Gojenie się ran u zdrowych ochotników

Tło i uzasadnienie Skóra odgrywa kluczową rolę w ochronie, ponieważ działa jako bariera przed uszkodzeniami i patogenami między środowiskiem zewnętrznym i wewnętrznym. Rany osłabiają jego ochronną rolę, zakłócając funkcję i normalną strukturę skóry oraz leżącej pod nią tkanki miękkiej. W odpowiedzi na uraz następuje gojenie rany w celu szybkiego przywrócenia ubytku. Proces ten obejmuje aktywację, między innymi, keratynocytów, fibroblastów, komórek śródbłonka, makrofagów i płytek krwi i składa się z wielu faz, w tym hemostazy, stanu zapalnego, migracji i proliferacji komórkowej oraz dojrzewania i przebudowy. Uproszczony schemat przebiegu gojenia rany przedstawiono na rycinie 2. Ze względu na szerokie zaangażowanie różnych typów komórek, macierzy pozakomórkowej i wielu reaktywnych cząsteczek, każda faza gojenia rany powoduje charakterystyczne zmiany w tkance. Niedobór w dowolnej części procesu może prowadzić do opóźnionego gojenia się ran, nieprawidłowego tworzenia się blizn lub ran przewlekłych.

Aby zbadać gojenie się ran u zdrowych ochotników, w literaturze opisano wcześniej model prowokacyjny z biopsjami skóry. Charakterystyka tego modelu nie została jednak przeprowadzona kompleksowo, ponieważ pominięto zaawansowaną analizę biopsji. Ponadto analizy przeprowadzone w poprzednich badaniach tylko częściowo opisywały procesy gojenia się ran albo przez niewystarczające punkty czasowe do scharakteryzowania, albo przez niewielką liczbę jednoczesnych ocen wielu sposobów gojenia się ran. Ponadto nowe nieinwazyjne metody obrazowania, w tym termografia, fotografia 3D, obrazowanie wielospektralne, umożliwiają bardziej wszechstronne profilowanie morfologii rany.

Ogólnym celem tego badania jest opracowanie znormalizowanego modelu tymczasowego i miejscowego wywoływania urazu skóry w celu zbadania gojenia się rany i monitorowania jej zamykania. Ten model kliniczny umożliwi przyszłe zastosowanie jako badania farmakologiczne i koncepcyjne, a także profilowanie leków we wczesnych programach opracowywania leków. Mówiąc dokładniej, celem badania jest zbadanie i scharakteryzowanie indukcji dobrze zdefiniowanego urazu skóry i naturalnego procesu gojenia się ran w trakcie różnych faz przy użyciu zestawu ocen dermatologicznych po biopsjach skóry u zdrowych ochotników. Ponadto oceniane będzie bezpieczeństwo i tolerancja.

Charakterystyka i monitorowanie skutków gojenia się ran po biopsjach skórnych zostanie przeprowadzone za pomocą parametrów biofizycznych, biochemicznych, obrazowych, klinicznych i wyników zgłaszanych przez pacjentów.

Cel(e) Główny cel

• Charakterystyka i monitorowanie gojenia się rany po znormalizowanym, wywołanym urazie skóry. Cele drugorzędne
• Ocena bezpieczeństwa i tolerancji urazów skóry wywołanych biopsją Projekt Jest to obserwacyjne, jednoośrodkowe, jednoramienne badanie. Zabiegi Miejsca po biopsji zostaną poddane wtórnej intencji gojenia za pomocą nieprzywierającego opatrunku z gazy, a następnie nie będą leczone po 48 godzinach.

Badany lek Nie dotyczy Lek porównawczy Żaden lek porównawczy nie będzie używany w tym badaniu. Okresy badań Całkowity czas trwania badania wyniesie około 14 tygodni: 4 tygodnie na badania przesiewowe i 10 tygodni na obserwację. Badani odwiedzą CHDR 14 razy.

Pacjenci / Grupy Planuje się włączenie 18 zdrowych ochotników. Badanie obejmie 1 kohortę z randomizowanym okresem powtarzanej biopsji. Od każdego ochotnika w dniu 0 zostaną pobrane trzy biopsje skórne (3 mm) z dolnej części pleców, w odległości około 3-5 cm pomiędzy nimi. Wszystkie zmiany biopsyjne będą leczone opatrunkiem z gazy (Jelonet®, gaza parafinowa + Tegaderm®) przez 48h, po czym gaza zostanie usunięta. Odtąd zmiany biopsyjne pozostaną nieleczone. Jedna próbka biopsyjna pobrana w dniu 0 będzie służyć jako pomiar wyjściowy dla powtarzanych próbek w odniesieniu do ocen histologicznych, immunohistochemicznych i sekwencjonowania RNA (RNA-seq) lub reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją w czasie rzeczywistym (qRT-PCR).

Powtórzone biopsje tego samego miejsca co w dniu 0 zostaną pobrane w dniu 7, 14 lub 21 (randomizacja zmiany po biopsji i dzień) oraz w dniu 28, 42 lub 56 (zmiana po biopsji i dzień randomizacja) dla wszystkich pacjentów. Biopsja obserwacyjna (randomizowana zmiana biopsyjna) będzie służyć jako biopsja pierwotna i będzie wykonywana przy wszystkich pomiarach. Wszystkie powtórzone zmiany biopsyjne będą również leczone opatrunkiem z gazy (Jelonet®, gaza parafinowa + Tegaderm®) przez 48h, po czym gaza zostanie usunięta i rozpocznie się obserwacja.

Kohorta: 1 Okres obserwacji (dzień 2 - dzień 70): 3 biopsje pobrane w dniu 0

• 1 powtórna biopsja pobrana w dniu 7, 14 lub 21 (randomizowana)
• 1 powtórna biopsja pobrana w dniu 28, 42 lub 56 (randomizowana)
• 1 biopsja docelowa (pierwotna) do obserwacji bez ponownego wycięcia Liczba badanych: 18

Kryteria przyjęcia

Kwalifikujący się uczestnicy muszą spełniać wszystkie poniższe kryteria włączenia podczas badania przesiewowego:

1. Osoby zdrowe, w wieku od 18 do 30 lat (włącznie). Stan zdrowia jest weryfikowany przez brak dowodów na jakąkolwiek klinicznie istotną czynną lub niekontrolowaną chorobę przewlekłą po przeprowadzeniu szczegółowego wywiadu, pełnego badania fizykalnego, w tym parametrów życiowych, pobraniu krwi w badaniach hematologicznych, chemicznych i wirusologicznych, analizie moczu, badaniu moczu na obecność narkotyków i kotyniny, oraz badanie alkomatem. W przypadku niepewnych lub wątpliwych wyników badania wykonane podczas skriningu mogą zostać powtórzone przed randomizacją w celu potwierdzenia kwalifikowalności lub uznane za nieistotne klinicznie dla osób zdrowych.
2. Wskaźnik masy ciała (BMI) od 18 do 30 kg/m2 włącznie
3. Fitzpatrick Typ skóry I-II (typ kaukaski).
4. Dolna część pleców kwalifikuje się do wykonania biopsji (brak nadmiernego owłosienia, brak miejscowych zmian skórnych)
5. Gotowość do wyrażenia pisemnej świadomej zgody oraz chęć i zdolność do przestrzegania protokołu badania.

Kryteria wyłączenia

Kwalifikujący się uczestnicy nie mogą spełniać żadnego z poniższych kryteriów wykluczenia podczas badania przesiewowego:

1. Historia powstawania blizn patologicznych (bliznowce, blizny przerostowe)
2. Wszelkie formy modyfikacji ciała dolnej części pleców utrudniające pobranie biopsji niezmienionej skóry (np. tatuaże, kolczyki, implanty)
3. Każda choroba związana z upośledzeniem układu odpornościowego, w tym choroby autoimmunologiczne, HIV i pacjenci po przeszczepach.
4. Konieczność przyjmowania leków immunosupresyjnych lub immunomodulujących, w tym glukokortykoidów, niesteroidowych leków przeciwzapalnych (NLPZ) i leków chemioterapeutycznych w ciągu 30 dni przed włączeniem lub planowanym zastosowaniem w trakcie badania.
5. Mieć jakiekolwiek aktualne i/lub nawracające patologicznie, istotne klinicznie zmiany skórne.
6. Stosowanie leków miejscowych (na receptę lub dostępnych bez recepty (OTC)) w ciągu 30 dni od rozpoczęcia badania. miejscowy obszar leczenia.
7. Ciąża, pozytywny test ciążowy, zamiar zajścia w ciążę lub karmienie piersią.
8. Aktualny palacz i/lub regularny użytkownik innych produktów zawierających nikotynę (np. plastrów).
9. Średnie spożycie powyżej 14 jednostek alkoholu tygodniowo
10. opalanie się w wyniku opalania, nadmiernego nasłonecznienia lub korzystania z solarium w ciągu 3 tygodni od zapisania lub planowane w trakcie studiów
11. Udział w badaniu eksperymentalnego leku lub urządzenia w ciągu 3 miesięcy przed badaniem przesiewowym lub więcej niż 4 razy w roku.
12. Utrata lub oddanie krwi powyżej 500 ml w ciągu trzech miesięcy przed badaniem przesiewowym.
13. Każdy stan (medyczny), który w opinii badacza potencjalnie zagroziłby bezpieczeństwu lub zgodności uczestnika lub może uniemożliwić uczestnikom pomyślne ukończenie badania klinicznego.

Leki towarzyszące Żadne leki na receptę ani leki OTC (z wyjątkiem multiwitamin) nie będą dozwolone w ciągu 21 dni przed rozpoczęciem badania lub krócej niż 5 okresów półtrwania (w zależności od tego, który okres jest dłuższy) oraz w trakcie badania. Wyjątek stanowi paracetamol (do 4 g/dobę) w przypadku bólu miejscowego. Stosowanie leków przeciwbólowych będzie ustalane indywidualnie przez badacza. Inne wyjątki zostaną wprowadzone tylko wtedy, gdy uzasadnienie zostanie omówione i jasno udokumentowane.

Punkty końcowe

• Biomarkery biopsyjne:

  • Histologia z barwieniem hematoksyliną i eozyną (HE).
  • Immunohistochemia z biomarkerami związanymi z gojeniem się ran (np. CD31, kolagen I, kolagen III, aSMA, fibronektyna)
  • RNA-seq lub qRT-PCR dla biomarkerów związanych z gojeniem się ran (np. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Lokalne biomarkery skóry dla biomarkerów związanych z gojeniem się ran (np. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) przez transdermalny plaster analityczny (TAP)
• Obrazowanie kliniczne (np. fotografia 2D i 3D, termografia, laserowe kontrastowe obrazowanie plamkowe (LSCI), przeznaskórkowa utrata wody (TEWL), kolorymetria)
• Ocena kliniczna (skala stopniowania rumienia, skala oceny ran czerwono-żółto-czarnych (RYB), skala oceny blizny pacjenta i obserwatora (POSAS))
• Mikrobiom skóry (zmiany zdrowe i biopsyjne) Punkty końcowe tolerancji/bezpieczeństwa
• Zdarzenia niepożądane (AE)
• Tolerancja miejscowa (skala stopniowania rumienia, skala oceny rany RYB, POSAS, świąd i ból NRS) Wszystkie wyżej wymienione pomiary farmakodynamiczne i bezpieczeństwa będą wykonywane wielokrotnie w trakcie badania zgodnie z harmonogramem wizyt i ocen.

Uzasadnienie wielkości próby Zbadana zostanie całkowita wielkość kohorty 18 zdrowych ochotników. Jest to uzasadnione, ponieważ głównym celem jest zbadanie i monitorowanie modelu gojenia się ran. Ze względu na eksploracyjny charakter badania nie przeprowadzono formalnego obliczenia mocy.

Metodologia statystyczna Dla środków farmakodynamicznych i bezpieczeństwa zostaną przedstawione zestawienia danych i średnie.

Biorąc pod uwagę eksploracyjny charakter badania, farmakodynamiczne punkty końcowe zostaną przeanalizowane przede wszystkim przy użyciu statystyk opisowych. Wszystkie farmakodynamiczne punkty końcowe zostaną podsumowane (średnia i odchylenie standardowe średniej, mediany, wartości minimalnych i maksymalnych) według czasu, a także zostaną przedstawione graficznie jako średnia w czasie, z odchyleniem standardowym jako słupkami błędów. Zarówno wyniki nominalne, jak i wyniki przekształcone logarytmicznie oraz zmiany w stosunku do wyników linii bazowej zostaną wykorzystane we wszystkich podsumowaniach danych. Wszystkie kategoryczne farmakodynamiczne punkty końcowe zostaną podsumowane według częstości.