Cicatrisation des plaies chez des volontaires sains

Contexte et justification La peau joue un rôle essentiel dans la protection où elle agit comme une barrière contre les dommages et les agents pathogènes entre les environnements externe et interne. Les plaies compromettent son rôle protecteur en perturbant la fonction et la structure normale de la peau et des tissus mous sous-jacents. En réponse à une blessure, la cicatrisation se produit afin de restaurer rapidement le défaut. Ce processus implique l'activation, entre autres, des kératinocytes, des fibroblastes, des cellules endothéliales, des macrophages et des plaquettes et se compose de plusieurs phases comprenant l'hémostase, l'inflammation, la migration et la prolifération cellulaire, ainsi que la maturation et le remodelage. Un schéma simplifié de l'évolution de la cicatrisation est illustré à la figure 2. En raison de la large implication de divers types de cellules, de la matrice extracellulaire et de nombreuses molécules réactives, chaque phase de la cicatrisation produit des changements caractéristiques dans le tissu. Une déficience dans n'importe quelle partie du processus peut entraîner un retard de cicatrisation, la formation de cicatrices anormales ou des plaies chroniques.

Pour étudier la cicatrisation des plaies chez des volontaires sains, un modèle de provocation avec des biopsies cutanées à l'emporte-pièce a déjà été décrit dans la littérature. Cependant, la caractérisation de ce modèle n'a pas été réalisée de manière exhaustive puisque l'analyse avancée des biopsies a été omise. En outre, les analyses effectuées dans des études précédentes ne décrivaient que partiellement les processus de cicatrisation, soit par des points de temps insuffisants pour la caractérisation, soit par de rares évaluations simultanées de plusieurs modalités de cicatrisation. De plus, de nouvelles méthodologies d'imagerie non invasives, notamment la thermographie, la photographie 3D, l'imagerie multispectrale, permettent un profilage plus complet de la morphologie de la plaie.

L'objectif global de cette étude est de développer un modèle standardisé pour induire temporairement et localement un traumatisme cutané afin d'étudier la cicatrisation des plaies et de surveiller la fermeture des plaies. Ce modèle clinique permettra une application future en tant qu'études de preuve de pharmacologie et de preuve de concept ainsi que le profilage de médicaments dans les premiers programmes de développement de médicaments. Plus précisément, l'objectif de l'essai est d'explorer et de caractériser l'induction d'un traumatisme cutané bien défini et le processus naturel de cicatrisation au cours des différentes phases à l'aide d'une batterie d'évaluations dermatologiques après biopsies cutanées à l'emporte-pièce chez des volontaires sains. De plus, la sécurité et la tolérabilité seront évaluées.

La caractérisation et la surveillance des effets de la cicatrisation des plaies à la suite de biopsies cutanées à l'emporte-pièce seront effectuées au moyen de paramètres biophysiques, biochimiques, d'imagerie, cliniques et des résultats rapportés par le sujet.

Objectif(s) Objectif principal

• Caractériser et surveiller la cicatrisation des plaies après un traumatisme cutané induit standardisé Objectifs secondaires
• Évaluer l'innocuité et la tolérabilité des traumatismes cutanés induits par la biopsie Conception Il s'agit d'une étude observationnelle, monocentrique et à un seul bras. Traitements Les sites de biopsie seront traités en intention de cicatrisation secondaire avec un pansement de gaze anti-adhésif suivi d'un absence de traitement après 48h.

Médicament expérimental Sans objet Médicament de comparaison Aucun médicament de comparaison ne sera utilisé dans cette étude. Périodes d'étude La durée totale de l'étude sera d'environ 14 semaines : 4 semaines de dépistage et 10 semaines d'observation. Les sujets visiteront le CHDR 14 fois.

Sujets / Groupes Un total de 18 volontaires sains est prévu d'être recruté. L'étude impliquera 1 cohorte avec un temps de collecte de biopsie répété randomisé. Trois biopsies cutanées (3 mm) du bas du dos seront prélevées sur chaque volontaire au jour 0, avec une distance d'environ 3 à 5 cm entre les deux. Toutes les lésions de biopsie seront traitées avec un pansement de gaze (Jelonet®, gaze de paraffine + Tegaderm®) pendant 48h après quoi la gaze sera retirée. Par la suite, les lésions de biopsie resteront non traitées. Un échantillon de biopsie prélevé au jour 0 servira de mesure de base pour les échantillons répétés concernant l'histologie, l'immunohistochimie et le séquençage de l'ARN (ARN-seq) ou les évaluations de la réaction en chaîne par polymérase de transcription inverse en temps réel (qRT-PCR).

Des biopsies répétées du même emplacement qu'au jour 0 seront prélevées au jour 7, 14 ou 21 (biopsie lésion et jour randomisé) et au jour 28, 42 ou 56 (biopsie lésion et jour randomisé) pour tous les sujets. La biopsie d'observation (biopsie de lésion randomisée) servira de biopsie primaire et suivie pour toutes les mesures. Toutes les lésions de biopsie répétées seront également traitées avec un pansement de gaze (Jelonet®, gaze de paraffine + Tegaderm®) pendant 48 h, après quoi la gaze est retirée et l'observation commence.

Cohorte : 1 Période d'observation (jour 2 - jour 70) : 3 biopsies réalisées au jour 0

• 1 biopsie répétée prise au jour 7, 14 ou 21 (randomisée)
• 1 biopsie répétée prise au jour 28, 42 ou 56 (randomisée)
• 1 biopsie cible (primaire) pour observation sans réexérèse Nombre de sujets : 18

Critère d'intégration

Les sujets éligibles doivent répondre à tous les critères d'inclusion suivants lors de la sélection :

1. Sujets sains, âgés de 18 à 30 ans (inclus). L'état de santé est vérifié par l'absence de preuve de toute maladie chronique active ou non contrôlée cliniquement significative à la suite d'antécédents médicaux détaillés, d'un examen physique complet comprenant les signes vitaux, les prélèvements sanguins d'hématologie, de chimie et de virologie, les analyses d'urine, les tests de dépistage des drogues et de la cotinine dans l'urine, et les tests d'alcoolémie. En cas de résultats incertains ou douteux, les tests effectués lors du dépistage peuvent être répétés avant la randomisation pour confirmer l'éligibilité ou jugés cliniquement non pertinents pour les sujets sains.
2. Indice de masse corporelle (IMC) compris entre 18 et 30 kg/m2 inclus
3. Fitzpatrick Type de peau I-II (type caucasien).
4. Bas du dos éligible pour effectuer des biopsies (pas de pilosité excessive, pas de trouble cutané local)
5. Disposé à donner un consentement éclairé écrit et disposé et capable de se conformer au protocole d'étude.

Critère d'exclusion

Les sujets éligibles ne doivent répondre à aucun des critères d'exclusion suivants lors de la sélection :

1. Antécédents de formation de cicatrices pathologiques (chéloïdes, cicatrices hypertrophiques)
2. Toute forme de modification corporelle du bas du dos empêchant le prélèvement de biopsie de peau non altérée (par ex. tatouages, piercings, implants)
3. Toute maladie associée à une déficience du système immunitaire, y compris les maladies auto-immunes, le VIH et les patients transplantés.
4. Nécessité de médicaments immunosuppresseurs ou immunomodulateurs, y compris les glucocorticoïdes, les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) et les médicaments chimiothérapeutiques dans les 30 jours précédant l'inscription ou dont l'utilisation est prévue au cours de l'étude.
5. Avoir une affection cutanée pertinente actuelle et/ou récurrente sur le plan pathologique, cliniquement significative.
6. Utilisation de médicaments topiques (sur ordonnance ou en vente libre (OTC)) dans les 30 jours suivant le début de l'étude. zone de traitement local.
7. Enceinte, test de grossesse positif, intention de tomber enceinte ou allaitement.
8. Fumeur actuel et/ou utilisateur régulier d'autres produits contenant de la nicotine (par exemple, patchs).
9. Consommation moyenne de plus de 14 unités d'alcool par semaine
10. Bronzage dû à un bain de soleil, à une exposition excessive au soleil ou à une cabine de bronzage dans les 3 semaines suivant l'inscription ou prévu de le faire au cours de l'étude
11. Participation à une étude expérimentale sur un médicament ou un dispositif dans les 3 mois précédant le dépistage ou plus de 4 fois par an.
12. Perte ou don de sang supérieur à 500 ml dans les trois mois précédant le dépistage.
13. Toute condition (médicale) qui, de l'avis de l'investigateur, compromettrait potentiellement la sécurité ou la conformité du sujet ou pourrait empêcher les sujets de mener à bien l'essai clinique.

Médicaments concomitants Aucun médicament sur ordonnance ou médicament en vente libre (à l'exclusion des multivitamines) ne sera autorisé dans les 21 jours précédant le début de l'étude, ou moins de 5 demi-vies (selon la plus longue), et pendant le cours de l'étude. Les exceptions sont le paracétamol (jusqu'à 4 g/jour) en cas de douleur locale. L'utilisation d'analgésiques sera déterminée par l'investigateur individuellement. D'autres exceptions ne seront faites que si la justification est discutée et clairement documentée.

Points finaux

• Biomarqueurs de biopsie :

  • Histologie avec coloration à l'hématoxyline et à l'éosine (HE)
  • Immunohistochimie avec des biomarqueurs liés à la cicatrisation des plaies (par ex. CD31, collagène I, collagène III, aSMA, fibronectine)
  • RNA-seq ou qRT-PCR pour les biomarqueurs liés à la cicatrisation (par ex. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Biomarqueurs cutanés locaux pour les biomarqueurs liés à la cicatrisation des plaies (par ex. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) par patch d'analyse transdermique (TAP)
• Imagerie clinique (par ex. photographie 2D et 3D, thermographie, imagerie par contraste de speckle laser (LSCI), perte d'eau transépidermique (TEWL), colorimétrie)
• Évaluation clinique (échelle de notation de l'érythème, échelle d'évaluation des plaies rouge-jaune-noir (RYB), échelle d'évaluation des cicatrices du patient et de l'observateur (POSAS))
• Microbiome cutané (lésions saines et biopsie) Critères de tolérance / sécurité
• Événements indésirables (EI)
• Tolérance locale (échelle de notation de l'érythème, échelle d'évaluation des plaies RYB, POSAS, prurit et douleur NRS) Toutes les mesures pharmacodynamiques et de sécurité mentionnées ci-dessus seront effectuées plusieurs fois au cours de l'étude selon le calendrier de visite et d'évaluation.

Justification de la taille de l'échantillon Une taille de cohorte totale de 18 volontaires sains sera étudiée. Ceci est justifié puisque l'objectif principal est d'explorer et de surveiller le modèle de cicatrisation. Aucun calcul formel de puissance n'a été effectué étant donné le caractère exploratoire de l'étude.

Méthodologie statistique Des listes de données et des moyennes seront présentées pour la pharmacodynamie et les mesures de sécurité.

Compte tenu du caractère exploratoire de l'étude, les paramètres pharmacodynamiques seront principalement analysés à l'aide de statistiques descriptives. Tous les paramètres pharmacodynamiques seront résumés (moyenne et écart type de la moyenne, médiane, valeurs minimales et maximales) par temps, et seront également présentés graphiquement sous forme de moyenne dans le temps, avec l'écart type sous forme de barres d'erreur. Les résultats nominaux, les résultats transformés en log et les changements par rapport aux résultats de référence seront utilisés dans tous les résumés de données. Tous les paramètres pharmacodynamiques catégoriels seront résumés par fréquences.