Wondgenezing bij gezonde vrijwilligers

Achtergrond en grondgedachte De huid speelt een cruciale rol bij de bescherming, waar ze fungeert als een barrière tegen schade en ziekteverwekkers tussen de externe en interne omgeving. Wonden tasten de beschermende rol aan door de functie en de normale structuur van de huid en het onderliggende zachte weefsel te verstoren. Als reactie op letsel vindt wondgenezing plaats om het defect snel te herstellen. Dit proces omvat de activering van onder andere keratinocyten, fibroblasten, endotheelcellen, macrofagen en bloedplaatjes en bestaat uit meerdere fasen, waaronder hemostase, ontsteking, migratie en cellulaire proliferatie, en rijping en hermodellering. Een vereenvoudigd schema van het verloop van wondgenezing is weergegeven in figuur 2. Vanwege de brede betrokkenheid van verschillende celtypen, extracellulaire matrix en vele reactieve moleculen veroorzaakt elke fase in wondgenezing karakteristieke veranderingen in het weefsel. Een tekort aan een onderdeel van het proces kan leiden tot vertraagde wondgenezing, abnormale littekenvorming of chronische wonden.

Voor het bestuderen van wondgenezing bij gezonde vrijwilligers is eerder in de literatuur een challenge-model met skin punch-biopten beschreven. De karakterisering van dit model werd echter niet alomvattend uitgevoerd, aangezien geavanceerde analyse van biopsieën werd weggelaten. Bovendien beschreven analyses die in eerdere studies werden uitgevoerd slechts gedeeltelijk wondgenezingsprocessen, hetzij door onvoldoende tijdspunten voor karakterisering, hetzij door schaarse gelijktijdige evaluaties van meerdere wondgenezingsmodaliteiten. Bovendien maken nieuwe niet-invasieve beeldvormingsmethoden, waaronder thermografie, 3D-fotografie en multispectrale beeldvorming, een uitgebreidere profilering van de wondmorfologie mogelijk.

Het algemene doel van deze studie is het ontwikkelen van een gestandaardiseerd model om tijdelijk en plaatselijk een huidtrauma op te wekken om wondgenezing te onderzoeken en wondsluiting te monitoren. Dit klinische model zal toekomstige toepassing mogelijk maken als proof-of-pharmacology en proof-of-concept-studies, evenals geneesmiddelprofilering in vroege ontwikkelingsprogramma's voor geneesmiddelen. Meer specifiek is het doel van het onderzoek om de inductie van goed gedefinieerd huidtrauma en het natuurlijke wondgenezingsproces in de loop van de verschillende fasen te onderzoeken en te karakteriseren met behulp van een reeks dermatologische beoordelingen na huidponsbiopten bij gezonde vrijwilligers. Verder zullen veiligheid en verdraagbaarheid worden beoordeeld.

Karakterisering en monitoring van wondgenezingseffecten na skin punch biopsies zal worden uitgevoerd door middel van biofysische, biochemische, beeldvorming, klinische parameters en door de patiënt gerapporteerde resultaten.

Doelstelling(en) Primaire doelstelling

• Karakteriseren en bewaken van wondgenezing na een gestandaardiseerd, geïnduceerd huidtrauma. Secundaire doelstellingen
• Om de veiligheid en verdraagbaarheid van door biopsie geïnduceerd huidtrauma te evalueren. Behandelingen Biopsieplaatsen worden behandeld met secundaire genezingsintentie met een niet-klevend gaasverband, gevolgd door geen behandeling na 48 uur.

Onderzoeksgeneesmiddel Niet van toepassing Vergelijkend geneesmiddel Er zal in dit onderzoek geen vergelijkend geneesmiddel worden gebruikt. Onderzoeksperioden De totale duur van het onderzoek zal ongeveer 14 weken zijn: 4 weken voor screening en 10 weken observatie. Proefpersonen zullen CHDR 14 keer bezoeken.

Proefpersonen/groepen Het is de bedoeling dat er in totaal 18 gezonde vrijwilligers worden ingeschreven. De studie omvat 1 cohort met een gerandomiseerde herhaalde biopsieverzameltijd. Bij elke vrijwilliger worden op dag 0 drie skin punch-biopten (3 mm) van de onderrug genomen, met een tussenruimte van ongeveer 3-5 cm. Alle biopsielaesies worden gedurende 48 uur behandeld met een gaasverband (Jelonet®, paraffinegaas + Tegaderm®), waarna het gaas wordt verwijderd. Hierna blijven de biopsie laesies onbehandeld. Eén biopsiemonster genomen op dag 0 zal dienen als basismeting voor de herhaalde monsters met betrekking tot de beoordelingen van histologie, immunohistochemie en RNA-sequencing (RNA-seq) of real-time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR).

Herhaalde biopsieën van dezelfde locatie als op dag 0 zullen worden genomen op dag 7, 14 of 21 (biopsielaesie en gerandomiseerde dag), en dag 28, 42 of 56 (biopsielaesie en gerandomiseerde dag) voor alle proefpersonen. De observatiebiopsie (gerandomiseerde biopsie laesie) zal dienen als primaire biopsie en gevolgd worden voor alle metingen. Alle herhaalde biopsielaesies zullen ook gedurende 48 uur worden behandeld met een gaasverband (Jelonet®, paraffinegaas + Tegaderm®), waarna het gaas wordt verwijderd en de observatie begint.

Cohort: 1 Observatieperiode (dag 2 - dag 70): 3 biopten genomen op dag 0

• 1 herhaalde biopsie genomen op dag 7, 14 of 21 (gerandomiseerd)
• 1 herhaalde biopsie genomen op dag 28, 42 of 56 (gerandomiseerd)
• 1 target (primaire) biopsie voor observatie zonder re-excisie Aantal proefpersonen: 18

Inclusiecriteria

In aanmerking komende proefpersonen moeten bij de screening aan alle volgende inclusiecriteria voldoen:

1. Gezonde proefpersonen, 18 tot 30 jaar (inclusief). De gezondheidsstatus wordt geverifieerd door afwezigheid van bewijs van enige klinisch significante actieve of ongecontroleerde chronische ziekte na een gedetailleerde medische geschiedenis, een volledig lichamelijk onderzoek inclusief vitale functies, bloedafname van hematologie, chemie en virologie, urineonderzoek, urinegeneesmiddel- en cotininetesten, en alcohol ademtesten. In het geval van onzekere of twijfelachtige resultaten, kunnen tests die tijdens de screening zijn uitgevoerd, worden herhaald voordat ze worden gerandomiseerd om te bevestigen of ze in aanmerking komen of als klinisch irrelevant worden beoordeeld voor gezonde proefpersonen.
2. Body mass index (BMI) tussen 18 en 30 kg/m2, inclusief
3. Fitzpatrick Huidtype I-II (Kaukasisch type).
4. Komt in aanmerking voor biopten van de onderrug (geen overmatige haargroei, geen plaatselijke huidaandoening)
5. Bereid om schriftelijke geïnformeerde toestemming te geven en bereid en in staat om te voldoen aan het onderzoeksprotocol.

Uitsluitingscriteria

In aanmerking komende proefpersonen mogen bij de screening aan geen van de volgende uitsluitingscriteria voldoen:

1. Geschiedenis van pathologische littekenvorming (keloïde, hypertrofische littekens)
2. Elke vorm van lichaamsaanpassing van de onderrug die het afnemen van een biopsie van een ongewijzigde huid belemmert (bijv. tatoeages, piercings, implantaten)
3. Elke ziekte die verband houdt met een stoornis van het immuunsysteem, inclusief auto-immuunziekten, HIV en transplantatiepatiënten.
4. Vereiste van immunosuppressieve of immunomodulerende medicatie, waaronder glucocorticoïden, niet-steroïde anti-inflammatoire geneesmiddelen (NSAID's) en chemotherapeutische geneesmiddelen binnen 30 dagen voorafgaand aan inschrijving of gepland voor gebruik in de loop van het onderzoek.
5. Een actuele en/of terugkerende pathologisch, klinisch relevante huidaandoening hebben.
6. Gebruik van topische medicatie (op recept of vrij verkrijgbaar (OTC)) binnen 30 dagen na aanvang van de studie.in lokaal behandelgebied.
7. Zwanger, een positieve zwangerschapstest, van plan zwanger te worden of borstvoeding te geven.
8. Huidige roker en/of regelmatige gebruiker van andere nicotinebevattende producten (bijv. pleisters).
9. Gemiddeld verbruik van meer dan 14 eenheden alcohol per week
10. Bruinen als gevolg van zonnebaden, overmatige blootstelling aan de zon of een zonnebank binnen 3 weken na inschrijving of gepland in de loop van de studie
11. Deelname aan een onderzoek naar geneesmiddelen of hulpmiddelen binnen 3 maanden voorafgaand aan de screening of meer dan 4 keer per jaar.
12. Verlies of donatie van meer dan 500 ml bloed binnen drie maanden voorafgaand aan de screening.
13. Elke (medische) aandoening die, naar de mening van de onderzoeker, de veiligheid of therapietrouw van de proefpersoon in gevaar zou kunnen brengen of die de succesvolle afronding van de klinische proef door de proefpersoon zou kunnen verhinderen.

Gelijktijdige medicatie Geen receptplichtige medicatie of OTC-medicatie (met uitzondering van multivitaminen) is toegestaan ​​binnen 21 dagen voorafgaand aan de start van het onderzoek, of minder dan 5 halfwaardetijden (welke van de twee het langst is) en tijdens het verloop van het onderzoek. Uitzonderingen zijn paracetamol (tot 4 g/dag) bij lokale pijn. Het gebruik van pijnmedicatie wordt door de onderzoeker individueel bepaald. Andere uitzonderingen worden alleen gemaakt als de grondgedachte wordt besproken en duidelijk wordt gedocumenteerd.

Eindpunten

• Biopsie biomarkers:

  • Histologie met kleuring met hematoxyline en eosine (HE).
  • Immunohistochemie met aan wondgenezing gerelateerde biomarkers (bijv. CD31, collageen I, collageen III, aSMA, fibronectine)
  • RNA-seq of qRT-PCR voor wondgenezing gerelateerde biomarkers (bijv. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Lokale huidbiomarkers voor wondgenezing gerelateerde biomarkers (bijv. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) door transdermale analysepleister (TAP)
• Klinische beeldvorming (bijv. 2D- en 3D-fotografie, thermografie, laserspikkelcontrastbeeldvorming (LSCI), transepidermaal waterverlies (TEWL), colorimetrie)
• Klinische evaluatie (beoordelingsschaal voor erytheem, rood-geel-zwart (RYB) wondbeoordelingsschaal, de Patient and Observer Scar Assessment Scale (POSAS))
• Huidmicrobioom (gezonde laesies en biopsielaesies) Eindpunten verdraagbaarheid/veiligheid
• Bijwerkingen (AE's)
• Lokale tolerantie (erytheem beoordelingsschaal, RYB wondbeoordelingsschaal, POSAS, NRS pruritus en pijn) Alle bovengenoemde farmacodynamische en veiligheidsmetingen zullen tijdens het onderzoek meerdere keren worden uitgevoerd volgens het bezoek- en beoordelingsschema.

Steekproefomvang Motivering Een totale cohortgrootte van 18 gezonde vrijwilligers zal worden onderzocht. Dit is gerechtvaardigd aangezien het primaire doel is om het wondgenezingsmodel te verkennen en te monitoren. Er is geen formele powerberekening uitgevoerd gezien het verkennende karakter van het onderzoek.

Statistische methodologie Er zullen gegevenslijsten en gemiddelden worden gepresenteerd voor farmacodynamiek en veiligheidsmaatregelen.

Gezien het exploratieve karakter van de studie zullen farmacodynamische eindpunten voornamelijk geanalyseerd worden met behulp van beschrijvende statistiek. Alle farmacodynamische eindpunten worden samengevat (gemiddelde en standaarddeviatie van de gemiddelde, mediaan, minimale en maximale waarden) in de tijd, en worden ook grafisch gepresenteerd als gemiddelde over de tijd, met standaarddeviatie als foutbalken. Zowel nominale resultaten als log-getransformeerde resultaten en verandering ten opzichte van basislijnresultaten zullen in alle gegevenssamenvattingen worden gebruikt. Alle categorische farmacodynamische eindpunten zullen worden samengevat in frequenties.