Diagnóstico de Meningite Tuberculosa por ESAT-6 no LCR

A tuberculose é uma doença que acarreta um fardo de saúde global, e a meningite tuberculosa (TBM) é uma das manifestações clínicas mais graves da tuberculose extrapulmonar. A incapacidade de reconhecer e tratar prontamente os pacientes com TBM permite que a doença exerça uma carga devastadora em todo o mundo, apesar da disponibilidade de quimioterapia eficaz. Portanto, a identificação precisa e oportuna de indivíduos infectados e o subsequente início imediato de quimioterapia antituberculose eficaz são essenciais para reduzir a mortalidade por TBM.1 No entanto, muitas vezes é difícil diagnosticar a doença com certeza, especialmente nos estágios iniciais,2 pois a apresentação as características clínicas e do líquido cefalorraquidiano (LCR) da TBM são inespecíficas e devem ser diferenciadas de uma infinidade de outras meningites infecciosas, como meningite viral, bacteriana ou criptocócica, que freqüentemente resultam em confusão diagnóstica. Consequentemente, a TBM é frequentemente diagnosticada quando já ocorreram danos neurológicos irreversíveis e, portanto, a terapia antituberculose imediata é recomendada, independentemente dos resultados dos testes individuais, se a TBM for seriamente considerada.

A confirmação da TBM depende da demonstração de Mycobacterium tuberculosis no LCR por métodos bacteriológicos. A microscopia de esfregaço de bacilo ácido-resistente é rápida e barata, mas tem uma sensibilidade muito baixa (10-20%),3 e a cultura também carece de sensibilidade e é demorada. Várias estratégias foram tentadas para melhorar o diagnóstico laboratorial da TBM. Testes de amplificação de ácido nucleico (NAAT) mostram papéis potenciais na confirmação do diagnóstico de TBM, mas também sofrem do problema de baixa sensibilidade geral (0,46-0,66), em parte devido a uma baixa carga bacilar no LCR.4-5 Métodos de imunodiagnóstico também foram avaliados, mas a heterogeneidade das respostas imunes em pacientes com TBM nos diferentes estágios da infecção representa um grande obstáculo para a detecção de anticorpos micobacterianos em amostras de LCR.6-7 Em geral, os pacientes nos estágios crônicos da TBM têm uma miríade de respostas de anticorpos a todos os principais antígenos do Mycobacterium tuberculosis, enquanto os pacientes nos estágios iniciais quase não apresentam nenhuma resposta detectável de anticorpos. Além disso, a interpretação de anticorpos micobacterianos no LCR deve levar em consideração a contribuição de anticorpos do plasma, portanto, prejudicando o uso desses métodos de imunodiagnóstico baseados em anticorpos no local onde eles são mais necessários.7 Uma abordagem para fornecer evidência direta de infecção existente é a detecção da presença de antígenos específicos no LCR circulante. A primeira geração desses testes empregou antígenos não específicos como exemplificado pelo bacilo Calmette-Guerin (BCG) ou derivado de proteína purificada (PPD).8-10 A análise genômica e a mineração de antígenos de Mycobacterium tuberculosis produziram antígenos novos e mais específicos, como alvo antigênico secretor precoce 6 (ESAT-6), antígeno de 38 kD e complexo Ag85.11 No entanto, a eficiência diagnóstica dessa abordagem baseada em antígeno ainda é insatisfatória.5-6 Mycobacterium tuberculosis pertence ao grupo de bactérias intracelulares, que se replicam dentro de macrófagos em repouso. Durante os estágios iniciais da infecção do sistema nervoso central (SNC), os bacilos da tuberculose no LCR são imediatamente fagocitados pelos macrófagos,12-13 levando à escassez de marcadores micobacterianos no LCR circulante. Assim, tais testes ainda não estão disponíveis para o diagnóstico precoce de TBM ativa com a sensibilidade e especificidade necessárias.

Os pesquisadores levantaram a hipótese de que, em contraste com a escassez de marcadores micobacterianos no LCR circulante, os macrófagos no LCR infectado podem carregar uma alta carga de antígenos micobacterianos, o que poderia se prestar ao desenvolvimento de uma abordagem diagnóstica baseada em células para TBM. Aqui, os investigadores procuraram desenvolver um método imunocitoquímico de esfregaço para melhorar a precisão do diagnóstico precoce de TBM, examinando o alvo antigênico secretor precoce 6 (ESAT-6), um antígeno específico de micobactéria, nos macrófagos em amostras de LCR de pacientes com TBM e pacientes com meningite infecciosa diferente de TBM. Os pesquisadores também compararam a eficiência dessa abordagem baseada em células para detectar antígenos micobacterianos com o método microbiológico e NAAT no diagnóstico laboratorial de TBM. Além disso, com base nas apresentações clínicas, LCR e achados etiológicos neste estudo, os investigadores propuseram novos critérios diagnósticos para TBM.