Monitorování rezistence na artemether-lumefantrin u dětí s nekomplikovanou malárií Plasmodium Falciparum v Mali

Artemether-lumefantrin (AL) nahradil artesunát + amodiachin jako první linii artemisininové (ART) kombinované terapie (ACT) u nekomplikované malárie Plasmodium falciparum v Mali. Není známo, zda si paraziti vyvíjejí rezistenci vůči AL v Mali, kde studujeme, jak přirozeně získaná imunita a vlastnost srpkovitých buněk snižují riziko malárie a hustotu parazitů v naší pediatrické populaci. Studie sledování rezistence na AL: Pro sledování vznikající rezistence na AL in vivo a rezistence na lumefantrin (LF) ex vivo provedeme standardní protokol doporučený WHO pro měření míry rezistence na AL během příštích 4 let. Zapíšeme všechny děti ve věku 2–17 let s nekomplikovanou malárií falciparum a počtem parazitů mezi 2 000 až 200 000 parazity na mikrolitr, ošetříme je AL v D0, D1 a D2, potvrdíme adekvátní plazmatické koncentrace LF 7. den a budeme monitorovat malárii symptomy a opakující se parazitémie na D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 a D28. V souvisejících laboratorních studiích použijeme vzorky krve odebrané v době zařazení do studie a v době opětovného návratu k měření citlivosti parazitů na LF a další antimalarika ex vivo; zkoumat genetické a transkripční determinanty odpovědi parazita na AL in vivo a LF ex vivo; a připravit kryokonzervované parazity pro budoucí práci na mechanismech účinku léků a rezistence. Podstudie clearance parazitů: Nedávno jsme objevili na věku závislé zrychlení rychlosti clearance parazitů u malijských dětí a předpokládáme, že je zprostředkováno IgG specifickým pro Plasmodium falciparum erytrocytární membránový protein 1 (PfEMP1), hlavní faktor virulence parazita na povrchu infikovaných červené krvinky (iRBC). Předpokládáme, že expozice ART indukuje předčasnou expresi PfEMP1 na povrchu cirkulujících kruhových iRBC in vivo. Abychom tuto hypotézu otestovali, vypočítáme rychlosti clearance parazitů u podskupiny subjektů s relativně vysokou hustotou parazitů a spojíme tyto rychlosti se schopností autologního IgG rozpoznávat kruhové iRBC během prvních 8 hodin expozice ART in vivo. U této stejné podskupiny pacientů také prozkoumáme, zda AL indukuje dormanci parazitů in vivo odstraněním parazitů v H0, H6, H24, H48, D3, D7 a D14 po terapii AL a jejich klonováním, abychom kvantifikovali počet životaschopných parazitů. . Studie odběru krve: Zjistili jsme, že vlastnost srpkovitých buněk (HbAS), stejně jako přirozeně získaná humorální imunita, snižuje jak riziko malárie, tak hustotu parazitů v naší studované populaci a že tato ochrana je spojena s abnormálním zobrazením PfEMP1 na povrchu iRBC. Abychom objasnili molekulární mechanismus tohoto fenotypu a prozkoumali, jak může synergizovat s přirozeně získanými odpověďmi IgG, budeme zkoumat, zda je vývoj mechanismu obchodování PfEMP1 narušen v HbAS ve srovnání s normálními homozygotními červenými krvinkami hemoglobinu A (HbAA) (RBC) . Abychom to otestovali, vyčistíme izoláty parazitů od dětí s malárií, naočkujeme je do HbAA a HbAS RBC od zdravých dospělých dárců a budeme sledovat jejich intraerytrocytární vývoj pomocí průtokové cytometrie a elektronové mikroskopie.