører til knapheden af ​​mykobakterielle markører i den cirkulerende CSF. Der er således endnu ikke blevet tilgængelige sådanne tests til tidlig diagnose af aktiv TBM med den nødvendige sensitivitet og specificitet.

Forskerne antog, at i modsætning til knapheden af ​​mykobakterielle markører i den cirkulerende CSF, kan makrofager i inficeret CSF bære en høj belastning af mycobakterielle antigener, hvilket kunne egne sig til udviklingen af ​​en cellebaseret diagnostisk tilgang til TBM. Her søgte efterforskerne at udvikle en smear immunocytokemisk metode til at forbedre nøjagtigheden af ​​tidlig diagnosticering af TBM ved at undersøge tidligt sekretorisk antigenisk mål 6 (ESAT-6), et mycobakteriespecifikt antigener, i makrofagerne i CSF-prøver fra patienter med TBM og patienter med anden infektiøs meningitis end TBM. Forskerne sammenlignede også effektiviteten af ​​denne cellebaserede tilgang til påvisning af mykobakterielle antigener med mikrobiologisk og NAAT-metode i laboratoriediagnosen af ​​TBM. Yderligere, på grundlag af de kliniske præsentationer, CSF og ætiologiske fund i denne undersøgelse, foreslog efterforskerne nye diagnostiske kriterier for TBM.