Diagnosi di meningite tubercolare mediante ESAT-6 nel liquido cerebrospinale

La tubercolosi è una malattia che comporta un onere sanitario globale e la meningite tubercolare (TBM) è una delle manifestazioni cliniche più gravi della tubercolosi extrapolmonare. L'incapacità di riconoscere e trattare tempestivamente i pazienti con TBM consente alla malattia di esigere un tributo devastante in tutto il mondo nonostante la disponibilità di una chemioterapia efficace. Pertanto, l'identificazione accurata e tempestiva delle persone infette e il successivo tempestivo inizio di un'efficace chemioterapia antitubercolare sono essenziali per ridurre la mortalità della TBM.1 Tuttavia, la malattia è spesso difficile da diagnosticare con certezza, soprattutto nelle fasi iniziali,2 poiché la le caratteristiche cliniche e del liquido cerebrospinale (CSF) della TBM non sono specifiche e devono essere differenziate da una pletora di altre meningiti infettive come la meningite virale, batterica o criptococcica, che spesso provocano confusione diagnostica. Di conseguenza, la TBM viene spesso diagnosticata quando si sono già verificati danni neurologici irreversibili e pertanto si raccomanda un'immediata terapia antitubercolare indipendentemente dai risultati dei singoli test se la TBM è seriamente contemplata.

La conferma della TBM dipende dalla dimostrazione di Mycobacterium tuberculosis nel liquido cerebrospinale mediante metodi batteriologici. La microscopia con bacillo acido-resistente su striscio è rapida ed economica, ma ha una sensibilità molto bassa (10-20%)3 e anche la coltura manca di sensibilità e richiede tempo. Sono state tentate numerose strategie per migliorare la diagnosi di laboratorio della TBM. I test di amplificazione dell'acido nucleico (NAAT) mostrano ruoli potenziali nel confermare la diagnosi di TBM, ma anch'essi soffrono del problema della bassa sensibilità complessiva (0,46-0,66), in parte a causa di un basso carico bacillare nel CSF.4-5 Sono stati valutati anche metodi immunodiagnostici, ma l'eterogeneità delle risposte immunitarie nei pazienti affetti da TBM nei diversi stadi dell'infezione pone un grosso ostacolo alla rilevazione di anticorpi micobatterici nei campioni di liquor.6-7 In generale, i pazienti negli stadi cronici della TBM hanno una miriade di risposte anticorpali a tutti i principali antigeni del Mycobacterium tuberculosis, mentre i pazienti nelle fasi iniziali non hanno quasi nessuna risposta anticorpale rilevabile. Inoltre, l'interpretazione degli anticorpi micobatterici nel liquido cerebrospinale deve tenere conto del contributo degli anticorpi del plasma, mettendo quindi a repentaglio l'uso di questi metodi immunodiagnostici basati su anticorpi nel luogo in cui sono più necessari.7 Un approccio per fornire la prova diretta dell'infezione esistente è il rilevamento della presenza di antigeni specifici nel liquido cerebrospinale circolante. La prima generazione di questi test utilizzava antigeni non specifici come esemplificato dal bacillo di Calmette-Guerin (BCG) o dal derivato proteico purificato (PPD).8-10 L'analisi genomica e l'estrazione dell'antigene del Mycobacterium tuberculosis hanno prodotto antigeni nuovi e più specifici, come il bersaglio antigenico secretorio precoce 6 (ESAT-6), l'antigene da 38 kD e il complesso Ag85.11 Tuttavia, l'efficacia diagnostica di questo approccio basato sull'antigene è ancora insoddisfacente.5-6 Mycobacterium tuberculosis appartiene al gruppo di batteri intracellulari, che si replicano all'interno dei macrofagi a riposo. Durante le prime fasi dell'infezione del sistema nervoso centrale (SNC), i bacilli tubercolari nel CSF vengono immediatamente fagocitati dai macrofagi,12-13 portando alla scarsità di marcatori micobatterici nel CSF circolante. Pertanto, non sono ancora disponibili tali test per la diagnosi precoce di TBM attiva con la sensibilità e la specificità richieste.

I ricercatori hanno ipotizzato che, in contrasto con la scarsità di marcatori micobatterici nel CSF circolante, i macrofagi nel CSF infetto possano trasportare un carico elevato di antigeni micobatterici, che potrebbero prestarsi allo sviluppo di un approccio diagnostico basato sulle cellule per la TBM. Qui, i ricercatori hanno cercato di sviluppare un metodo immunocitochimico di striscio per migliorare l'accuratezza della diagnosi precoce di TBM esaminando il bersaglio antigenico secretorio precoce 6 (ESAT-6), un antigene specifico del micobatterio, nei macrofagi nei campioni di CSF da pazienti con TBM e pazienti con meningite infettiva diversa da TBM. I ricercatori hanno anche confrontato l'efficienza di questo approccio basato sulle cellule per rilevare gli antigeni micobatterici con il metodo microbiologico e NAAT nella diagnosi di laboratorio della TBM. Inoltre, sulla base delle presentazioni cliniche, del liquido cerebrospinale e dei risultati eziologici in questo studio, i ricercatori hanno proposto nuovi criteri diagnostici per la TBM.