Polymeriserat beta-laktoglobulin jämförande immunreaktivitet (ImmuneBLG)

Komjölksallergi är ett försvagande tillstånd med svår diagnos och, tills nu, utan en definitiv lösning som kan presenteras för patienten av läkaren. Bland de dussintals proteinerna i komjölken är beta-laktoglobulin (Bos d 5) ett av de mest allergiframkallande för det faktum att det inte produceras av människan och på grund av dess hårda smältbarhet. Allergeniciteten hos beta-laktoglobulin hos människor är ett ämne som är väl studerat men lite är känt om allergeniciteten hos biobearbetade proteiner som polymeriserat beta-laktoglobulin.

Syftet med föreliggande arbete är att studera immunreaktiviteten hos det polymeriserade beta-laktoglobulinet och att jämföra det med immunreaktiviteten hos det naturliga beta-laktoglobulinet hos patienter med och utan klinisk diagnos av överkänslighet/intolerans mot komjölk. Det användes termiskt inducerad polymerisation och polymerisation inducerad av transglutaminas i närvaro av cystein.

Fem grupper av patienter (tre symtomatiska och två kontroller) som utgick från två kliniker med distinkta egenskaper hade studerats i enlighet med presentationen av symtomen och underkastats allergiska kutana tester och immunanalyser för forskning av specifikt-IgE mot beta-laktoglobulin, samt utvärdering av cellförmedlad immunreaktivitet genom provokationstest som övervakas med Leukocyte Adherence Inhibition Test.

Sida till sida kutana tester med nativt och polymeriserat beta-laktoglobulin på 56 vuxna med problematisk överkänslighet för komjölk som tidigare diagnostiserats som intoleranta mot laktos, samt forskning av specifikt-IgE mot beta-laktoglobulin av ImmunoCAP och immunoblot. En kontrollgrupp på 20 försökspersoner som var toleranta mot komjölkspersoner med frånvaro av specifikt IgE mot beta-laktoglobulin (detekterbart med ImmunoCAP eller genom allergiska hudtester) hade valts ut för kontroll av immunoblottekniken. Resultaten hade visat att den analytiska detekteringen genom immunoblot av specifik-IgE är betydligt mer förnuftig när det polymeriserade beta-laktoglobulinet används i immunoanalysen istället för beta-laktoglobulinmonomeren. Resultaten hade visat att forskningen av specifik-IgE med immunoCAP under detektionsgränserna, eller frånvaron av kutan reaktivitet, inte förkastar möjligheten av IgE-medierad överkänslighet, som påvisats med immunoblot.

Sida till sida kutana tester med nativt och polymeriserat beta-laktoglobulin hade genomförts hos 22 symtomatiska barn, vilka bekräftades genom ImmunoCAP-diagnos av IgE-medierad allergi mot beta-laktoglobulin. En matchad kontrollgrupp med 22 asymtomatiska barn med ej detekterbar specifik IgE för beta-laktoglobulin av ImmunoCAP etablerades för jämförelse av tekniken för hudtesterna. Resultaten hade visat att de kutana reaktionerna som genomfördes med det polymeriserade beta-laktoglobulinet hade varit signifikant mindre än reaktionerna från de kutana reaktionerna som genomfördes med det nativa beta-laktoglobulinet.

Den cellmedierade immunreaktiviteten studerades på 49 atopiska försökspersoner genom parade ex vivo-allergenutmaning övervakade av leukocytvidhäftningsinhiberingstestet. Resultaten visade ingen signifikant skillnad mellan immunreaktiviteten mot nativt kontra polymeriserat beta-laktoglobulin.

Polymerisationen av proteinantigener är en lovande studiemodell som ska undersökas ytterligare som ett potentiellt verktyg för terapeutisk induktion av immunotolerans mot näringsproteiner, eftersom den minskar immunreaktiviteten in vivo och inte förstör de allergiframkallande epitoperna som demonstrerats av in vitro och ex. vivo-analyser.