Artemether-lumefantrin-resistensovervågning hos børn med ukompliceret Plasmodium Falciparum-malaria i Mali

Artemether-lumefantrin (AL) har erstattet artesunate + amodiaquin som frontline artemisinin (ART) kombinationsterapi (ACT) for ukompliceret Plasmodium falciparum malaria i Mali. Det vides ikke, om parasitter udvikler resistens over for AL i Mali, hvor vi studerer, hvordan naturligt erhvervet immunitet og seglcelleegenskaber reducerer malariarisiko og parasittæthed i vores pædiatriske undersøgelsespopulation. AL-resistensovervågningsundersøgelse: For at overvåge ny AL-resistens in vivo og lumefantrin (LF)-resistens ex vivo, vil vi udføre en standard WHO-anbefalet protokol til at måle AL-resistensrater over de næste 4 år. Vi vil tilmelde alle børn i alderen 2-17 år med ukompliceret falciparum malaria og parasitantal mellem 2.000 og 200.000 parasitter pr. mikroliter, behandle dem med AL på D0, D1 og D2, bekræfte passende LF plasmakoncentrationer på dag 7 og monitorere for malaria symptomer og tilbagevendende parasitemier på D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 og D28. I beslægtede laboratorieundersøgelser vil vi bruge blodprøver taget på tidspunktet for indskrivning og gendannelse til at måle parasitternes modtagelighed over for LF og andre antimalariamidler ex vivo; undersøge genetiske og transkriptionelle determinanter for parasitrespons på AL in vivo og LF ex vivo; og forberede kryokonserverede parasitter til fremtidigt arbejde med lægemiddelvirkning og resistensmekanismer. Parasit-clearance-delstudie: Vi har for nylig opdaget en aldersafhængig acceleration af parasit-clearance-hastigheder hos maliske børn og postulerer, at det er medieret af IgG, der er specifikt for Plasmodium falciparum erytrocytmembranprotein 1 (PfEMP1), parasittens vigtigste virulensfaktor på overfladen af ​​inficerede røde blodlegemer (iRBC'er). Vi antager, at ART-eksponering inducerer den for tidlige ekspression af PfEMP1 på overfladen af ​​cirkulerende ring-iRBC'er in vivo. For at teste denne hypotese vil vi beregne parasitclearance-hastigheder i en undergruppe af forsøgspersoner med relativt høje parasitdensiteter og relatere disse hastigheder til autolog IgG's evne til at genkende ring-iRBC'er i løbet af de første 8 timers ART-eksponering in vivo. I denne samme undergruppe af patienter vil vi også undersøge, om AL inducerer parasitdvale in vivo ved at fjerne parasitter ved H0, H6, H24, H48, D3, D7 og D14 efter AL-terapi og kloning dem for at kvantificere antallet af levedygtige parasitter . Blodopsamlingsundersøgelse: Vi har fundet ud af, at seglcelleegenskaber (HbAS), som naturligt erhvervet humoral immunitet, reducerer både malariarisiko og parasittæthed i vores undersøgelsespopulation, og at denne beskyttelse er forbundet med unormal PfEMP1-visning på iRBC-overfladen. For at belyse den molekylære mekanisme af denne fænotype og undersøge, hvordan den kan synergi med naturligt erhvervede IgG-responser, vil vi undersøge, om udviklingen af ​​PfEMP1-handelsmaskineri er svækket i HbAS sammenlignet med normale homozygote hæmoglobin A (HbAA) røde blodlegemer (RBC'er) . For at teste dette vil vi oprense parasitisolater fra børn med malaria, inokulere dem i HbAA og HbAS RBC'er fra raske voksne donorer og følge deres intraerythrocytiske udvikling ved hjælp af flowcytometri og elektronmikroskopi.