Artemether-lumefantrine-resistentiemonitoring bij kinderen met ongecompliceerde Plasmodium Falciparum-malaria in Mali

Artemether-lumefantrine (AL) heeft artesunaat + amodiaquine vervangen als de eerstelijns artemisinine (ART) combinatietherapie (ACT) voor ongecompliceerde Plasmodium falciparum-malaria in Mali. Het is niet bekend of parasieten resistentie ontwikkelen tegen AL in Mali, waar we onderzoeken hoe natuurlijk verworven immuniteit en sikkelcelkenmerken het malariarisico en de parasietendichtheid in onze pediatrische onderzoekspopulatie verminderen. Onderzoek naar AL-resistentiemonitoring: om opkomende AL-resistentie in vivo en lumefantrine (LF)-resistentie ex vivo te monitoren, zullen we een standaard door de WHO aanbevolen protocol uitvoeren om AL-resistentiepercentages in de komende 4 jaar te meten. We zullen alle kinderen van 2-17 jaar inschrijven met ongecompliceerde falciparum-malaria en een parasietentelling tussen 2.000 en 200.000 parasieten per microliter, ze behandelen met AL op D0, D1 en D2, bevestigen dat de LF-plasmaconcentraties voldoende zijn op dag 7 en controleren op malaria symptomen en terugkerende parasitemie op D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 en D28. In gerelateerde laboratoriumonderzoeken zullen we bloedmonsters gebruiken die zijn genomen op het moment van inschrijving en recrudescentie om de gevoeligheid van parasieten voor LF en andere antimalariamiddelen ex vivo te meten; onderzoek naar genetische en transcriptionele determinanten van parasietrespons op AL in vivo en LF ex vivo; en gecryopreserveerde parasieten voorbereiden op toekomstig werk aan medicijnwerking en resistentiemechanismen. Deelstudie naar parasietenklaring: we hebben onlangs een leeftijdsafhankelijke versnelling van de klaringssnelheid van parasieten ontdekt bij Malinese kinderen, en veronderstellen dat dit wordt gemedieerd door IgG dat specifiek is voor Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein 1 (PfEMP1), de belangrijkste virulentiefactor van de parasiet op het oppervlak van geïnfecteerde parasieten. rode bloedcellen (iRBC's). We veronderstellen dat blootstelling aan ART de voortijdige expressie van PfEMP1 op het oppervlak van circulerende ring-iRBC's in vivo induceert. Om deze hypothese te testen, zullen we parasietenklaringspercentages berekenen in een subgroep van proefpersonen met relatief hoge parasietdichtheden, en deze percentages relateren aan het vermogen van autoloog IgG om ring-iRBC's te herkennen gedurende de eerste 8 uur van ART-blootstelling in vivo. In dezelfde subgroep van patiënten zullen we ook onderzoeken of AL in vivo parasietenslaap veroorzaakt door parasieten op H0, H6, H24, H48, D3, D7 en D14 te verwijderen na AL-therapie, en ze te klonen om het aantal levensvatbare parasieten te kwantificeren. . Onderzoek naar bloedafname: we hebben ontdekt dat sikkelceleigenschap (HbAS), net als natuurlijk verworven humorale immuniteit, zowel het malariarisico als de parasietendichtheid in onze onderzoekspopulatie vermindert, en dat deze bescherming wordt geassocieerd met abnormale PfEMP1-weergave op het iRBC-oppervlak. Om het moleculaire mechanisme van dit fenotype op te helderen en te onderzoeken hoe het kan synergiseren met natuurlijk verworven IgG-responsen, zullen we onderzoeken of de ontwikkeling van PfEMP1-handelsmechanismen is aangetast in HbAS in vergelijking met normale homozygote hemoglobine A (HbAA) rode bloedcellen (RBC's). . Om dit te testen, zullen we parasietisolaten van kinderen met malaria zuiveren, ze inoculeren in HbAA en HbAS RBC's van gezonde volwassen donoren, en hun intra-erytrocytische ontwikkeling volgen met behulp van flowcytometrie en elektronenmicroscopie.