Curación de heridas en voluntarios sanos

Antecedentes y justificación La piel juega un papel crítico en la protección donde actúa como una barrera contra daños y patógenos entre los ambientes externo e interno. Las heridas comprometen su función protectora al alterar la función y la estructura normal de la piel y el tejido blando subyacente. Como respuesta a la lesión, se produce la cicatrización de la herida para restaurar rápidamente el defecto. Este proceso implica la activación de, entre otros, queratinocitos, fibroblastos, células endoteliales, macrófagos y plaquetas y consta de múltiples fases que incluyen hemostasia, inflamación, migración y proliferación celular, y maduración y remodelación. En la Figura 2 se muestra un esquema simplificado del curso de la cicatrización de heridas. Debido a la amplia participación de varios tipos de células, la matriz extracelular y muchas moléculas reactivas, cada fase de la cicatrización de heridas produce cambios característicos en el tejido. Una deficiencia en cualquier parte del proceso puede provocar un retraso en la cicatrización de heridas, formación de cicatrices anormales o heridas crónicas.

Para estudiar la cicatrización de heridas en voluntarios sanos, se ha descrito previamente en la literatura un modelo de desafío con biopsias en sacabocados de la piel. Sin embargo, la caracterización de este modelo no se realizó de manera exhaustiva ya que se omitió el análisis avanzado de las biopsias. Además, los análisis realizados en estudios previos solo describieron parcialmente los procesos de cicatrización de heridas, ya sea por puntos de tiempo insuficientes para la caracterización o escasas evaluaciones simultáneas de múltiples modalidades de cicatrización de heridas. Además, las metodologías novedosas de obtención de imágenes no invasivas, como la termografía, la fotografía en 3D y la obtención de imágenes multiespectrales, permiten obtener perfiles más completos de la morfología de la herida.

El objetivo general de este estudio es desarrollar un modelo estandarizado para inducir temporal y localmente un traumatismo cutáneo para investigar la cicatrización de heridas y controlar el cierre de heridas. Este modelo clínico permitirá la aplicación futura como estudios de prueba de farmacología y prueba de concepto, así como perfiles de fármacos en los primeros programas de desarrollo de fármacos. Más específicamente, el objetivo del ensayo es explorar y caracterizar la inducción de traumatismos cutáneos bien definidos y el proceso natural de curación de heridas en el transcurso de las diferentes fases utilizando una batería de evaluaciones dermatológicas después de biopsias cutáneas con sacabocados en voluntarios sanos. Además, se evaluará la seguridad y la tolerabilidad.

La caracterización y el seguimiento de los efectos de cicatrización de heridas después de las biopsias con sacabocados de la piel se realizarán por medio de parámetros biofísicos, bioquímicos, de imágenes, clínicos y resultados informados por el sujeto.

Objetivo(s) Objetivo principal

• Caracterizar y monitorear la cicatrización de heridas después de un traumatismo cutáneo inducido estandarizado Objetivos secundarios
• Evaluar la seguridad y la tolerabilidad del traumatismo cutáneo inducido por biopsia Diseño Este es un estudio observacional, de un solo centro y de un solo brazo. Tratamientos Los sitios de biopsia se tratarán por intención de curación secundaria con un apósito de gasa antiadherente seguido de ningún tratamiento después de 48 horas.

Fármaco en investigación No aplicable Fármaco comparativo No se utilizará ningún fármaco comparativo en este estudio. Períodos de estudio La duración total del estudio será de aproximadamente 14 semanas: 4 semanas de cribado y 10 semanas de observación. Los sujetos visitarán CHDR 14 veces.

Sujetos/Grupos Se planea inscribir un total de 18 voluntarios sanos. El estudio implicará 1 cohorte con un tiempo de recolección de biopsia repetido aleatorio. Se tomarán tres biopsias cutáneas con sacabocados (3 mm) de la parte inferior de la espalda de cada voluntario el día 0, con una distancia de aproximadamente 3-5 cm entre ellas. Todas las lesiones de la biopsia serán tratadas con un apósito de gasa (Jelonet®, gasa parafina + Tegaderm®) durante 48h tras las cuales se retira la gasa. De ahora en adelante, las lesiones de la biopsia permanecerán sin tratamiento. Una muestra de biopsia tomada el día 0 servirá como medida de referencia para las muestras repetidas con respecto a las evaluaciones de histología, inmunohistoquímica y secuenciación de ARN (RNA-seq) o reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (qRT-PCR).

Se tomarán biopsias repetidas de la misma ubicación que el día 0 el día 7, 14 o 21 (lesión de biopsia y día aleatorizado) y los días 28, 42 o 56 (lesión de biopsia y día aleatorizado) para todos los sujetos. La biopsia de observación (biopsia de lesión aleatoria) servirá como biopsia primaria y se seguirá para todas las mediciones. Todas las lesiones de repetición de la biopsia también se tratarán con un apósito de gasa (Jelonet®, gasa parafina + Tegaderm®) durante 48 h, después de lo cual se retira la gasa y se inicia la observación.

Cohorte: 1 Período de observación (día 2 - día 70): 3 biopsias tomadas el día 0

• 1 biopsia repetida tomada el día 7, 14 o 21 (aleatorizada)
• 1 biopsia repetida tomada el día 28, 42 o 56 (aleatorizada)
• 1 biopsia diana (primaria) para observación sin reescisión Número de sujetos: 18

Criterios de inclusión

Los sujetos elegibles deben cumplir con todos los siguientes criterios de inclusión en la selección:

1. Sujetos sanos, de 18 a 30 años de edad (inclusive). El estado de salud se verifica por la ausencia de evidencia de cualquier enfermedad crónica activa o no controlada clínicamente significativa luego de un historial médico detallado, un examen físico completo que incluye signos vitales, muestras de sangre para hematología, química y virología, análisis de orina, pruebas de drogas y cotinina en orina, y pruebas de aliento alcohólico. En el caso de resultados inciertos o cuestionables, las pruebas realizadas durante la selección pueden repetirse antes de la aleatorización para confirmar la elegibilidad o considerarse clínicamente irrelevantes para sujetos sanos.
2. Índice de masa corporal (IMC) entre 18 y 30 kg/m2, ambos inclusive
3. Fitzpatrick Tipo de piel I-II (tipo caucásico).
4. Parte inferior de la espalda elegible para realizar biopsias (sin crecimiento excesivo de vello, sin trastorno cutáneo local)
5. Dispuesto a dar su consentimiento informado por escrito y dispuesto y capaz de cumplir con el protocolo del estudio.

Criterio de exclusión

Los sujetos elegibles no deben cumplir ninguno de los siguientes criterios de exclusión en la selección:

1. Antecedentes de formación de cicatrices patológicas (cicatrices queloides, hipertróficas)
2. Cualquier forma de modificación corporal de la parte inferior de la espalda que impida la obtención de una biopsia de piel inalterada (p. tatuajes, piercings, implantes)
3. Cualquier enfermedad asociada con el deterioro del sistema inmunitario, incluidas las enfermedades autoinmunes, el VIH y los pacientes trasplantados.
4. Requerimiento de medicamentos inmunosupresores o inmunomoduladores, incluidos glucocorticoides, medicamentos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) y medicamentos quimioterapéuticos dentro de los 30 días anteriores a la inscripción o que se planifique usar durante el transcurso del estudio.
5. Tiene alguna afección de la piel actual y/o recurrente patológicamente significativa desde el punto de vista clínico.
6. Uso de medicamentos tópicos (recetados o de venta libre (OTC)) dentro de los 30 días posteriores al inicio del estudio. área de tratamiento local.
7. Embarazada, prueba de embarazo positiva, intención de quedar embarazada o lactancia.
8. Fumador actual y/o usuario habitual de otros productos que contienen nicotina (p. ej., parches).
9. Consumo promedio de más de 14 unidades de alcohol por semana
10. Bronceado debido a tomar el sol, exposición excesiva al sol o una cabina de bronceado dentro de las 3 semanas posteriores a la inscripción o planeado hacerlo durante el curso del estudio
11. Participación en un estudio de dispositivo o fármaco en investigación dentro de los 3 meses anteriores a la selección o más de 4 veces al año.
12. Pérdida o donación de sangre superior a 500 ml en los tres meses anteriores a la selección.
13. Cualquier condición (médica) que, en opinión del investigador, podría comprometer potencialmente la seguridad o el cumplimiento del sujeto o puede impedir que los sujetos completen con éxito el ensayo clínico.

Medicamentos concomitantes No se permitirán medicamentos recetados o de venta libre (excluyendo multivitamínicos) dentro de los 21 días anteriores al inicio del estudio, o menos de 5 vidas medias (lo que sea más largo), y durante el curso del estudio. Se exceptúa el paracetamol (hasta 4 g/día) en caso de dolor local. El investigador determinará individualmente el uso de medicamentos para el dolor. Solo se harán otras excepciones si la justificación se discute y se documenta claramente.

Puntos finales

• Biomarcadores de biopsia:

  • Histología con tinción de hematoxilina y eosina (HE)
  • Inmunohistoquímica con biomarcadores relacionados con la cicatrización de heridas (p. CD31, colágeno I, colágeno III, aSMA, fibronectina)
  • RNA-seq o qRT-PCR para biomarcadores relacionados con la cicatrización de heridas (p. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Biomarcadores cutáneos locales para biomarcadores relacionados con la cicatrización de heridas (p. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) mediante parche de análisis transdérmico (TAP)
• Imágenes clínicas (p. Fotografía 2D y 3D, termografía, imágenes de contraste de motas láser (LSCI), pérdida de agua transepidérmica (TEWL), colorimetría)
• Evaluación clínica (escala de clasificación del eritema, escala de evaluación de heridas rojo-amarillo-negro (RYB), escala de evaluación de cicatrices del paciente y el observador (POSAS))
• Microbioma cutáneo (lesiones sanas y de biopsia) Criterios de valoración de tolerabilidad/seguridad
• Eventos adversos (EA)
• Tolerancia local (escala de clasificación del eritema, escala de evaluación de heridas RYB, POSAS, prurito y dolor NRS) Todas las medidas farmacodinámicas y de seguridad mencionadas anteriormente se realizarán varias veces durante el estudio de acuerdo con el calendario de visitas y evaluaciones.

Justificación del tamaño de la muestra Se investigará un tamaño de cohorte total de 18 voluntarios sanos. Esto se justifica ya que el objetivo principal es explorar y monitorear el modelo de cicatrización de heridas. No se realizó ningún cálculo de potencia formal dado el carácter exploratorio del estudio.

Metodología estadística Se presentarán listas de datos y promedios para las medidas de farmacodinámica y seguridad.

Dado el carácter exploratorio del estudio, los criterios de valoración farmacodinámicos se analizarán principalmente mediante estadística descriptiva. Todos los criterios de valoración farmacodinámicos se resumirán (media y desviación estándar de los valores medio, mediano, mínimo y máximo) por tiempo y también se presentarán gráficamente como la media a lo largo del tiempo, con la desviación estándar como barras de error. En todos los resúmenes de datos se utilizarán tanto los resultados nominales como los resultados transformados logarítmicamente y el cambio de los resultados de línea de base. Todos los criterios de valoración farmacodinámicos categóricos se resumirán por frecuencias.