Заживление ран у здоровых добровольцев

Предыстория и обоснование Кожа играет важнейшую роль в защите, выступая в качестве барьера от повреждений и патогенов между внешней и внутренней средой. Раны нарушают его защитную функцию, нарушая функцию и нормальную структуру кожи и лежащих под ней мягких тканей. В ответ на травму происходит заживление раны с целью быстрого восстановления дефекта. Этот процесс включает активацию, среди прочего, кератиноцитов, фибробластов, эндотелиальных клеток, макрофагов и тромбоцитов и состоит из нескольких фаз, включая гемостаз, воспаление, миграцию и клеточную пролиферацию, а также созревание и ремоделирование. Упрощенная схема процесса заживления ран представлена ​​на рисунке 2. Из-за широкого вовлечения различных типов клеток, внеклеточного матрикса и множества реактивных молекул каждая фаза заживления ран вызывает характерные изменения в ткани. Дефицит в любой части процесса может привести к замедленному заживлению ран, аномальному образованию рубцов или хроническим ранам.

Для изучения заживления ран у здоровых добровольцев ранее в литературе была описана модель провокации с биопсией кожных проб. Однако характеристика этой модели не была выполнена всесторонне, поскольку расширенный анализ биопсий не проводился. Кроме того, анализы, проведенные в предыдущих исследованиях, лишь частично описывали процессы заживления ран либо из-за недостаточного количества моментов времени для характеристики, либо из-за недостаточной одновременной оценки нескольких способов заживления ран. Кроме того, новые неинвазивные методы визуализации, включая термографию, 3D-фотографию, мультиспектральную визуализацию, позволяют получить более полное профилирование морфологии раны.

Общая цель этого исследования состоит в том, чтобы разработать стандартизированную модель для временного и локального индуцирования кожной травмы для исследования заживления раны и мониторинга закрытия раны. Эта клиническая модель позволит в будущем применять ее для проверки фармакологии и проверки концепции, а также для профилирования лекарств в программах ранней разработки лекарств. В частности, цель испытания состоит в том, чтобы изучить и охарактеризовать индукцию четко определенной травмы кожи и естественный процесс заживления ран в течение различных фаз с использованием набора дерматологических оценок после биопсии кожи у здоровых добровольцев. Кроме того, будут оцениваться безопасность и переносимость.

Характеристика и мониторинг эффектов заживления ран после биопсии кожных проб будут выполняться с помощью биофизических, биохимических, визуализационных, клинических параметров и исходов, о которых сообщают субъекты.

Цель(и) Основная цель

• Охарактеризовать и контролировать заживление ран после стандартизированной индуцированной травмы кожи Второстепенные цели
• Оценка безопасности и переносимости травм кожи, вызванных биопсией. Дизайн Это обсервационное, одноцентровое исследование с одной группой. Лечение Места биопсии будут обработаны вторичным заживлением с антипригарной марлевой повязкой с последующим прекращением лечения через 48 часов.

Исследуемый препарат Не применимо Сравнительный препарат В этом исследовании не будет использоваться сравнительный препарат. Периоды исследования Общая продолжительность исследования составит приблизительно 14 недель: 4 недели для скрининга и 10 недель для наблюдения. Испытуемые посетят CHDR 14 раз.

Испытуемые/группы Всего планируется набрать 18 здоровых добровольцев. В исследовании будет задействована 1 когорта с рандомизированным повторным забором биопсии. Три биопсии кожи (3 мм) нижней части спины будут взяты у каждого добровольца в день 0 с расстоянием между ними примерно 3-5 см. Все очаги биопсии обрабатывают марлевой повязкой (Jelonet®, парафиновая марля + Tegaderm®) на 48 часов, после чего марлевую повязку удаляют. После этого очаги биопсии останутся необработанными. Один образец биопсии, взятый в день 0, будет служить базовым измерением для повторных образцов в отношении оценок гистологии, иммуногистохимии и секвенирования РНК (РНК-секвенирование) или полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (qRT-PCR).

Повторные биопсии того же места, что и в день 0, будут взяты на 7, 14 или 21 день (рандомизированные биопсия и день) и на 28, 42 или 56 день (биопсия рандомизированы и день) для всех субъектов. Наблюдательная биопсия (рандомизированная биопсия) будет служить в качестве первичной биопсии и сопровождаться всеми измерениями. Все очаги повторной биопсии также обрабатывают марлевой повязкой (Jelonet®, парафиновая марля + Tegaderm®) на 48 часов, после чего марлю удаляют и начинают наблюдение.

Когорта: 1 Период наблюдения (день 2 - день 70): 3 биопсии, взятые в день 0

• 1 повторная биопсия на 7, 14 или 21 день (рандомизированная)
• 1 повторная биопсия на 28, 42 или 56 день (рандомизированная)
• 1 целевая (первичная) биопсия для наблюдения без повторного иссечения Количество субъектов: 18

Критерии включения

Приемлемые субъекты должны соответствовать всем следующим критериям включения при скрининге:

1. Здоровые испытуемые в возрасте от 18 до 30 лет (включительно). Состояние здоровья подтверждается отсутствием признаков какого-либо клинически значимого активного или неконтролируемого хронического заболевания на основании подробного анамнеза, полного медицинского осмотра, включая основные показатели жизнедеятельности, забора крови на гематологию, биохимию и вирусологию, анализа мочи, анализа мочи на наркотики и котинина, и тестирование дыхания на алкоголь. В случае неопределенных или сомнительных результатов тесты, проведенные во время скрининга, могут быть повторены перед рандомизацией для подтверждения приемлемости или признаны клинически нерелевантными для здоровых субъектов.
2. Индекс массы тела (ИМТ) от 18 до 30 кг/м2 включительно
3. Фитцпатрик Тип кожи I-II (европеоидный тип).
4. Подходит для биопсии нижней части спины (нет чрезмерного роста волос, нет местного кожного заболевания)
5. Желание дать письменное информированное согласие и желание и возможность соблюдать протокол исследования.

Критерий исключения

Приемлемые субъекты не должны соответствовать ни одному из следующих критериев исключения при скрининге:

1. В анамнезе образование патологических рубцов (келоидные, гипертрофические рубцы)
2. Любая модификация тела в нижней части спины, препятствующая взятию биопсии неизмененной кожи (например, татуировки, пирсинг, импланты)
3. Любое заболевание, связанное с нарушением иммунной системы, включая аутоиммунные заболевания, ВИЧ и пациентов после трансплантации.
4. Требование приема иммуносупрессивных или иммуномодулирующих препаратов, включая глюкокортикоиды, нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) и химиотерапевтические препараты в течение 30 дней до включения в исследование или планируется использовать в ходе исследования.
5. Наличие любого текущего и/или рецидивирующего патологического, клинически значимого состояния кожи.
6. Использование местных лекарств (рецептурных или безрецептурных (OTC)) в течение 30 дней после начала исследования. локальная лечебная зона.
7. Беременность, положительный тест на беременность, намерение забеременеть или кормление грудью.
8. Текущий курильщик и/или постоянный пользователь других никотинсодержащих продуктов (например, пластырей).
9. Среднее потребление более 14 единиц алкоголя в неделю
10. Загар из-за принятия солнечных ванн, чрезмерного пребывания на солнце или солярия в течение 3 недель после зачисления или запланированного в течение курса исследования
11. Участие в исследовании исследуемого препарата или устройства в течение 3 месяцев до скрининга или более 4 раз в год.
12. Потеря или донорство крови более 500 мл в течение трех месяцев до скрининга.
13. Любое (медицинское) состояние, которое, по мнению исследователя, потенциально может поставить под угрозу безопасность или соответствие субъекта или может помешать успешному завершению субъектами клинического исследования.

Сопутствующие лекарства Никакие рецептурные или безрецептурные препараты (за исключением поливитаминов) не будут разрешены в течение 21 дня до начала исследования или менее чем за 5 периодов полувыведения (в зависимости от того, что дольше) и в течение исследования. Исключение составляют парацетамол (до 4 г/сут) при местных болях. Использование обезболивающих будет определяться исследователем индивидуально. Другие исключения будут сделаны только в том случае, если обоснование будет обсуждено и четко задокументировано.

Конечные точки

• Биомаркеры биопсии:

  • Гистология с окрашиванием гематоксилином и эозином (HE)
  • Иммуногистохимия с биомаркерами, связанными с заживлением ран (например, CD31, коллаген I, коллаген III, аСМА, фибронектин)
  • RNA-seq или qRT-PCR для биомаркеров, связанных с заживлением ран (например, VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Местные биомаркеры кожи для биомаркеров, связанных с заживлением ран (например, VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) с помощью пластыря для трансдермального анализа (TAP)
• Клиническая визуализация (например, 2D- и 3D-фотография, термография, лазерная спекл-контрастная визуализация (LSCI), трансэпидермальная потеря воды (TEWL), колориметрия)
• Клиническая оценка (шкала оценки эритемы, красно-желто-черная (RYB) шкала оценки ран, шкала оценки рубцов пациента и наблюдателя (POSAS))
• Микробиом кожи (здоровые и биоптаты) Конечные точки переносимости/безопасности
• Нежелательные явления (НЯ)
• Местная толерантность (шкала оценки эритемы, шкала оценки ран RYB, POSAS, NRS, зуд и боль). Все вышеупомянутые фармакодинамические измерения и измерения безопасности будут выполняться несколько раз в ходе исследования в соответствии с графиком посещения и оценки.

Обоснование размера выборки Будет исследована группа из 18 здоровых добровольцев. Это оправдано, поскольку основной задачей является изучение и мониторинг модели заживления ран. Формальный расчет мощности не проводился, учитывая исследовательский характер исследования.

Статистическая методология Перечни данных и средние значения будут представлены для фармакодинамики и мер безопасности.

Учитывая исследовательский характер исследования, фармакодинамические конечные точки будут в первую очередь анализироваться с использованием описательной статистики. Все фармакодинамические конечные точки будут суммированы (среднее значение и стандартное отклонение среднего, медиана, минимальное и максимальное значения) по времени, а также будут представлены графически как среднее значение во времени со стандартным отклонением в виде планок погрешностей. Во всех сводках данных будут использоваться как номинальные результаты, так и логарифмически преобразованные результаты и изменения по сравнению с исходными результатами. Все категориальные фармакодинамические конечные точки будут суммированы по частотам.