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Bêta-lactoglobuline polymérisée Immunoréactivité comparative (ImmuneBLG)

30 avril 2012 mis à jour par: Celso Eduardo Olivier, University of Campinas, Brazil

Étude de l'immunoréactivité de la bêta-lactoglobuline native et polymérisée chez les enfants et les adultes allergiques et/ou intolérants au lait de vache

La β-lactoglobuline bovine (Bos d 5) est un allergène du lait de vache pertinent pour la santé humaine. Nous avons utilisé la β-lactoglobuline polymérisée à l'aide de la transglutaminase microbienne comme modèle d'étude pour déterminer si la polymérisation des protéines pouvait réduire l'allergénicité in vivo et maintenir l'immunoréactivité in vitro et ex vivo dans le but de produire une molécule appropriée à utiliser dans les protocoles d'induction de tolérance. Sur la base de protocoles antérieurs appliqués chez des souris et des enfants, nous avons effectué des provocations in vivo (à l'aide d'un test cutané) avec de la β-lactoglobuline native et polymérisée chez des patients adultes présentant une allergie médiée par les IgE au Bos d 5. L'immunoréactivité humorale in vitro a été analysée par immunotransfert. L'immunoréactivité à médiation cellulaire a été analysée à l'aide de provocations ex vivo avec de la β-lactoglobuline native et polymérisée contrôlée par des tests d'inhibition de l'adhérence des leucocytes. L'hypothèse de l'étude est d'identifier une diminution de l'immunoréactivité des bêta-lactoglobulines après polymérisation.

Aperçu de l'étude

Statut

Complété

Les conditions

Description détaillée

L'allergie au lait de vache est une affection débilitante de diagnostic difficile et, jusqu'à présent, sans solution définitive pouvant être présentée au patient par l'assistant médical. Parmi les dizaines de protéines du lait de vache, la bêta-lactoglobuline (Bos d 5) est l'une des plus allergènes du fait qu'elle n'est pas produite par l'être humain et du fait de sa difficile digestibilité. L'allergénicité de la bêta-lactoglobuline chez l'homme est un sujet bien étudié mais on sait peu de choses sur l'allergénicité des protéines biotransformées comme la bêta-lactoglobuline polymérisée.

L'objectif du présent travail est d'étudier l'immunoréactivité de la bêta-lactoglobuline polymérisée et de la comparer à l'immunoréactivité de la bêta-lactoglobuline native chez des patients avec et sans diagnostic clinique d'hypersensibilité/intolérance au lait de vache. Il a été utilisé la polymérisation induite thermiquement et la polymérisation induite par la transglutaminase en présence de cystéine.

Cinq groupes de patients (trois symptomatiques et deux témoins) provenant de deux cliniques de caractéristiques distinctes avaient été étudiés selon la présentation des symptômes et soumis à des tests cutanés allergiques et des immunoessais pour la recherche d'IgE spécifiques contre la bêta-lactoglobuline, ainsi que l'évaluation de immunoréactivité à médiation cellulaire par des tests de provocation contrôlés par le test d'inhibition de l'adhérence des leucocytes.

Des tests cutanés côte à côte avec de la bêta-lactoglobuline native et polymérisée chez 56 adultes présentant une hypersensibilité problématique au lait de vache précédemment diagnostiquée comme intolérante au lactose ont été effectués, ainsi que la recherche d'IgE spécifiques contre la bêta-lactoglobuline par ImmunoCAP et immunoblot. Un groupe témoin de 20 sujets tolérants au lait de vache personnes avec absence d'IgE-spécifiques contre la bêta-lactoglobuline (détectables par ImmunoCAP ou par des tests cutanés allergiques) avait été sélectionné pour le contrôle de la technique d'immunoblot. Les résultats ont montré que la détection analytique par immunotransfert d'IgE spécifiques est significativement plus sensible lorsque la bêta-lactoglobuline polymérisée est utilisée dans l'immunodosage au lieu du monomère bêta-lactoglobuline. Les résultats avaient montré que la recherche d'IgE-spécifiques par immunoCAP en dessous des limites de détection, ou l'absence de réactivité cutanée n'écarte pas la possibilité d'une hypersensibilité médiée par les IgE comme démontré par immunoblot.

Des tests cutanés côte à côte avec de la bêta-lactoglobuline native et polymérisée ont été effectués chez 22 enfants symptomatiques, avec un diagnostic confirmé par ImmunoCAP d'allergie médiée par les IgE à la bêta-lactoglobuline. Un groupe témoin apparié de 22 enfants asymptomatiques avec des IgE spécifiques non détectables pour la bêta-lactoglobuline par ImmunoCAP a été établi pour la comparaison de la technique des tests cutanés. Les résultats avaient montré que les réactions cutanées réalisées avec la bêta-lactoglobuline polymérisée avaient été significativement moindres que les réactions des réactions cutanées réalisées avec la bêta-lactoglobuline native.

L'immunoréactivité à médiation cellulaire a été étudiée sur 49 sujets atopiques par des provocations allergéniques appariées ex vivo contrôlées par le test d'inhibition de l'adhérence leucocytaire. Les résultats n'ont pas montré de différence significative entre l'immunoréactivité contre la bêta-lactoglobuline native par rapport à la bêta-lactoglobuline polymérisée.

La polymérisation des antigènes protéiques est un modèle d'étude prometteur à approfondir en tant qu'outil potentiel pour l'induction thérapeutique de l'immunotolérance aux protéines alimentaires, car elle diminue l'immunoréactivité in vivo et ne détruit pas les épitopes allergènes comme démontré par l'in vitro et ex essais in vivo.

Type d'étude

Observationnel

Inscription (Réel)

114

Contacts et emplacements

Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.

Lieux d'étude

    • Sao Paulo
      • Campinas, Sao Paulo, Brésil, 13083-887
        • University of Campinas

Critères de participation

Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.

Critère d'éligibilité

Âges éligibles pour étudier

18 ans à 70 ans (ADULTE, OLDER_ADULT)

Accepte les volontaires sains

Oui

Sexes éligibles pour l'étude

Tout

Méthode d'échantillonnage

Échantillon non probabiliste

Population étudiée

Patients ayant des antécédents cliniques convaincants de réactions indésirables reproductibles au lait de vache. Tous les sujets présentaient des βs-IgE détectables par immunotransfert SDS-PAGE.

La description

Critère d'intégration:

  • La présence d'une allergie clinique au lait de vache et d'IgE spécifiques contre la bêta-lactoglobuline

Critère d'exclusion:

  • L'absence d'allergie clinique au lait de vache et d'IgE spécifiques contre la bêta-lactoglobuline

Plan d'étude

Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.

Comment l'étude est-elle conçue ?

Détails de conception

Cohortes et interventions

Groupe / Cohorte
Groupe allergique
Le premier groupe (groupe A) comprenait 45 patients (17 hommes ; âge moyen : 46,2 ans, SD : 12,2 ans) avec des antécédents cliniques convaincants d'effets indésirables reproductibles au lait de vache. Tous les sujets présentaient des βs-IgE détectables par immunotransfert SDS-PAGE.
Groupe non allergique
Le deuxième groupe (groupe B) a servi de témoin pour l'analyse par immunotransfert effectuée dans le premier groupe et comprenait 20 individus sélectionnés sur la base d'une tolérance évidente au lait de vache, d'une absence de βs-IgE par le test ImmunoCAP et d'une non-réactivité du SPT au β-Lg ou TgPolβ-Lg (6 hommes ; âge moyen : 21,9 ans, ET : 17,6 ans).
Groupe atopique
Le troisième groupe (groupe C) comprenait 49 sujets atteints de maladies respiratoires et/ou dermatologiques atopiques (19 hommes ; âge moyen : 28,7 ans, ET : 20,6 ans) quel que soit le statut βs-IgE. Ce groupe a été utilisé pour comparer l'immunoréactivité à médiation cellulaire ex vivo entre β-Lg et TgPolβ-Lg en comparant les résultats moyens de provocation antigénique ex vivo déterminés à l'aide du test d'inhibition de l'adhérence des leucocytes (LAIT).

Que mesure l'étude ?

Principaux critères de jugement

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
Évaluation de l'immunoréactivité de la bêta-lactoglobuline après polymérisation
Délai: deux ans
Les tests cutanés et les provocations ex vivo sont utilisés pour démontrer si la polymérisation peut altérer l'immunorréactivité de la bêta-lactoglobuline.
deux ans

Collaborateurs et enquêteurs

C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.

Les enquêteurs

  • Chaise d'étude: Ricardo L Zollner, MD PhD, University of Campinas

Publications et liens utiles

La personne responsable de la saisie des informations sur l'étude fournit volontairement ces publications. Il peut s'agir de tout ce qui concerne l'étude.

Dates d'enregistrement des études

Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.

Dates principales de l'étude

Début de l'étude

1 juillet 2010

Achèvement primaire (Réel)

1 juillet 2010

Achèvement de l'étude (Réel)

1 juillet 2011

Dates d'inscription aux études

Première soumission

27 avril 2012

Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité

30 avril 2012

Première publication (Estimation)

2 mai 2012

Mises à jour des dossiers d'étude

Dernière mise à jour publiée (Estimation)

2 mai 2012

Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité

30 avril 2012

Dernière vérification

1 avril 2012

Plus d'information

Ces informations ont été extraites directement du site Web clinicaltrials.gov sans aucune modification. Si vous avez des demandes de modification, de suppression ou de mise à jour des détails de votre étude, veuillez contacter register@clinicaltrials.gov. Dès qu'un changement est mis en œuvre sur clinicaltrials.gov, il sera également mis à jour automatiquement sur notre site Web .

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