Artemeter-lumefantriiniresistenssin seuranta lapsilla, joilla on komplisoitumaton Plasmodium Falciparum -malaria Malissa

Artemether-lumefantrine (AL) on korvannut artesunaatin + amodiakiinin etulinjan artemisiniinin (ART) yhdistelmähoidossa (ACT) komplisoitumattomassa Plasmodium falciparum -malariassa Malissa. Ei tiedetä, kehittyvätkö loiset vastustuskykyä AL:lle Malissa, jossa tutkimme, kuinka luonnollisesti hankittu immuniteetti ja sirppisoluominaisuus vähentävät malariariskiä ja loisten tiheyttä lapsitutkimuspopulaatiossamme. AL-resistenssin seurantatutkimus: Seurataksemme kehittyvää AL-resistenssiä in vivo ja lumefantriiniresistenssiä (LF) ex vivo, suoritamme WHO:n suositteleman standardin protokollan AL-resistenssin mittaamiseksi seuraavien 4 vuoden aikana. Otamme mukaan kaikki 2–17-vuotiaat lapset, joilla on komplisoitumaton falciparum-malaria ja loisten määrä on 2 000 - 200 000 loista mikrolitraa kohti, hoidetaan heitä AL:lla D0, D1 ja D2, vahvistetaan riittävät LF-plasmapitoisuudet päivänä 7 ja tarkkaillaan malariaa. oireet ja toistuvat loiset päivällä D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 ja D28. Aiheeseen liittyvissä laboratoriotutkimuksissa käytämme verinäytteitä, jotka on otettu ilmoittautumis- ja uusiutumishetkellä, mitataksemme loisten herkkyyttä LF:lle ja muille malarialääkkeille ex vivo; tutkia geneettisiä ja transkription determinantteja loisten vasteen AL:lle in vivo ja LF ex vivo; ja valmistaa kylmäsäilötyt loiset tulevaa työtä varten lääkkeiden vaikutus- ja resistenssimekanismien parissa. Loisten puhdistuman alatutkimus: Olemme äskettäin havainneet iästä riippuvan loisten puhdistumanopeuden kiihtymisen malilaisilla lapsilla ja oletamme, että sitä välittää IgG, joka on spesifinen Plasmodium falciparumin erytrosyyttikalvoproteiinille 1 (PfEMP1), loisen päävirulenssitekijälle tartunnan saaneen pinnalla. punasolut (iRBC:t). Oletamme, että ART-altistus indusoi PfEMP1:n ennenaikaisen ilmentymisen kiertävien rengas-iRBC:iden pinnalla in vivo. Tämän hypoteesin testaamiseksi laskemme loisten poistumisnopeudet koehenkilöiden alajoukossa, joilla on suhteellisen korkea loisten tiheys, ja yhdistämme nämä nopeudet autologisen IgG:n kykyyn tunnistaa rengas-iRBC:itä ART-altistuksen 8 ensimmäisen tunnin aikana in vivo. Tässä samassa potilaiden alaryhmässä tutkimme myös, aiheuttaako AL loisten lepotilaa in vivo poistamalla loiset kohdissa H0, H6, H24, H48, D3, D7 ja D14 AL-hoidon jälkeen ja kloonaamalla ne elinkelpoisten loisten lukumäärän määrittämiseksi. . Verenkeräystutkimus: Olemme havainneet, että sirppisoluominaisuus (HbAS), kuten luonnollisesti hankittu humoraalinen immuniteetti, vähentää sekä malariariskiä että loisten tiheyttä tutkimuspopulaatiossamme ja että tämä suoja liittyy epänormaaliin PfEMP1-näyttöön iRBC-pinnalla. Selvittääksemme tämän fenotyypin molekyylimekanismia ja selvittääksemme, kuinka se voi synergisoitua luonnollisesti hankittujen IgG-vasteiden kanssa, tutkimme, onko PfEMP1-kuljetuskoneiston kehitys heikentynyt HbAS:ssa verrattuna normaaleihin homotsygoottisiin hemoglobiini A (HbAA) -punasoluihin (RBC) . Tämän testaamiseksi puhdistamme malariaa sairastavien lasten loisolaatteja, rokotamme ne terveiltä aikuisilta luovuttajilta peräisin oleviin HbAA- ja HbAS-punasoluihin ja seuraamme niiden intraerytrosyyttistä kehitystä virtaussytometrian ja elektronimikroskopian avulla.