马里无并发症恶性疟原虫疟疾患儿蒿甲醚-苯芴醇耐药性监测

在马里，蒿甲醚-苯蒽醌 (AL) 已取代青蒿琥酯 + 阿莫地喹成为治疗无并发症的恶性疟原虫疟疾的一线青蒿素 (ART) 联合疗法 (ACT)。 目前尚不清楚马里的寄生虫是否对 AL 产生了耐药性，我们正在马里研究自然获得的免疫力和镰状细胞特征如何降低儿科研究人群的疟疾风险和寄生虫密度。 AL 耐药性监测研究：为了监测新出现的体内 AL 耐药性和离体苯泛群 (LF) 耐药性，我们将执行 WHO 推荐的标准方案，以在未来 4 年内测量 AL 耐药率。 我们将招募所有患有无并发症恶性疟疾且寄生虫计数在每微升 2,000 至 200,000 个寄生虫之间的 2-17 岁儿童，在 D0、D1 和 D2 对他们进行 AL 治疗，在第 7 天确认足够的 LF 血浆浓度，并监测疟疾D0、D1、D2、D3、D7、D14、D21 和 D28 的症状和复发性寄生虫血症。 在相关的实验室研究中，我们将使用在入组和复发时采集的血液样本来测量寄生虫对 LF 和其他抗疟药物的离体敏感性；研究寄生虫对体内 AL 和离体 LF 反应的遗传和转录决定因素；并为未来药物作用和耐药机制的研究准备冷冻保存的寄生虫。 寄生虫清除子研究：我们最近发现马里儿童的寄生虫清除率随年龄增长而加速，并假设它是由恶性疟原虫红细胞膜蛋白 1 (PfEMP1) 特异性 IgG 介导的，这是寄生虫在感染者表面的主要毒力因子红细胞 (iRBC)。 我们假设 ART 暴露会导致 PfEMP1 在体内循环环 iRBC 表面过早表达。 为了检验这一假设，我们将计算寄生虫密度相对较高的受试者子集中的寄生虫清除率，并将这些比率与自体 IgG 在体内 ART 暴露的前 8 小时内识别环 iRBC 的能力相关联。 在同一患者子集中，我们还将通过在 AL 治疗后去除 H0、H6、H24、H48、D3、D7 和 D14 处的寄生虫并克隆它们以量化活寄生虫的数量来探索 AL 是否在体内诱导寄生虫休眠. 采血研究：我们发现镰状细胞性状 (HbAS) 与自然获得的体液免疫一样，可降低我们研究人群的疟疾风险和寄生虫密度，并且这种保护与 iRBC 表面异常的 PfEMP1 显示有关。 为了阐明这种表型的分子机制并探索它如何与自然获得的 IgG 反应协同作用，我们将研究与正常纯合血红蛋白 A (HbAA) 红细胞 (RBC) 相比，HbAS 中 PfEMP1 运输机制的发育是否受损. 为了测试这一点，我们将从患有疟疾的儿童身上分离出寄生虫，将它们接种到健康成人供体的 HbAA 和 HbAS 红细胞中，并使用流式细胞术和电子显微镜跟踪它们的红细胞内发育。