Inmunorreactividad comparativa de beta-lactoglobulina polimerizada (ImmuneBLG)

La alergia a la leche de vaca es una condición debilitante de difícil diagnóstico y, hasta el momento, sin una solución definitiva que pueda ser presentada al paciente por el médico asistente. Entre las decenas de proteínas de la leche de vaca, la beta-lactoglobulina (Bos d 5) es una de las más alergénicas por el hecho de no ser producida por el ser humano y por su difícil digestibilidad. La alergenicidad de la beta-lactoglobulina en seres humanos es un tema bien estudiado pero se sabe poco sobre la alergenicidad de proteínas bioprocesadas como la beta-lactoglobulina polimerizada.

El objetivo del presente trabajo es estudiar la inmunorreactividad de la beta-lactoglobulina polimerizada y compararla con la inmunorreactividad de la beta-lactoglobulina nativa en pacientes con y sin diagnóstico clínico de hipersensibilidad/intolerancia a la leche de vaca. Se utilizó polimerización inducida térmicamente y polimerización inducida por transglutaminasa en presencia de cisteína.

Cinco grupos de pacientes (tres sintomáticos y dos controles) provenientes de dos clínicas de distintas características fueron estudiados según la presentación de los síntomas y sometidos a pruebas cutáneas alérgicas e inmunoensayos para investigación de IgE específica contra beta-lactoglobulina, así como evaluación de inmunorreactividad mediada por células mediante pruebas de provocación supervisadas por la prueba de inhibición de la adherencia leucocitaria.

Se realizaron pruebas cutáneas lado a lado con beta-lactoglobulina nativa y polimerizada en 56 adultos con hipersensibilidad problemática a la leche de vaca previamente diagnosticada como intolerantes a la lactosa, así como estudios de IgE específica contra beta-lactoglobulina por ImmunoCAP e inmunoblot. Se seleccionó un grupo control de 20 sujetos tolerantes a la leche de vaca con ausencia de IgE específica frente a beta-lactoglobulina (detectables por ImmunoCAP o por pruebas cutáneas alérgicas) para el control de la técnica de inmunoblot. Los resultados mostraron que la detección analítica por inmunotransferencia de IgE específica es significativamente más sensible cuando se usa beta-lactoglobulina polimerizada en el inmunoensayo en lugar del monómero de beta-lactoglobulina. Los resultados mostraron que la búsqueda de IgE específica por inmunoCAP por debajo de los límites de detección, o la ausencia de reactividad cutánea, no descarta la posibilidad de hipersensibilidad mediada por IgE demostrada por inmunoblot.

Se realizaron pruebas cutáneas lado a lado con beta-lactoglobulina nativa y polimerizada en 22 niños sintomáticos, con diagnóstico confirmado por ImmunoCAP de alergia mediada por IgE a beta-lactoglobulina. Se estableció un grupo de control emparejado de 22 niños asintomáticos con IgE específica no detectable para beta-lactoglobulina por ImmunoCAP para comparar la técnica de las pruebas cutáneas. Los resultados mostraron que las reacciones cutáneas realizadas con la beta-lactoglobulina polimerizada habían sido significativamente menores que las reacciones cutáneas realizadas con la beta-lactoglobulina nativa.

La inmunorreactividad mediada por células se estudió en 49 sujetos atópicos mediante desafíos con alérgenos ex vivo emparejados monitorizados mediante la prueba de inhibición de la adherencia de leucocitos. Los resultados no mostraron una diferencia significativa entre la inmunorreactividad frente a la beta-lactoglobulina nativa frente a la polimerizada.

La polimerización de antígenos proteicos es un modelo de estudio prometedor para ser investigado más a fondo como una herramienta potencial para la inducción terapéutica de inmunotolerancia a las proteínas alimentarias, ya que disminuye la inmunorreactividad in vivo y no destruye los epítopos alergénicos como lo demuestran los estudios in vitro y ex. ensayos en vivo.