Cicatrização de Feridas em Voluntários Saudáveis

Antecedentes e Justificativa A pele desempenha um papel crítico na proteção, onde atua como uma barreira contra danos e patógenos entre os ambientes externo e interno. As feridas comprometem seu papel protetor ao interromper a função e a estrutura normal da pele e dos tecidos moles subjacentes. Como resposta à lesão, ocorre a cicatrização da ferida, a fim de restaurar rapidamente o defeito. Este processo envolve a ativação de, entre outros, queratinócitos, fibroblastos, células endoteliais, macrófagos e plaquetas e consiste em múltiplas fases, incluindo hemostasia, inflamação, migração e proliferação celular, maturação e remodelação. Um esquema simplificado do curso da cicatrização de feridas é representado na Figura 2. Devido ao amplo envolvimento de vários tipos de células, matriz extracelular e muitas moléculas reativas, cada fase da cicatrização de feridas produz alterações características dentro do tecido. Uma deficiência em qualquer parte do processo pode levar a cicatrização retardada, formação anormal de cicatrizes ou feridas crônicas.

Para estudar a cicatrização de feridas em voluntários saudáveis, um modelo de desafio com biópsias de punção de pele foi descrito na literatura anteriormente. No entanto, a caracterização desse modelo não foi realizada de forma abrangente, uma vez que análises avançadas de biópsias foram omitidas. Além disso, as análises realizadas em estudos anteriores descreveram apenas parcialmente os processos de cicatrização de feridas, seja por pontos de tempo insuficientes para caracterização ou escassas avaliações simultâneas de múltiplas modalidades de cicatrização de feridas. Além disso, novas metodologias de imagem não invasivas, incluindo termografia, fotografia 3D e imagem multiespectral, permitem um perfil mais abrangente da morfologia da ferida.

O objetivo geral deste estudo é desenvolver um modelo padronizado para induzir temporariamente e localmente um trauma na pele para investigar a cicatrização de feridas e monitorar o fechamento da ferida. Este modelo clínico permitirá a aplicação futura como prova de farmacologia e estudos de prova de conceito, bem como perfis de drogas em programas iniciais de desenvolvimento de drogas. Mais especificamente, o objetivo do estudo é explorar e caracterizar a indução de trauma cutâneo bem definido e o processo natural de cicatrização de feridas ao longo das diferentes fases, usando uma bateria de avaliações dermatológicas após biópsias de punção cutânea em voluntários saudáveis. Além disso, a segurança e a tolerabilidade serão avaliadas.

A caracterização e o monitoramento dos efeitos de cicatrização de feridas após biópsias de punção de pele serão realizados por meio de parâmetros biofísicos, bioquímicos, de imagem, clínicos e resultados relatados pelo indivíduo.

Objetivo(s) Objetivo Primário

• Caracterizar e monitorar a cicatrização de feridas após um trauma cutâneo induzido padronizado Objetivos secundários
• Para avaliar a segurança e a tolerabilidade do trauma cutâneo induzido por biópsia Desenho Este é um estudo observacional, de centro único e braço único. Tratamentos Os locais de biópsia serão tratados por intenção de cicatrização secundária com curativo de gaze antiaderente seguido de nenhum tratamento após 48h.

Medicamento experimental Não aplicável Medicamento comparativo Nenhum medicamento comparativo será usado neste estudo. Períodos do estudo A duração total do estudo será de aproximadamente 14 semanas: 4 semanas para triagem e 10 semanas de observação. Os indivíduos visitarão o CHDR 14 vezes.

Indivíduos / Grupos Um total de 18 voluntários saudáveis ​​está planejado para ser inscrito. O estudo envolverá 1 coorte com um tempo de coleta de biópsia repetido randomizado. Três biópsias de punção de pele (3 mm) da parte inferior das costas serão feitas de cada voluntário no dia 0, com uma distância de aproximadamente 3-5 cm entre elas. Todas as lesões de biópsia serão tratadas com curativo de gaze (Jelonet®, gaze parafina + Tegaderm®) por 48h após o qual a gaze é retirada. Doravante, as lesões da biópsia permanecerão sem tratamento. Uma amostra de biópsia coletada no dia 0 servirá como uma medida de linha de base para as amostras repetidas em relação às avaliações de histologia, imuno-histoquímica e sequenciamento de RNA (RNA-seq) ou reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa em tempo real (qRT-PCR).

Biópsias repetidas do mesmo local do dia 0 serão feitas no dia 7, 14 ou 21 (lesão da biópsia e dia aleatório) e dias 28, 42 ou 56 (lesão da biópsia e dia aleatório) para todos os indivíduos. A biópsia de observação (lesão de biópsia randomizada) servirá como biópsia primária e será acompanhada para todas as medições. Todas as lesões de biópsia repetida também serão tratadas com curativo de gaze (Jelonet®, gaze de parafina + Tegaderm®) por 48h, após o que a gaze é removida e a observação começa.

Coorte: 1 Período de observação (dia 2 - dia 70): 3 biópsias realizadas no dia 0

• 1 biópsia repetida realizada no dia 7, 14 ou 21 (randomizado)
• 1 biópsia repetida realizada no dia 28, 42 ou 56 (randomizado)
• 1 biópsia alvo (primária) para observação sem reexcisão Número de indivíduos: 18

Critério de inclusão

Os indivíduos elegíveis devem atender a todos os seguintes critérios de inclusão na triagem:

1. Indivíduos saudáveis, de 18 a 30 anos de idade (inclusive). O estado de saúde é verificado pela ausência de evidência de qualquer doença crônica ativa ou não controlada clinicamente significativa após um histórico médico detalhado, um exame físico completo incluindo sinais vitais, coleta de sangue para hematologia, química e virologia, exame de urina, teste de drogas e cotinina na urina, e teste de alcoolemia. No caso de resultados incertos ou questionáveis, os testes realizados durante a triagem podem ser repetidos antes da randomização para confirmar a elegibilidade ou considerados clinicamente irrelevantes para indivíduos saudáveis.
2. Índice de massa corporal (IMC) entre 18 e 30 kg/m2, inclusive
3. Fitzpatrick Tipo de pele I-II (tipo caucasiano).
4. Parte inferior das costas elegível para realizar biópsias (sem crescimento excessivo de pelos, sem distúrbio local da pele)
5. Disposto a dar consentimento informado por escrito e disposto e capaz de cumprir o protocolo do estudo.

Critério de exclusão

Os indivíduos elegíveis não devem atender a nenhum dos seguintes critérios de exclusão na triagem:

1. História de formação de cicatriz patológica (queloide, cicatrizes hipertróficas)
2. Qualquer forma de modificação corporal da região lombar que dificulte a coleta de biópsia de pele inalterada (por exemplo, tatuagens, piercings, implantes)
3. Qualquer doença associada ao comprometimento do sistema imunológico, incluindo doenças autoimunes, HIV e pacientes transplantados.
4. Exigência de medicação imunossupressora ou imunomoduladora, incluindo glicocorticoides, anti-inflamatórios não esteróides (AINEs) e medicamentos quimioterápicos dentro de 30 dias antes da inscrição ou planejados para uso durante o curso do estudo.
5. Tem qualquer condição de pele atual e/ou recorrente patologicamente, clinicamente significativa.
6. Uso de medicação tópica (prescrição ou venda livre (OTC)) dentro de 30 dias do início do estudo.in área de tratamento local.
7. Grávida, teste de gravidez positivo, com intenção de engravidar ou amamentando.
8. Fumante atual e/ou usuário regular de outros produtos contendo nicotina (por exemplo, adesivos).
9. Consumo médio de mais de 14 unidades de álcool por semana
10. Bronzeamento devido a banhos de sol, exposição excessiva ao sol ou cabine de bronzeamento dentro de 3 semanas após a inscrição ou planejado para fazê-lo durante o estudo
11. Participação em um estudo de medicamento ou dispositivo experimental dentro de 3 meses antes da triagem ou mais de 4 vezes por ano.
12. Perda ou doação de sangue acima de 500 mL nos três meses anteriores à triagem.
13. Qualquer condição (médica) que possa, na opinião do investigador, comprometer potencialmente a segurança ou a adesão do sujeito ou que possa impedir a conclusão bem-sucedida do ensaio clínico pelos sujeitos.

Medicamentos concomitantes Nenhum medicamento prescrito ou OTC (excluindo multivitaminas) será permitido dentro de 21 dias antes do início do estudo, ou menos de 5 meias-vidas (o que for mais longo) e durante o estudo. As exceções são o paracetamol (até 4 g/dia) em caso de dor local. O uso de medicação para dor será determinado pelo investigador individualmente. Outras exceções só serão feitas se a justificativa for discutida e claramente documentada.

Terminais

• Biomarcadores de biópsia:

  • Histologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE)
  • Imuno-histoquímica com biomarcadores relacionados à cicatrização de feridas (por exemplo, CD31, colágeno I, colágeno III, aSMA, fibronectina)
  • RNA-seq ou qRT-PCR para biomarcadores relacionados à cicatrização de feridas (por exemplo, VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Biomarcadores cutâneos locais para biomarcadores relacionados à cicatrização de feridas (por exemplo, VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) por adesivo de análise transdérmica (TAP)
• Imagiologia clínica (por ex. Fotografia 2D e 3D, termografia, imagens de contraste de manchas a laser (LSCI), perda de água transepidérmica (TEWL), colorimetria)
• Avaliação clínica (escala de graduação de eritema, escala de avaliação de feridas Vermelho-Amarelo-Preto (RYB), Escala de Avaliação de Cicatriz do Paciente e do Observador (POSAS))
• Microbioma da pele (lesões saudáveis ​​e de biópsia) Tolerabilidade/endpoints de segurança
• Eventos adversos (EAs)
• Tolerância local (escala de graduação de eritema, escala de avaliação de feridas RYB, POSAS, NRS prurido e dor) Todas as medições farmacodinâmicas e de segurança mencionadas acima serão realizadas várias vezes durante o estudo de acordo com o cronograma de visita e avaliação.

Justificativa do tamanho da amostra Será investigado um tamanho total de coorte de 18 voluntários saudáveis. Isso se justifica uma vez que o objetivo principal é explorar e monitorar o modelo de cicatrização de feridas. Nenhum cálculo de poder formal foi realizado devido ao caráter exploratório do estudo.

Metodologia estatística Listagens de dados e médias serão apresentadas para farmacodinâmica e medidas de segurança.

Dado o caráter exploratório do estudo, os desfechos farmacodinâmicos serão analisados ​​principalmente por meio de estatística descritiva. Todos os endpoints farmacodinâmicos serão resumidos (média e desvio padrão da média, mediana, valores mínimo e máximo) por tempo e também serão apresentados graficamente como média ao longo do tempo, com desvio padrão como barras de erro. Tanto os resultados nominais quanto os resultados transformados em log e a alteração dos resultados da linha de base serão utilizados em todos os resumos de dados. Todos os endpoints farmacodinâmicos categóricos serão resumidos por frequências.