Vigilancia de la resistencia a arteméter-lumefantrina en niños con malaria por Plasmodium falciparum no complicada en Malí

El arteméter-lumefantrina (AL) ha reemplazado al artesunato + amodiaquina como la terapia combinada (ACT) de artemisinina (ART) de primera línea para la malaria por Plasmodium falciparum no complicada en Malí. No se sabe si los parásitos están desarrollando resistencia a AL en Malí, donde estamos estudiando cómo la inmunidad adquirida naturalmente y el rasgo drepanocítico reducen el riesgo de paludismo y la densidad de parásitos en nuestra población de estudio pediátrica. Estudio de control de la resistencia a la AL: para controlar la resistencia emergente a la AL in vivo y la resistencia a la lumefantrina (LF) ex vivo, llevaremos a cabo un protocolo estándar recomendado por la OMS para medir las tasas de resistencia a la AL durante los próximos 4 años. Inscribiremos a todos los niños de 2 a 17 años con paludismo falciparum no complicado y recuento de parásitos entre 2000 y 200 000 parásitos por microlitro, los trataremos con AL los días D0, D1 y D2, confirmaremos concentraciones plasmáticas adecuadas de LF el día 7 y controlaremos el paludismo. síntomas y parasitemias recurrentes en D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 y D28. En estudios de laboratorio relacionados, utilizaremos muestras de sangre tomadas en los momentos de inscripción y recrudecimiento para medir la susceptibilidad del parásito a LF y otros medicamentos antipalúdicos ex vivo; investigar los determinantes genéticos y transcripcionales de la respuesta del parásito a AL in vivo y LF ex vivo; y preparar parásitos crioconservados para trabajos futuros sobre la acción de los medicamentos y los mecanismos de resistencia. Subestudio de eliminación de parásitos: Hemos descubierto recientemente una aceleración dependiente de la edad de las tasas de eliminación de parásitos en niños malienses, y postulamos que está mediada por IgG específica para la proteína 1 de membrana de eritrocitos de Plasmodium falciparum (PfEMP1), el principal factor de virulencia del parásito en la superficie de células infectadas. glóbulos rojos (iRBC). Presumimos que la exposición a ART induce la expresión prematura de PfEMP1 en la superficie de los iRBC en anillo circulantes in vivo. Para probar esta hipótesis, calcularemos las tasas de eliminación de parásitos en un subconjunto de sujetos con densidades de parásitos relativamente altas y relacionaremos estas tasas con la capacidad de la IgG autóloga para reconocer los iRBC en anillo durante las primeras 8 horas de exposición a ART in vivo. En este mismo subconjunto de pacientes, también exploraremos si AL induce la latencia del parásito in vivo mediante la eliminación de parásitos en H0, H6, H24, H48, D3, D7 y D14 después de la terapia con AL y clonándolos para cuantificar la cantidad de parásitos viables. . Estudio de recolección de sangre: hemos encontrado que el rasgo de células falciformes (HbAS), como la inmunidad humoral adquirida naturalmente, reduce tanto el riesgo de malaria como la densidad de parásitos en nuestra población de estudio, y que esta protección está asociada con una visualización anormal de PfEMP1 en la superficie iRBC. Para dilucidar el mecanismo molecular de este fenotipo y explorar cómo puede crear sinergia con las respuestas de IgG adquiridas de forma natural, investigaremos si el desarrollo de la maquinaria de tráfico de PfEMP1 se ve afectado en HbAS en comparación con los glóbulos rojos (RBC) homocigotos de hemoglobina A (HbAA) normales. . Para probar esto, purificaremos aislados de parásitos de niños con paludismo, los inocularemos en glóbulos rojos HbAA y HbAS de donantes adultos sanos y seguiremos su desarrollo intraeritrocitario mediante citometría de flujo y microscopía electrónica.