Diagnose der tuberkulösen Meningitis durch ESAT-6 im Liquor

Tuberkulose ist eine Krankheit, die eine globale Gesundheitslast mit sich bringt, und die tuberkulöse Meningitis (TBM) ist eine der schwerwiegendsten klinischen Manifestationen der extrapulmonalen Tuberkulose. Das Versäumnis, Patienten mit TBM sofort zu erkennen und zu behandeln, führt dazu, dass die Krankheit trotz der Verfügbarkeit einer wirksamen Chemotherapie weltweit einen verheerenden Tribut fordert. Daher sind die genaue und rechtzeitige Identifizierung infizierter Personen und die anschließende unverzügliche Einleitung einer wirksamen Anti-Tuberkulose-Chemotherapie unerlässlich, um die Mortalität von TBM zu reduzieren.1 Die Krankheit ist jedoch oft schwierig mit Sicherheit zu diagnostizieren, insbesondere in frühen Stadien,2 wie die Präsentation Die klinischen und zerebrospinalen Flüssigkeitsmerkmale (CSF) von TBM sind unspezifisch und müssen von einer Fülle anderer infektiöser Meningitiden wie viraler, bakterieller oder Kryptokokken-Meningitis unterschieden werden, die häufig zu diagnostischen Verwirrung führen. Folglich wird TBM häufig diagnostiziert, wenn bereits irreversible neurologische Schäden aufgetreten sind, und daher wird unabhängig von den Ergebnissen einzelner Tests eine sofortige Anti-Tuberkulose-Therapie empfohlen, wenn TBM ernsthaft in Betracht gezogen wird.

Die Bestätigung von TBM hängt vom Nachweis von Mycobacterium tuberculosis im Liquor durch bakteriologische Methoden ab. Die Ausstrichmikroskopie mit säurefesten Bazillen ist schnell und kostengünstig, hat aber eine sehr geringe Empfindlichkeit (10–20 %)3, und die Kultur ist ebenfalls nicht empfindlich und zeitaufwändig. Eine Anzahl von Strategien wurde versucht, um die Labordiagnose von TBM zu verbessern. Nukleinsäureamplifikationstests (NAAT) zeigen potenzielle Rollen bei der Bestätigung der TBM-Diagnose, aber auch sie leiden unter dem Problem einer insgesamt niedrigen Sensitivität (0,46-0,66), teilweise aufgrund einer geringen Bazillenlast im Liquor.4-5 Immundiagnostische Verfahren wurden ebenfalls evaluiert, aber die Heterogenität der Immunantworten bei TBM-Patienten in den verschiedenen Stadien der Infektion stellt ein großes Hindernis für den Nachweis von mykobakteriellen Antikörpern in Liquorproben dar.6-7 Im Allgemeinen haben Patienten in den chronischen Stadien von TBM eine Vielzahl von Antikörperantworten auf alle Hauptantigene von Mycobacterium tuberculosis, während Patienten in den frühen Stadien kaum eine nachweisbare Antikörperantwort haben. Darüber hinaus muss bei der Interpretation von mykobakteriellen Antikörpern im Liquor der Beitrag von Antikörpern aus dem Plasma berücksichtigt werden, wodurch die Verwendung dieser Antikörper-basierten immundiagnostischen Methoden dort gefährdet wird, wo sie am dringendsten benötigt werden.7 Ein Ansatz zum direkten Nachweis einer bestehenden Infektion ist der Nachweis spezifischer Antigene im zirkulierenden Liquor. Die erste Generation dieser Tests verwendete unspezifische Antigene, wie sie beispielsweise durch Bacille Calmette-Guerin (BCG) oder gereinigtes Proteinderivat (PPD) veranschaulicht werden.8-10 Die Genomanalyse und das Antigen-Mining von Mycobacterium tuberculosis haben neue, spezifischere Antigene hervorgebracht, wie das frühe sekretorische Antigen-Target 6 (ESAT-6), das 38-kD-Antigen und den Ag85-Komplex.11 Dennoch ist die diagnostische Effizienz dieses Antigen-basierten Ansatzes noch unbefriedigend.5-6 Mycobacterium tuberculosis gehört zur Gruppe der intrazellulären Bakterien, die sich in ruhenden Makrophagen vermehren. Während der frühen Stadien der Infektion des Zentralnervensystems (ZNS) werden die Tuberkelbazillen im Liquor sofort von den Makrophagen phagozytiert,12-13 was zu einem Mangel an mykobakteriellen Markern im zirkulierenden Liquor führt. Daher sind bisher keine derartigen Tests zur Früherkennung von aktiver TBM mit der erforderlichen Sensitivität und Spezifität verfügbar.

Die Forscher stellten die Hypothese auf, dass Makrophagen im infizierten Liquor im Gegensatz zum Mangel an mykobakteriellen Markern im zirkulierenden Liquor möglicherweise eine hohe Belastung mit mykobakteriellen Antigenen tragen, was sich für die Entwicklung eines zellbasierten diagnostischen Ansatzes für TBM anbieten könnte. Hier versuchten die Forscher, ein immunzytochemisches Abstrichverfahren zu entwickeln, um die Genauigkeit der Frühdiagnose von TBM zu verbessern, indem sie das frühe sekretorische antigene Ziel 6 (ESAT-6), ein Mycobakterium-spezifisches Antigen, in den Makrophagen in Liquorproben von Patienten mit TBM untersuchten Patienten mit infektiöser Meningitis außer TBM. Die Forscher verglichen auch die Effizienz dieses zellbasierten Ansatzes zum Nachweis mykobakterieller Antigene mit mikrobiologischen und NAAT-Methoden bei der Labordiagnose von TBM. Darüber hinaus schlugen die Forscher auf der Grundlage der klinischen Präsentationen, der CSF und der ätiologischen Befunde in dieser Studie neue diagnostische Kriterien für TBM vor.