Artemether-lumefantrin resistensovervåking hos barn med ukomplisert Plasmodium Falciparum Malaria i Mali

Artemether-lumefantrine (AL) har erstattet artesunate + amodiakin som frontlinje artemisinin (ART) kombinasjonsterapi (ACT) for ukomplisert Plasmodium falciparum malaria i Mali. Det er ikke kjent om parasitter utvikler resistens mot AL i Mali, der vi studerer hvordan naturlig ervervet immunitet og sigdcelleegenskap reduserer malariarisiko og parasitttetthet i vår pediatriske studiepopulasjon. AL-resistensovervåkingsstudie: For å overvåke for ny AL-resistens in vivo og lumefantrin (LF)-resistens ex vivo, vil vi gjennomføre en standard WHO-anbefalt protokoll for å måle AL-resistensrater i løpet av de neste 4 årene. Vi vil registrere alle barn i alderen 2-17 år med ukomplisert falciparum malaria og parasittantall mellom 2 000 og 200 000 parasitter per mikroliter, behandle dem med AL på D0, D1 og D2, bekrefte tilstrekkelige LF plasmakonsentrasjoner på dag 7, og overvåke for malaria symptomer og tilbakevendende parasitter på D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 og D28. I relaterte laboratoriestudier vil vi bruke blodprøver tatt på tidspunktene for registrering og gjenopptakelse for å måle parasittfølsomhet for LF og andre antimalariamedisiner ex vivo; undersøke genetiske og transkripsjonelle determinanter for parasittrespons på AL in vivo og LF ex vivo; og forberede kryokonserverte parasitter for fremtidig arbeid med medikamentvirkning og resistensmekanismer. Parasite Clearance Substudie: Vi har nylig oppdaget en aldersavhengig akselerasjon av parasittclearance rater hos maliske barn, og postulerer at den er mediert av IgG spesifikt for Plasmodium falciparum erytrocyttmembranprotein 1 (PfEMP1), parasittens viktigste virulensfaktor på overflaten av infiserte. røde blodlegemer (iRBC). Vi antar at ART-eksponering induserer det for tidlige uttrykket av PfEMP1 på overflaten av sirkulerende ring-iRBCs in vivo. For å teste denne hypotesen vil vi beregne parasittclearance rates i en undergruppe av forsøkspersoner med relativt høy parasitttetthet, og relatere disse ratene til evnen til autolog IgG til å gjenkjenne ring-iRBCs i løpet av de første 8 timene med ART-eksponering in vivo. I denne samme undergruppen av pasienter vil vi også undersøke om AL induserer parasittdvale in vivo ved å fjerne parasitter ved H0, H6, H24, H48, D3, D7 og D14 etter AL-terapi, og klone dem for å kvantifisere antall levedyktige parasitter . Blodprøvestudie: Vi har funnet ut at sigdcelleegenskap (HbAS), som naturlig ervervet humoral immunitet, reduserer både malariarisiko og parasitttetthet i vår studiepopulasjon, og at denne beskyttelsen er assosiert med unormal PfEMP1-visning på iRBC-overflaten. For å belyse den molekylære mekanismen til denne fenotypen og utforske hvordan den kan synergisere med naturlig ervervede IgG-responser, vil vi undersøke om utviklingen av PfEMP1-handelsmaskineri er svekket i HbAS sammenlignet med normale homozygote hemoglobin A (HbAA) røde blodceller (RBC) . For å teste dette vil vi rense parasittisolater fra barn med malaria, inokulere dem i HbAA og HbAS RBC fra friske voksne donorer, og følge deres intraerytrocytiske utvikling ved hjelp av flowcytometri og elektronmikroskopi.