Мониторинг резистентности к артеметер-люмефантрину у детей с неосложненной малярией Plasmodium falciparum в Мали

Артеметер-лумефантрин (AL) заменил артесунат + амодиахин в качестве передовой комбинированной терапии артемизинином (АРТ) (ACT) для неосложненной малярии Plasmodium falciparum в Мали. Неизвестно, развивают ли паразиты устойчивость к AL в Мали, где мы изучаем, как естественный иммунитет и признак серповидно-клеточной анемии снижают риск малярии и плотность паразитов в нашей педиатрической популяции. Исследование по мониторингу резистентности к AL: для мониторинга возникающей устойчивости к AL in vivo и устойчивости к люмефантрину (LF) ex vivo мы будем проводить стандартный, рекомендованный ВОЗ протокол для измерения показателей резистентности к AL в течение следующих 4 лет. Мы будем регистрировать всех детей в возрасте от 2 до 17 лет с неосложненной малярией falciparum и числом паразитов от 2000 до 200000 паразитов на микролитр, лечить их AL в дни D0, D1 и D2, подтверждать адекватные концентрации LF в плазме на 7-й день и проводить мониторинг малярии. симптомы и рецидивирующие паразитемии на Д0, Д1, Д2, Д3, Д7, Д14, Д21 и Д28. В соответствующих лабораторных исследованиях мы будем использовать образцы крови, взятые во время регистрации и рецидива, для измерения восприимчивости паразитов к LF и другим противомалярийным препаратам ex vivo; исследовать генетические и транскрипционные детерминанты реакции паразита на AL in vivo и LF ex vivo; и подготовить криоконсервированных паразитов для будущей работы над действием лекарств и механизмами устойчивости. Подисследование клиренса от паразитов: недавно мы обнаружили возрастное ускорение скорости клиренса от паразитов у малийских детей и постулируем, что это опосредовано IgG, специфичным к мембранному белку 1 эритроцитов Plasmodium falciparum (PfEMP1), основному фактору вирулентности паразита на поверхности инфицированных эритроциты (iRBC). Мы предполагаем, что воздействие АРТ вызывает преждевременную экспрессию PfEMP1 на поверхности циркулирующих кольцевых эритроцитов in vivo. Чтобы проверить эту гипотезу, мы рассчитаем показатели элиминации паразитов у подгруппы субъектов с относительно высокой плотностью паразитов и свяжем эти показатели со способностью аутологичных IgG распознавать кольцевые эритроциты в течение первых 8 часов воздействия АРТ in vivo. В этой же подгруппе пациентов мы также изучим, вызывает ли AL покой паразитов in vivo, удаляя паразитов на H0, H6, H24, H48, D3, D7 и D14 после терапии AL и клонируя их для количественной оценки количества жизнеспособных паразитов. . Исследование сбора крови: мы обнаружили, что признак серповидно-клеточной анемии (HbAS), как и естественный гуморальный иммунитет, снижает как риск малярии, так и плотность паразитов в нашей исследуемой популяции, и что эта защита связана с аномальным отображением PfEMP1 на поверхности iRBC. Чтобы выяснить молекулярный механизм этого фенотипа и изучить, как он может синергизировать с естественно приобретенными ответами IgG, мы исследуем, нарушается ли развитие механизма доставки PfEMP1 в HbAS по сравнению с нормальными гомозиготными гемоглобином A (HbAA) эритроцитами (эритроцитами). . Чтобы проверить это, мы будем очищать изоляты паразитов от детей, больных малярией, инокулировать их в эритроциты HbAA и HbAS от здоровых взрослых доноров и следить за их внутриэритроцитарным развитием с помощью проточной цитометрии и электронной микроскопии.