Immunoreattività comparativa della beta-lattoglobulina polimerizzata (ImmuneBLG)

L'allergia al latte vaccino è una condizione debilitante di difficile diagnosi e, fino al momento, senza una soluzione definitiva che possa essere presentata al paziente dall'assistente medico. Tra le decine di proteine ​​del latte vaccino, la beta-lattoglobulina (Bos d 5) è una delle più allergeniche per il fatto di non essere prodotta dall'essere umano e per la sua difficile digeribilità. L'allergenicità della beta-lattoglobulina negli esseri umani è un argomento ben studiato, ma si sa poco sull'allergenicità delle proteine ​​bioprocessate come la beta-lattoglobulina polimerizzata.

L'obiettivo del presente lavoro è studiare l'immunoreattività della beta-lattoglobulina polimerizzata e confrontarla con l'immunoreattività della beta-lattoglobulina nativa in pazienti con e senza diagnosi clinica di ipersensibilità/intolleranza al latte vaccino. È stata utilizzata la polimerizzazione termicamente indotta e la polimerizzazione indotta dalla transglutaminasi in presenza di cisteina.

Cinque gruppi di pazienti (tre sintomatici e due di controllo) provenienti da due cliniche di caratteristiche distinte erano stati studiati secondo la presentazione dei sintomi e sottoposti a test cutanei allergici e immunodosaggi per la ricerca di IgE specifiche contro la beta-lattoglobulina, nonché valutazione di immunoreattività cellulo-mediata mediante challenge test monitorati mediante Leukocyte Adherence Inhibition Test.

Sono stati effettuati test cutanei affiancati con beta-lattoglobuline native e polimerizzate in 56 adulti con ipersensibilità problematica al latte vaccino precedentemente diagnosticati come intolleranti al lattosio, nonché ricerca di IgE specifiche contro beta-lattoglobuline mediante ImmunoCAP e immunoblot. Per il controllo della tecnica di immunoblot è stato selezionato un gruppo di controllo di 20 soggetti tolleranti al latte vaccino con assenza di IgE specifiche contro la beta-lattoglobulina (rilevabili mediante ImmunoCAP o mediante test cutanei allergici). I risultati hanno mostrato che la rilevazione analitica mediante immunoblot di IgE specifiche è significativamente più sensibile quando la beta-lattoglobulina polimerizzata viene utilizzata nel dosaggio immunologico invece del monomero della beta-lattoglobulina. I risultati hanno dimostrato che la ricerca di IgE specifiche mediante immunoCAP al di sotto dei limiti di rilevabilità o l'assenza di reattività cutanea non esclude la possibilità di ipersensibilità IgE-mediata come dimostrato dall'immunoblot.

Test cutanei laterali con beta-lattoglobulina nativa e polimerizzata sono stati eseguiti in 22 bambini sintomatici, con diagnosi ImmunoCAP confermata di allergia IgE-mediata alla beta-lattoglobulina. Un gruppo di controllo abbinato di 22 bambini asintomatici con IgE specifiche non rilevabili per la beta-lattoglobulina mediante ImmunoCAP è stato istituito per il confronto della tecnica dei test cutanei. I risultati avevano mostrato che le reazioni cutanee portate avanti con la beta-lattoglobulina polimerizzata erano state significativamente inferiori rispetto alle reazioni delle reazioni cutanee portate avanti con la beta-lattoglobulina nativa.

L'immunoreattività cellulo-mediata è stata studiata su 49 soggetti atopici mediante prove di allergene ex vivo accoppiate monitorate dal test di inibizione dell'aderenza leucocitaria. I risultati non hanno mostrato differenze significative tra l'immunoreattività contro la beta-lattoglobulina nativa rispetto a quella polimerizzata.

La polimerizzazione di antigeni proteici è un promettente modello di studio da approfondire come potenziale strumento per l'induzione terapeutica dell'immunotolleranza alle proteine ​​alimentari, perché diminuisce l'immunoreattività in vivo e non distrugge gli epitopi allergenici come dimostrato dall'analisi in vitro ed ex saggi in vivo.