Sebgyógyulás egészséges önkéntesekben

Háttér és indoklás A bőr kritikus szerepet játszik a védelemben, ahol gátat képez a károsodásokkal és a kórokozókkal szemben a külső és belső környezet között. A sebek rontják védő szerepét azáltal, hogy megzavarják a bőr és az alatta lévő lágyszövetek működését és normál szerkezetét. A sérülésre adott válaszként a sebgyógyulás a hiba gyors helyreállítása érdekében történik. Ez a folyamat magában foglalja többek között a keratinociták, fibroblasztok, endoteliális sejtek, makrofágok és vérlemezkék aktiválását, és több fázisból áll, beleértve a vérzéscsillapítást, a gyulladást, a migrációt és a sejtproliferációt, valamint az érést és az átépülést. A sebgyógyulás lefolyásának leegyszerűsített vázlata a 2. ábrán látható. A különböző sejttípusok, extracelluláris mátrix és számos reaktív molekula széles körű bevonása miatt a sebgyógyulás minden fázisa jellegzetes változásokat idéz elő a szöveten belül. A folyamat bármely részének hiánya késleltetett sebgyógyuláshoz, rendellenes hegképződéshez vagy krónikus sebekhez vezethet.

Egészséges önkéntesek sebgyógyulásának tanulmányozására az irodalomban korábban leírtak egy bőrlyukasztásos biopsziával végzett kihívási modellt. Ennek a modellnek a jellemzését azonban nem végezték el átfogóan, mivel a biopsziák fejlett elemzését elhagyták. Ezenkívül a korábbi tanulmányokban végzett elemzések csak részben írták le a sebgyógyulási folyamatokat vagy a jellemzéshez nem elegendő időpontok, vagy több sebgyógyulási mód ritka egyidejű értékelése miatt. Ezenkívül az új, nem invazív képalkotó módszerek, beleértve a termográfiát, a 3D-s fényképezést, a multispektrális képalkotást, lehetővé teszik a sebmorfológia átfogóbb profilalkotását.

Ennek a tanulmánynak az általános célja egy szabványos modell kidolgozása a bőrsérülés ideiglenes és lokális előidézésére a sebgyógyulás vizsgálata és a sebzáródás monitorozása céljából. Ez a klinikai modell lehetővé teszi a jövőbeni alkalmazást a farmakológia bizonyítására és a koncepció igazolására, valamint a gyógyszerprofilok meghatározására a korai gyógyszerfejlesztési programokban. Pontosabban, a kísérlet célja, hogy feltárja és jellemezze a jól körülhatárolható bőrsérülés indukcióját és a természetes sebgyógyulási folyamatot a különböző fázisok során egy sor bőrgyógyászati ​​vizsgálat segítségével, egészséges önkénteseken végzett skin punch biopsziát követően. Ezenkívül értékelni fogják a biztonságot és az elviselhetőséget.

A bőrlyukasztásos biopsziát követő sebgyógyulási hatások jellemzése és monitorozása biofizikai, biokémiai, képalkotó, klinikai paraméterek és az alany által jelentett eredmények segítségével történik.

Cél(ok) Elsődleges cél

• Standardizált, kiváltott bőrtrauma utáni sebgyógyulás jellemzése és monitorozása Másodlagos célok
• A biopszia által kiváltott bőrsérülés biztonságosságának és tolerálhatóságának értékelése Tervezés Ez egy megfigyeléses, egyközpontú, egykaros vizsgálat. Kezelések A biopsziás helyeket másodlagos gyógyulási szándékkal kezeljük tapadásmentes gézkötéssel, majd 48 óra elteltével kezelés nélkül.

Vizsgálati gyógyszer Nem alkalmazható Összehasonlító gyógyszer Ebben a vizsgálatban nem használnak összehasonlító gyógyszert. Vizsgálati időszakok A vizsgálat teljes időtartama körülbelül 14 hét lesz: 4 hét a szűrés és 10 hét megfigyelés. Az alanyok 14 alkalommal látogatják meg a CHDR-t.

Alanyok / Csoportok Összesen 18 egészséges önkéntes felvételét tervezik. A vizsgálat 1 kohorszból áll, randomizált ismételt biopsziás gyűjtési idővel. A 0. napon minden önkéntestől három bőrütési biopsziát (3 mm) vesznek a hát alsó részéből, körülbelül 3-5 cm távolsággal. Minden biopsziás elváltozást gézkötéssel (Jelonet®, paraffin géz + Tegaderm®) kezelünk 48 órán keresztül, majd eltávolítjuk a gézt. Ezt követően a biopsziás elváltozások kezeletlenek maradnak. Egy, a 0. napon vett biopsziás minta szolgál kiindulási mérésként az ismételt mintákhoz a szövettani, immunhisztokémiai és RNS-szekvenálás (RNS-seq) vagy a valós idejű reverz transzkripciós polimeráz láncreakció (qRT-PCR) értékelése tekintetében.

A 7., 14. vagy 21. napon (biopsziás lézió és randomizált nap), valamint a 28., 42. vagy 56. napon (biopsziás lézió és randomizált nap) ismételt biopsziát vesznek ugyanarról a helyről, mint a 0. napon. A megfigyelési biopszia (véletlenszerű biopsziás lézió) elsődleges biopsziaként szolgál, és minden mérés során követni fogják. Minden ismételt biopsziás elváltozást gézkötéssel (Jelonet®, paraffin géz + Tegaderm®) is kezelünk 48 órán keresztül, majd a gézet eltávolítjuk, és megkezdődik a megfigyelés.

Kohorsz: 1 Megfigyelési időszak (2. nap - 70. nap): 3 biopszia a 0. napon

• 1 ismételt biopszia a 7., 14. vagy 21. napon (randomizált)
• 1 ismételt biopszia a 28., 42. vagy 56. napon (randomizált)
• 1 cél (elsődleges) biopszia re-excízió nélküli megfigyeléshez Alanyok száma: 18

Bevételi kritériumok

A jogosult alanyoknak meg kell felelniük az összes alábbi felvételi kritériumnak a szűréskor:

1. Egészséges alanyok, 18-30 évesek (beleértve). Az egészségi állapotot a klinikailag jelentős aktív vagy nem kontrollált krónikus betegség bizonyítékának hiánya igazolja részletes anamnézis, teljes fizikális vizsgálat, beleértve az életjeleket, hematológiai, kémiai és virológiai vérminta, vizeletvizsgálat, vizelet gyógyszer- és kotininvizsgálat, és alkoholos kilégzési teszt. Bizonytalan vagy megkérdőjelezhető eredmények esetén a szűrés során elvégzett tesztek a véletlen besorolás előtt megismételhetők az alkalmasság megerősítése érdekében, vagy az egészséges alanyok esetében klinikailag irrelevánsnak ítélhetők.
2. Testtömegindex (BMI) 18 és 30 kg/m2 között, beleértve
3. Fitzpatrick I-II típusú bőr (kaukázusi típus).
4. A hát alsó része biopszia elvégzésére alkalmas (nincs túlzott szőrnövekedés, nincs helyi bőrbetegség)
5. Hajlandó írásos beleegyező nyilatkozatot adni, és hajlandó és képes betartani a vizsgálati protokollt.

Kizárási kritériumok

A jogosult alanyoknak nem kell megfelelniük a következő kizárási kritériumok egyikének sem a szűréskor:

1. Patológiás hegképződés anamnézisében (keloid, hipertrófiás hegek)
2. A hát alsó részének bármilyen testmódosítása, amely akadályozza a változatlan bőr biopsziás felvételét (pl. tetoválás, piercing, implantátum)
3. Minden olyan betegség, amely az immunrendszer károsodásához kapcsolódik, beleértve az autoimmun betegségeket, a HIV-fertőzést és a transzplantált betegeket.
4. Immunszuppresszív vagy immunmoduláló gyógyszeres kezelés szükségessége, beleértve a glükokortikoidokat, a nem szteroid gyulladáscsökkentő szereket (NSAID-okat) és a kemoterápiás gyógyszereket a beiratkozást megelőző 30 napon belül, vagy a vizsgálat során használni szándékoznak.
5. Bármilyen aktuális és/vagy visszatérő patológiás, klinikailag jelentős bőrbetegsége van.
6. Helyi gyógyszer (vényköteles vagy vény nélkül kapható (OTC)) alkalmazása a vizsgálat megkezdését követő 30 napon belül. helyi kezelési terület.
7. Terhes, pozitív terhességi teszt, terhességet tervez, vagy szoptat.
8. Jelenlegi dohányos és/vagy egyéb nikotintartalmú termékek (pl. tapaszok) rendszeres használója.
9. Több mint 14 egység alkoholfogyasztás átlagosan hetente
10. Napozás, túlzott napozás vagy szoláriumozás miatti szoláriumozás a beiratkozást követő 3 héten belül, vagy a vizsgálat során ezt tervezik
11. Vizsgálati gyógyszer- vagy eszközvizsgálatban való részvétel a szűrést megelőző 3 hónapon belül vagy évente több mint 4 alkalommal.
12. 500 ml-nél nagyobb vérveszteség vagy véradás a szűrést megelőző három hónapon belül.
13. Bármilyen (egészségügyi) állapot, amely a vizsgáló véleménye szerint potenciálisan veszélyezteti az alany biztonságát vagy megfelelőségét, vagy megakadályozhatja a vizsgálati alanyok sikeres klinikai vizsgálatát.

Egyidejűleg alkalmazott gyógyszerek Semmilyen vényköteles gyógyszer vagy vény nélkül kapható gyógyszer (a multivitaminok kivételével) nem engedélyezett a vizsgálat megkezdése előtt 21 napon belül, illetve 5-nél rövidebb felezési idő (amelyik hosszabb) és a vizsgálat ideje alatt. Ez alól kivételt képez a paracetamol (legfeljebb 4 g/nap) helyi fájdalom esetén. A fájdalomcsillapítók alkalmazását a vizsgáló egyénileg határozza meg. Egyéb kivételek csak akkor tehetők, ha az indoklást megvitatják és egyértelműen dokumentálják.

Végpontok

• Biopsziás biomarkerek:

  • Szövettan hematoxilin és eozin (HE) festéssel
  • Immunhisztokémia sebgyógyulással kapcsolatos biomarkerekkel (pl. CD31, kollagén I, kollagén III, aSMA, fibronektin)
  • RNA-seq vagy qRT-PCR a sebgyógyulással kapcsolatos biomarkerekhez (pl. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Helyi bőr biomarkerek a sebgyógyulással kapcsolatos biomarkerekhez (pl. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) transzdermális analízis tapasszal (TAP)
• Klinikai képalkotás (pl. 2D és 3D fényképezés, termográfia, lézeres foltos kontrasztos képalkotás (LSCI), transz epidermális vízvesztés (TEWL), kolorimetria
• Klinikai értékelés (eritéma besorolási skála, vörös-sárga-fekete (RYB) sebértékelő skála, páciens és megfigyelő hegértékelési skála (POSAS))
• Bőr mikrobiom (egészséges és biopsziás elváltozások) Tolerálhatóság/biztonsági végpontok
• Nemkívánatos események (AE)
• Lokális tolerancia (eritéma osztályozási skála, RYB sebértékelési skála, POSAS, NRS viszketés és fájdalom) Az összes fent említett farmakodinámiás és biztonsági mérést többször elvégzik a vizsgálat során a Vizit és értékelés ütemtervének megfelelően.

Mintaméret Indokolás 18 egészséges önkéntesből álló teljes kohorszlétszámot vizsgálnak meg. Ez indokolt, mivel az elsődleges cél a sebgyógyulási modell feltárása és monitorozása. A vizsgálat feltáró jellege miatt formális teljesítményszámításra nem került sor.

Statisztikai módszertan A farmakodinámiára és a biztonsági intézkedésekre vonatkozó adatsorok és átlagok kerülnek bemutatásra.

Tekintettel a vizsgálat feltáró jellegére, a farmakodinámiás végpontokat elsősorban leíró statisztikák segítségével elemezzük. Az összes farmakodinámiás végpont összegzésre kerül (az átlagértékek átlaga és szórása, medián, minimum és maximum értékek) idő szerint, és grafikusan is megjelenik az idő függvényében, a szórást hibasávként. Mind a névleges eredményeket, mind a log-transzformált eredményeket és a kiindulási eredményekhez képesti változást felhasználja az összes adatösszegzés. Az összes kategorikus farmakodinámiás végpontot gyakoriság szerint összegezzük.