Surveillance de la résistance à l'artéméther-luméfantrine chez les enfants atteints de paludisme simple à Plasmodium Falciparum au Mali

L'artéméther-luméfantrine (AL) a remplacé l'artésunate + l'amodiaquine comme thérapie combinée d'artémisinine (ART) (ACT) de première ligne pour le paludisme à Plasmodium falciparum non compliqué au Mali. On ne sait pas si les parasites développent une résistance à la LA au Mali, où nous étudions comment l'immunité acquise naturellement et le trait drépanocytaire réduisent le risque de paludisme et la densité parasitaire dans notre population d'étude pédiatrique. Étude de surveillance de la résistance à l'AL : Pour surveiller la résistance émergente à l'AL in vivo et la résistance à la luméfantrine (LF) ex vivo, nous mènerons un protocole standard recommandé par l'OMS pour mesurer les taux de résistance à l'AL au cours des 4 prochaines années. Nous inscrirons tous les enfants âgés de 2 à 17 ans atteints de paludisme à falciparum non compliqué et dont le nombre de parasites est compris entre 2 000 et 200 000 parasites par microlitre, les traiterons avec AL à J0, J1 et J2, confirmerons les concentrations plasmatiques adéquates de FL le jour 7 et surveillerons le paludisme symptômes et parasitémies récurrentes à J0, J1, J2, J3, J7, J14, J21 et J28. Dans des études de laboratoire connexes, nous utiliserons des échantillons de sang prélevés au moment de l'inscription et de la recrudescence pour mesurer la sensibilité du parasite à la FL et à d'autres médicaments antipaludiques ex vivo ; étudier les déterminants génétiques et transcriptionnels de la réponse du parasite à AL in vivo et LF ex vivo ; et préparer des parasites cryoconservés pour des travaux futurs sur l'action des médicaments et les mécanismes de résistance. Sous-étude sur la clairance parasitaire : Nous avons récemment découvert une accélération dépendante de l'âge des taux de clairance parasitaire chez les enfants maliens et postulons qu'elle est médiée par des IgG spécifiques de la protéine 1 de la membrane érythrocytaire de Plasmodium falciparum (PfEMP1), le principal facteur de virulence du parasite à la surface des cellules infectées. globules rouges (iRB). Nous émettons l'hypothèse que l'exposition à l'ART induit l'expression prématurée de PfEMP1 à la surface de l'anneau circulant-iRBC in vivo. Pour tester cette hypothèse, nous calculerons les taux de clairance parasitaire dans un sous-ensemble de sujets présentant des densités parasitaires relativement élevées, et relierons ces taux à la capacité des IgG autologues à reconnaître les hématies annulaires au cours des 8 premières heures d'exposition à l'ART in vivo. Dans ce même sous-ensemble de patients, nous explorerons également si AL induit la dormance parasitaire in vivo en supprimant les parasites à H0, H6, H24, H48, D3, D7 et J14 après la thérapie AL, et en les clonant pour quantifier le nombre de parasites viables . Étude de collecte de sang : Nous avons constaté que le trait drépanocytaire (HbAS), comme l'immunité humorale acquise naturellement, réduit à la fois le risque de paludisme et la densité parasitaire dans notre population d'étude, et que cette protection est associée à un affichage anormal de PfEMP1 sur la surface iRBC. Pour élucider le mécanisme moléculaire de ce phénotype et explorer comment il peut entrer en synergie avec les réponses IgG acquises naturellement, nous étudierons si le développement de la machinerie de trafic PfEMP1 est altéré dans HbAS par rapport aux globules rouges homozygotes normaux de l'hémoglobine A (HbAA) (RBC) . Pour tester cela, nous allons purifier des isolats de parasites d'enfants atteints de paludisme, les inoculer dans des globules rouges HbAA et HbAS de donneurs adultes en bonne santé et suivre leur développement intraérythrocytaire à l'aide de la cytométrie en flux et de la microscopie électronique.