Imunorreatividade comparativa de beta-lactoglobulina polimerizada (ImmuneBLG)

A alergia ao leite de vaca é uma condição debilitante de difícil diagnóstico e, até o momento, sem solução definitiva que possa ser apresentada ao paciente pelo médico assistente. Dentre as dezenas de proteínas do leite de vaca, a beta-lactoglobulina (Bos d 5) é uma das mais alergênicas pelo fato de não ser produzida pelo ser humano e por ser de difícil digestibilidade. A alergenicidade da beta-lactoglobulina em seres humanos é um assunto bastante estudado, mas pouco se sabe sobre a alergenicidade de proteínas bioprocessadas como a beta-lactoglobulina polimerizada.

O objetivo do presente trabalho é estudar a imunorreatividade da beta-lactoglobulina polimerizada e compará-la com a imunorreatividade da beta-lactoglobulina nativa em pacientes com e sem diagnóstico clínico de hipersensibilidade/intolerância ao leite de vaca. Foi utilizada polimerização induzida termicamente e polimerização induzida por transglutaminase na presença de cisteína.

Cinco grupos de pacientes (três sintomáticos e dois controles) provenientes de duas clínicas de características distintas foram estudados quanto à apresentação dos sintomas e submetidos a testes cutâneos alérgicos e imunoensaios para pesquisa de IgE-específica contra beta-lactoglobulina, bem como avaliação de imunorreatividade mediada por células por testes de provocação monitorados por Leukocyte Adherence Inhibition Test.

Foram realizados testes cutâneos lado a lado com beta-lactoglobulina nativa e polimerizada em 56 adultos com hipersensibilidade problemática ao leite de vaca previamente diagnosticados como intolerantes à lactose, bem como pesquisa de IgE-específica contra beta-lactoglobulina por ImmunoCAP e immunoblot. Um grupo controle de 20 indivíduos tolerantes ao leite de vaca com ausência de IgE específica contra beta-lactoglobulina (detectável por ImmunoCAP ou por testes cutâneos alérgicos) foi selecionado para controle da técnica de imunoblot. Os resultados mostraram que a detecção analítica por imunoblot de IgE-específica é significativamente mais sensível quando a beta-lactoglobulina polimerizada é utilizada no imunoensaio ao invés do monômero de beta-lactoglobulina. Os resultados mostraram que a pesquisa de IgE-específica por imunoCAP abaixo dos limites de detecção, ou a ausência de reatividade cutânea, não descarta a possibilidade de hipersensibilidade mediada por IgE demonstrada por imunoblot.

Testes cutâneos lado a lado com beta-lactoglobulina nativa e polimerizada foram realizados em 22 crianças sintomáticas, com diagnóstico confirmado por ImmunoCAP de alergia mediada por IgE à beta-lactoglobulina. Um grupo controle pareado de 22 crianças assintomáticas com IgE específica não detectável para beta-lactoglobulina pelo ImmunoCAP foi estabelecido para comparação da técnica dos testes cutâneos. Os resultados mostraram que as reações cutâneas realizadas com a beta-lactoglobulina polimerizada foram significativamente menores que as reações das reações cutâneas realizadas com a beta-lactoglobulina nativa.

A imunorreatividade mediada por células foi estudada em 49 indivíduos atópicos por desafios pareados de alérgenos ex vivo monitorados pelo teste de inibição de aderência de leucócitos. Os resultados não mostraram diferença significativa entre a imunorreatividade contra beta-lactoglobulina nativa versus polimerizada.

A polimerização de antígenos protéicos é um modelo de estudo promissor a ser mais investigado como uma ferramenta potencial para a indução terapêutica de imunotolerância a proteínas alimentares, pois diminui a imunorreatividade in vivo e não destrói os epítopos alergênicos como demonstrado pelo in vitro e ex ensaios vivos.