Artemether-Lumefantrin-Resistenzüberwachung bei Kindern mit unkomplizierter Plasmodium-Falciparum-Malaria in Mali

Artemether-Lumefantrin (AL) hat Artesunat + Amodiaquin als Artemisinin (ART)-Kombinationstherapie (ACT) an vorderster Front für die unkomplizierte Malaria Plasmodium falciparum in Mali ersetzt. Es ist nicht bekannt, ob Parasiten in Mali eine Resistenz gegen AL entwickeln, wo wir untersuchen, wie natürlich erworbene Immunität und Sichelzellmerkmale das Malariarisiko und die Parasitendichte in unserer pädiatrischen Studienpopulation verringern. Studie zur Überwachung der AL-Resistenz: Zur Überwachung auf neu auftretende AL-Resistenz in vivo und Lumefantrin (LF)-Resistenz ex vivo werden wir in den nächsten 4 Jahren ein von der WHO empfohlenes Standardprotokoll zur Messung der AL-Resistenzraten durchführen. Wir werden alle Kinder im Alter von 2-17 Jahren mit unkomplizierter Falciparum-Malaria und einer Parasitenzahl zwischen 2.000 und 200.000 Parasiten pro Mikroliter einschreiben, sie mit AL an D0, D1 und D2 behandeln, angemessene LF-Plasmakonzentrationen an Tag 7 bestätigen und auf Malaria überwachen Symptome und rezidivierende Parasitämien an D0, D1, D2, D3, D7, D14, D21 und D28. In verwandten Laborstudien werden wir Blutproben verwenden, die zum Zeitpunkt der Registrierung und Recrudeszenz entnommen wurden, um die Anfälligkeit von Parasiten für LF und andere Antimalariamedikamente ex vivo zu messen; Untersuchung genetischer und transkriptioneller Determinanten der Parasitenantwort auf AL in vivo und LF ex vivo; und bereiten Sie kryokonservierte Parasiten für zukünftige Arbeiten zu Arzneimittelwirkung und Resistenzmechanismen vor. Substudie zur Parasiten-Clearance: Wir haben kürzlich eine altersabhängige Beschleunigung der Parasiten-Clearance-Raten bei malischen Kindern entdeckt und postulieren, dass dies durch IgG vermittelt wird, das für Plasmodium falciparum Erythrozyten-Membranprotein 1 (PfEMP1), den wichtigsten Virulenzfaktor des Parasiten auf der Oberfläche von Infizierten, spezifisch ist rote Blutkörperchen (iRBCs). Wir nehmen an, dass die ART-Exposition die vorzeitige Expression von PfEMP1 auf der Oberfläche zirkulierender Ring-iRBCs in vivo induziert. Um diese Hypothese zu testen, werden wir die Parasiten-Clearance-Raten in einer Untergruppe von Probanden mit relativ hoher Parasitendichte berechnen und diese Raten mit der Fähigkeit von autologem IgG in Beziehung setzen, Ring-iRBCs über die ersten 8 Stunden der ART-Exposition in vivo zu erkennen. In derselben Untergruppe von Patienten werden wir auch untersuchen, ob AL Parasitenruhe in vivo induziert, indem wir Parasiten bei H0, H6, H24, H48, D3, D7 und D14 nach der AL-Therapie entfernen und sie klonen, um die Anzahl lebensfähiger Parasiten zu quantifizieren . Blutentnahmestudie: Wir haben herausgefunden, dass die Sichelzelleneigenschaft (HbAS) ebenso wie die natürlich erworbene humorale Immunität sowohl das Malariarisiko als auch die Parasitendichte in unserer Studienpopulation reduziert und dass dieser Schutz mit einer abnormalen PfEMP1-Anzeige auf der iRBC-Oberfläche verbunden ist. Um den molekularen Mechanismus dieses Phänotyps aufzuklären und zu untersuchen, wie er mit natürlich erworbenen IgG-Antworten synergistisch wirken kann, werden wir untersuchen, ob die Entwicklung der PfEMP1-Trafficing-Maschinerie bei HbAS im Vergleich zu normalen homozygoten Hämoglobin A (HbAA) roten Blutkörperchen (RBCs) beeinträchtigt ist. . Um dies zu testen, werden wir Parasitenisolate von Kindern mit Malaria aufreinigen, sie in HbAA- und HbAS-RBCs von gesunden erwachsenen Spendern inokulieren und ihre intraerythrozytäre Entwicklung mit Durchflusszytometrie und Elektronenmikroskopie verfolgen.